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水稻雄性不育突变体gsl5的基因克隆及不育机理研究

附件第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-30页
    1.1 水稻雄性不育的研究进展第14-24页
        1.1.1 水稻花粉的发育第14-18页
        1.1.2 胼胝质合成酶的研究进展第18-20页
        1.1.3 水稻雄性不育的分子机制第20-24页
    1.2 水稻雌性不育的研究进展第24-26页
        1.2.1 水稻雌蕊的发育第24-25页
        1.2.2 水稻植株的雌性不育第25-26页
    1.3 水稻雌雄不育的研究进展第26-27页
    1.4 研究方法和技术手段第27-28页
    1.5 本研究的目的和意义第28-30页
        1.5.1 本研究的目的第28-29页
        1.5.2 本研究的意义第29-30页
第二章 材料与方法第30-46页
    2.1 实验材料和方法第30-31页
        2.1.1 水稻材料第30页
        2.1.2 菌株第30页
        2.1.3 质粒载体第30页
        2.1.4 实验试剂第30-31页
    2.2 试验方法第31-46页
        2.2.1 突变体的获得第31-32页
        2.2.2 突变体与日本晴植株杂交后代的共分离实验第32-33页
        2.2.3 载体构建及水稻植株转化第33-34页
        2.2.4 GSL5蛋白的亚细胞定位第34-37页
        2.2.5 pPromoterGSL5-GUS转基因植株GUS表达活性检测第37页
        2.2.6 定量RT-PCR第37-38页
        2.2.7 水稻花药组织的石蜡切片第38-39页
        2.2.8 基因表达的原位杂交分析第39-41页
        2.2.9 花粉活力检测第41-42页
        2.2.10苯胺蓝及DAPI染色第42页
        2.2.11扫描电镜观察第42-43页
        2.2.12透射电镜观察第43-44页
        2.2.13免疫金电镜观察第44-45页
        2.2.14胚囊染色观察第45-46页
第三章 结果和分析第46-65页
    3.1 表型观察及不育性状统计第46-47页
    3.2 水稻不育突变体获得及共分离验证第47-48页
    3.3 GSL5基因的表达分析第48-51页
    3.4 GSL5基因家族分析第51-53页
    3.5 水稻GSL5蛋白的亚细胞定位第53-54页
    3.6 gsl5突变体及干涉植株的雌雄蕊发育分析第54-57页
    3.7 成熟花粉活力分析第57-59页
    3.8 花粉管中胼胝质栓检测第59页
    3.9 雄性小孢子发育及突变发生关键时期观察第59-61页
    3.10不同时期的胼胝质积累情况观察第61-62页
    3.11四分体小孢子外壁胼胝质定量分析第62-63页
    3.12减数分裂四分体时期前后的细胞核DAPI染色观察第63页
    3.13新释放的小孢子和成熟花粉的横切面透射电镜观察第63-65页
第四章 讨论第65-68页
    4.1 OsGSL5基因对于小孢子发生是必不可少的,但该基因在花药中可能有功能冗余第65-66页
    4.2 GSL5基因在其它器官中的辅助作用第66页
    4.3 胼胝质壁周期性的沉积和降解对于外壁的形成是至关重要的第66-68页
第五章 全文结论第68-69页
参考文献第69-82页
致谢第82-83页
作者简历第83页

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