| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略词 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-38页 |
| 1 植物应答磷胁迫的研究进展 | 第17-27页 |
| 1.1 低磷胁迫对植物的伤害 | 第17-18页 |
| 1.2 低磷胁迫下植物的适应性 | 第18-27页 |
| 1.2.1 根系形态的变化 | 第18-20页 |
| 1.2.2 土壤难溶性磷的活化利用 | 第20-21页 |
| 1.2.3 磷转运蛋白基因的表达和调控 | 第21-26页 |
| 1.2.4 磷效率相关转录因子的调控 | 第26-27页 |
| 2 ECM菌根应用研究进展 | 第27-32页 |
| 2.1 ECM菌根概述 | 第27-28页 |
| 2.2 ECM菌根的生理效应 | 第28-30页 |
| 2.2.1 改善植物营养 | 第28-29页 |
| 2.2.2 促生激素合成 | 第29页 |
| 2.2.3 提高植物抗病性 | 第29-30页 |
| 2.2.4 提高植物抗逆性 | 第30页 |
| 2.3 ECM菌根的生态效应 | 第30-32页 |
| 2.3.1 ECM与土壤环境的关系 | 第30-31页 |
| 2.3.2 对污染的修复作用 | 第31-32页 |
| 2.3.3 对群落演替和生态系统稳定性的影响 | 第32页 |
| 3 ECM菌根增强植物耐低磷能力的研究进展 | 第32-35页 |
| 3.1 扩大磷吸收面积 | 第33页 |
| 3.2 改变植株根系结构 | 第33-34页 |
| 3.3 影响酶活性及激素平衡 | 第34页 |
| 3.4 改善根际土壤性状 | 第34-35页 |
| 3.5 菌根对磷转运蛋白基因表达的影响 | 第35页 |
| 4 马尾松分子遗传研究进展 | 第35-36页 |
| 5 选题目的、意义和技术路线 | 第36-38页 |
| 第二章 低磷胁迫下ECM真菌对马尾松幼苗生长的影响 | 第38-59页 |
| 1 材料与方法 | 第38-43页 |
| 1.1 试验材料 | 第38-39页 |
| 1.2 主要试剂及仪器设备 | 第39页 |
| 1.3 试验方法 | 第39-43页 |
| 1.3.1 菌剂制备及培育 | 第39页 |
| 1.3.2 种子催芽及接种处理 | 第39-40页 |
| 1.3.3 菌根显微结构观察 | 第40页 |
| 1.3.4 生长指标测定 | 第40-41页 |
| 1.3.5 生理生化指标测定 | 第41-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-56页 |
| 2.1 ECM对根形态的影响 | 第43-45页 |
| 2.1.1 菌根侵染状况 | 第43-44页 |
| 2.1.2 菌根化根系的解剖结构 | 第44-45页 |
| 2.2 ECM对马尾松种子萌发的影响 | 第45-46页 |
| 2.3 ECM对马尾松幼苗生长发育的影响 | 第46-50页 |
| 2.3.1 对幼苗生长量的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.2 对幼苗根系的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.3 生长指标的相关性分析 | 第48-50页 |
| 2.4 ECM对马尾松幼苗生理生化的影响 | 第50-56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 3.1 ECM促进马尾松幼苗的生长发育 | 第56-57页 |
| 3.2 ECM改善马尾松幼苗的生理特性 | 第57-59页 |
| 第三章 马尾松磷转运蛋白基因片段的克隆 | 第59-78页 |
| 1 材料与方法 | 第59-68页 |
| 1.1 试验材料 | 第59-60页 |
| 1.2 主要试剂及仪器设备 | 第60页 |
| 1.3 试验方法 | 第60-68页 |
| 1.3.1 总RNA和cDNA的检测 | 第60-61页 |
| 1.3.2 简并引物设计 | 第61-62页 |
| 1.3.3 cDNA片段的克隆 | 第62-63页 |
| 1.3.4 序列信息学分析 | 第63页 |
| 1.3.5 内参基因 | 第63-64页 |
| 1.3.6 RT-PCR和QRT-PCR检测 | 第64-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-75页 |
| 2.1 基因片段PmPs的克隆 | 第68-69页 |
| 2.2 PmPs的比对分析 | 第69页 |
| 2.3 PmPs的进化关系 | 第69-71页 |
| 2.4 PmPs时空表达特征 | 第71-72页 |
| 2.5 PmPs表达的半定量分析 | 第72-74页 |
