| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-21页 |
| 1.1 人胃癌细胞分泌的Exosomes | 第15-16页 |
| 1.1.1 Exosomes的生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.1.2 Exosomes的分离与纯化 | 第16页 |
| 1.2 胃癌Exosomes与肿瘤微环境 | 第16-19页 |
| 1.2.1 肿瘤微环境的构成 | 第17页 |
| 1.2.2 Exosomes对肿瘤的作用 | 第17-18页 |
| 1.2.3 胃癌与NF-κB信号通路 | 第18-19页 |
| 1.3 巨噬细胞在胃癌发展中的作用 | 第19-21页 |
| 1.3.1 巨噬细胞的特性 | 第19页 |
| 1.3.2 巨噬细胞与肿瘤的关系 | 第19-21页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第21-24页 |
| 2.1 研究目的 | 第21页 |
| 2.2 研究方法 | 第21-22页 |
| 2.3 实验设计方案 | 第22-23页 |
| 2.4 研究意义 | 第23-24页 |
| 第三章 Exosomes的分离与鉴定 | 第24-30页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第24-25页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第24-25页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第25页 |
| 3.1.3 细胞株 | 第25页 |
| 3.2 方法 | 第25-26页 |
| 3.2.1 细胞的培养及条件培养上清的制备 | 第25页 |
| 3.2.2 Exosomes的分离与纯化 | 第25-26页 |
| 3.2.3 透射电镜观察Exosomes的形态 | 第26页 |
| 3.2.4 纳米示踪分析仪（NTA）检测Exosomes粒子直径及分布 | 第26页 |
| 3.2.5 Western blot检测Exosomes表面标记蛋白 | 第26页 |
| 3.3 结果 | 第26-28页 |
| 3.3.1 Exosomes的形态特征 | 第26-27页 |
| 3.3.2 Exosomes数目与粒径分布 | 第27-28页 |
| 3.3.3 Exosomes表面蛋白标记的检测 | 第28页 |
| 3.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第四章 巨噬细胞对Exosomes的内化作用 | 第30-33页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第30页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第30页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第30页 |
| 4.1.3 细胞株 | 第30页 |
| 4.2 方法 | 第30-31页 |
| 4.2.1 高内涵细胞成像分析 | 第30-31页 |
| 4.2.2 流式细胞成像分析 | 第31页 |
| 4.3 结果 | 第31-32页 |
| 4.3.1 巨噬细胞经PMA诱导后形态特征 | 第31页 |
| 4.3.2 Exosomes被单核巨噬细胞吞噬 | 第31-32页 |
| 4.4 讨论 | 第32-33页 |
| 第五章 Exosomes活化的巨噬细胞对胃癌细胞生物学功能的影响 | 第33-40页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第33-34页 |
| 5.1.1 主要材料 | 第33页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 5.1.3 细胞株 | 第34页 |
| 5.2 方法 | 第34-36页 |
| 5.2.1 细胞培养及上清的收集 | 第34页 |
| 5.2.2 细胞划痕试验 | 第34页 |
| 5.2.3 Transwell细胞迁移试验 | 第34-35页 |
| 5.2.4 细胞克隆形成实验 | 第35页 |
| 5.2.5 细胞侵袭实验 | 第35页 |
| 5.2.6 细胞凋亡流式检测 | 第35页 |
| 5.2.7 细胞的处理与统计 | 第35-36页 |
| 5.3 结果 | 第36-38页 |
| 5.3.1 Exosomes活化的巨噬细胞促进胃癌细胞的迁移能力 | 第36-37页 |
| 5.3.2 Exosomes活化的巨噬细胞增强胃癌细胞的克隆形成能力 | 第37页 |
| 5.3.3 Exosomes活化的巨噬细胞促进胃癌细胞的侵袭能力 | 第37-38页 |
| 5.3.4 Exosomes活化的巨噬细胞对胃癌细胞凋亡能力的影响 | 第38页 |
| 5.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第六章 胃癌细胞来源Exosomes活化巨噬细胞机制的研究 | 第40-54页 |
| 6.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
| 6.1.1 主要材料 | 第40-41页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 6.1.3 细胞株 | 第41页 |
| 6.2 方法 | 第41-44页 |
| 6.2.1 细胞的培养与上清的收集 | 第41-42页 |
| 6.2.2 细胞蛋白的提取 | 第42页 |
| 6.2.3 Western blot | 第42页 |
| 6.2.4 总RNA的提取与逆转录 | 第42-43页 |
| 6.2.5 荧光实时定量PCR | 第43页 |
| 6.2.6 ELISA实验 | 第43页 |
| 6.2.7 人外周血单核细胞的提取与培养 | 第43-44页 |
| 6.2.8 细胞划痕实验 | 第44页 |
| 6.2.9 细胞迁移与侵袭实验 | 第44页 |
| 6.2.10 细胞克隆实验 | 第44页 |
| 6.2.11 数据分析 | 第44页 |
| 6.3 结果 | 第44-52页 |
| 6.3.1 胃癌来源Exosomes促使巨噬细胞的NF-κB磷酸化激活 | 第44-45页 |
| 6.3.2 Bay11-7082抑制胃癌Exosomes对巨噬细胞的活化 | 第45-46页 |
| 6.3.3 NF-κB抑制剂处理后的巨噬细胞促迁移能力减弱 | 第46-48页 |
| 6.3.4 NF-κB抑制剂处理后的巨噬细胞促增殖与促侵袭能力减弱 | 第48-49页 |
| 6.3.5 胃癌来源Exosomes活化外周血巨噬细胞的NF-κB通路 | 第49-50页 |
| 6.3.6 Exosomes活化外周血巨噬细胞的NF-κB通路促进胃癌的迁移 | 第50-51页 |
| 6.3.7 Exosomes活化外周血巨噬细胞的NF-κB通路促进胃癌的增殖与侵袭 | 第51-52页 |
| 6.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第七章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 7.1 结论 | 第54页 |
| 7.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及参加会议 | 第63页 |
