摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-18页 |
1.1 卵泡发育及调控 | 第9-11页 |
1.1.1 卵泡发育 | 第9页 |
1.1.2 卵泡发育的调控 | 第9-10页 |
1.1.3 颗粒细胞与卵泡发育 | 第10页 |
1.1.4 颗粒细胞的生长调控 | 第10-11页 |
1.1.5 卵母细胞的发育 | 第11页 |
1.2 BCAS2 研究进展 | 第11-15页 |
1.2.1 BCAS2 的发现和命名 | 第11-12页 |
1.2.2 BCAS2 在前体mRNA剪接中的作用 | 第12-13页 |
1.2.3 BCAS2 与细胞分裂、增殖 和凋亡 | 第13-14页 |
1.2.4 BCAS2 与雌激素受体 | 第14-15页 |
1.3 RNA干扰 | 第15-16页 |
1.4 研究问题的由来 | 第16-18页 |
2 研究目的及意义 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-35页 |
3.1 材料 | 第19-22页 |
3.1.1 主要材料 | 第19页 |
3.1.2 主要试剂 | 第19页 |
3.1.3 主要溶液及缓冲液 | 第19-21页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第21-22页 |
3.2 实验方法 | 第22-35页 |
3.2.1 不同发育时期卵巢蛋白样品的收集 | 第22页 |
3.2.2 小鼠颗粒细胞的分离培养和传代 | 第22-23页 |
3.2.3 小鼠颗粒细胞免疫荧光 | 第23-24页 |
3.2.4 小鼠颗粒细胞蛋白质印迹 | 第24-27页 |
3.2.5 小鼠颗粒细胞RNA提取和反转录cDNA | 第27-28页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
3.2.7 颗粒细胞转染 | 第30页 |
3.2.8 细胞增殖检测 | 第30-31页 |
3.2.9 细胞凋亡检测 | 第31页 |
3.2.10 小鼠卵母细胞的收集培养 | 第31-32页 |
3.2.11 小鼠卵母细胞免疫荧光 | 第32-33页 |
3.2.12 小鼠卵母细胞蛋白质印迹 | 第33-35页 |
4 实验结果与分析 | 第35-48页 |
4.1 BCAS2 在小鼠颗粒细胞和卵母细胞中的定位和表达 | 第35-38页 |
4.1.1 BCAS2 在小鼠颗粒细胞中的定位和表达 | 第35-36页 |
4.1.2 BCAS2 在小鼠卵母细胞中的定位和表达 | 第36-38页 |
4.2 PMSG和FSH对BCAS2 的表达的影响 | 第38-41页 |
4.2.1 PMSG对BCAS2 表达的影响 | 第38-40页 |
4.2.2 FSH对体外培养颗粒细胞中BCAS2 mRNA表达的影响 | 第40-41页 |
4.3 RNA干扰敲低BCAS2 对小鼠颗粒细胞增殖和凋亡的影响 | 第41-48页 |
4.3.1 转染条件的优化 | 第41-42页 |
4.3.2 转染效率和干扰效率的检测 | 第42-44页 |
4.3.3 RNA干扰敲低BCAS2 对颗粒细胞增殖的影响 | 第44-46页 |
4.3.4 RNA干扰敲低BCAS2 后对凋亡相关基因的影响 | 第46-48页 |
5 讨论 | 第48-51页 |
5.1 BCAS2 在小鼠卵泡中的定位表达 | 第48-49页 |
5.2 PMSG和FSH对BCAS2 表达的影响 | 第49-50页 |
5.3 RNA干扰敲低BCAS2 对颗粒细胞增殖的影响 | 第50页 |
5.4 RNA干扰敲低BCAS2 对颗粒细胞凋亡的影响 | 第50-51页 |
6 小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-61页 |