| 2.6 PmPs表达的荧光定量分析 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-78页 |
| 3.1 磷转运蛋白Pht1家族基因片段的系统进化关系 | 第75-76页 |
| 3.2 马尾松Pht1基因片段对磷浓度的响应 | 第76-78页 |
| 第四章 PmPTs的全长克隆及菌根化植株的表达分析 | 第78-126页 |
| 1 材料与方法 | 第78-88页 |
| 1.1 试验材料 | 第78页 |
| 1.2 主要试剂及仪器设备 | 第78-79页 |
| 1.3 实验方法 | 第79-88页 |
| 1.3.1 总RNA和SMARTer RACE引物 | 第79-82页 |
| 1.3.2 cDNA第一链的合成 | 第82-83页 |
| 1.3.3 RACE克隆 | 第83-86页 |
| 1.3.4 生物信息学分析 | 第86页 |
| 1.3.5 基因表达检测 | 第86-87页 |
| 1.3.6 生理指标测定 | 第87-88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-123页 |
| 2.1 磷转运蛋白基因的全长克隆 | 第88-115页 |
| 2.1.1 cDNA全长获得 | 第88-90页 |
| 2.1.2 PmPT1基因特征分析 | 第90-96页 |
| 2.1.3 PmPT2基因特征分析 | 第96-101页 |
| 2.1.4 PmPT3基因特征分析 | 第101-107页 |
| 2.1.5 PmPT4基因特征分析 | 第107-112页 |
| 2.1.6 PmPTs氨基酸同源性分析 | 第112-113页 |
| 2.1.7 PmPTs进化分析 | 第113-115页 |
| 2.2 不同磷浓度对PmPTs表达的影响 | 第115-118页 |
| 2.2.1 低磷环境中PmPTs时空表达特征 | 第115页 |
| 2.2.2 PmPTs表达的半定量分析 | 第115-117页 |
| 2.2.3 PmPTs表达的荧光定量分析 | 第117-118页 |
| 2.3 不同磷浓度对植株的影响 | 第118-123页 |
| 2.3.1 对植株磷含量的影响 | 第118-120页 |
| 2.3.2 对根形态的影响 | 第120页 |
| 2.3.3 对菌根化马尾松生长的影响 | 第120-123页 |
| 3 讨论 | 第123-126页 |
| 3.1 马尾松Pht1磷转运蛋白家族特征 | 第123页 |
| 3.2 磷转运蛋白对低磷胁迫的响应 | 第123-124页 |
| 3.3 外生菌根改善了马尾松耐低磷能力 | 第124-126页 |
| 第五章 PmPT1植物表达载体的构建及功能分析 | 第126-152页 |
| 1 材料与方法 | 第126-138页 |
| 1.1 试验材料与主要试剂 | 第126-127页 |
| 1.2 主要培养基配方 | 第127页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第127-128页 |
| 1.4 构建PmPT1超量表达载体 | 第128-132页 |
| 1.5 农杆菌感受态的制备和转化 | 第132-133页 |
| 1.6 转PmPT1超量表达基因烟草的获得 | 第133-137页 |
| 1.7 转基因烟草低磷胁迫生理指标的测定 | 第137-138页 |
| 2 结果与分析 | 第138-149页 |
| 2.1 PmPT1超量表达载体 | 第138-139页 |
| 2.1.1 目的基因的PCR扩增 | 第138页 |
| 2.1.2 重组质粒双酶切检测 | 第138-139页 |
| 2.1.3 农杆菌菌落PCR检测 | 第139页 |
| 2.2 转PmPT1超量表达基因烟草获得 | 第139-141页 |
| 2.2.1 农杆菌介导转化烟草 | 第139-140页 |
| 2.2.2 GUS组织化学染色 | 第140-141页 |
| 2.2.3 转基因PCR检测 | 第141页 |
| 2.3 超量表达PmPT1对烟草内源Pht1家族基因表达的影响 | 第141-143页 |
| 2.4 低磷条件下转PmPT1对烟草生理特征的影响 | 第143-149页 |
| 3 讨论 | 第149-152页 |
| 3.1 超量表达PmPT1促进烟草内源Pht1家族基因表达 | 第149-150页 |
| 3.2 超量表达PmPT1基因烟草增强植株耐低磷能力 | 第150-152页 |
| 第六章 结论、创新与工作展望 | 第152-155页 |
| 1 结论 | 第152-153页 |
| 2 创新点 | 第153-154页 |
| 3 工作展望 | 第154-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
| 参考文献 | 第156-167页 |
| 附录 | 第167-169页 |
