| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 重金属的危害与处理 | 第11-12页 |
| 1.1.1 重金属的危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 重金属废水的处理 | 第12页 |
| 1.2 生物吸附法吸附重金属的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 细菌 | 第13页 |
| 1.2.2 藻类 | 第13页 |
| 1.2.3 真菌 | 第13页 |
| 1.2.4 植物及其废弃物 | 第13-14页 |
| 1.2.5 酵母 | 第14页 |
| 1.3 细胞表面展示技术及应用 | 第14-18页 |
| 1.3.1 锚定蛋白 | 第15-16页 |
| 1.3.2 宿主 | 第16页 |
| 1.3.3 目标蛋白 | 第16-17页 |
| 1.3.4 细胞表面展示技术的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 金属硫蛋白在重金属吸附中应用的研究进展 | 第18-24页 |
| 1.4.1 金属硫蛋白的结构基础 | 第18页 |
| 1.4.2 金属硫蛋白在重金属吸附中的研究进展 | 第18-24页 |
| 1.5 本课题的研究内容及研究意义 | 第24-25页 |
| 2 金属硫蛋白细胞表面展示菌株构建 | 第25-47页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料 | 第25-28页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.2.2 试剂 | 第25-27页 |
| 2.2.3 培养基 | 第27页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.3 方法 | 第28-38页 |
| 2.3.1 E.coli质粒提取方法 | 第28页 |
| 2.3.2 E.coli感受态细胞制备与转化 | 第28-29页 |
| 2.3.3 酵母基因组的提取 | 第29页 |
| 2.3.4 金属硫蛋白基因整合表达载体的构建 | 第29-34页 |
| 2.3.5 空载对照载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.3.6 酵母的转化 | 第36-37页 |
| 2.3.7 转化子发酵稳定性和乙醇耐受性验证 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-45页 |
| 2.4.1 金属硫蛋白细胞表面展示整合载体的构建 | 第38-41页 |
| 2.4.2 空载对照载体的构建 | 第41-42页 |
| 2.4.3 S.cerevisiae 4126的转化及重组菌的鉴定 | 第42-44页 |
| 2.4.5 阳性转化子的遗传稳定性验证 | 第44页 |
| 2.4.6 转化子超高糖发酵稳定性验证 | 第44-45页 |
| 2.5 小结 | 第45-47页 |
| 3 S.cerevisiae HACg对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)的吸附 | 第47-66页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第47-50页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.2.2 培养基 | 第48页 |
| 3.2.3 常用实验设备 | 第48页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第48-50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-52页 |
| 3.3.1 分析方法 | 第50页 |
| 3.3.2 S.cerevisiae HACg对重金属的耐受性研究 | 第50-51页 |
| 3.3.3 S.cerevisiae HACg对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)的吸附能力 | 第51页 |
| 3.3.4 细胞表面金属离子的解析 | 第51-52页 |
| 3.3.5 酵母菌对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附后微生物扫描电镜 | 第52页 |
| 3.3.6 酵母菌对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附后微生物红外光谱实验 | 第52页 |
| 3.3.7 酵母菌对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附后微生物电化学实验 | 第52页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第52-65页 |
| 3.4.1 S.cerevisiae HACg对重金属的耐受性研究 | 第52-55页 |
| 3.4.2 基因工程菌对重金属的吸附性能研究 | 第55-57页 |
| 3.4.3 吸附平衡后细胞表面金属解析量的确定 | 第57-58页 |
| 3.4.4 酵母菌对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附后微生物扫描电镜分析 | 第58-60页 |
| 3.4.5 酵母菌对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附后微生物红外光谱分析 | 第60-63页 |
| 3.4.6 酵母菌对Cd~(2+)、Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附后微生物电化学实验 | 第63-65页 |
| 3.5 小结 | 第65-66页 |
| 4 S.cerevisiae HACg对Cd~(2+)、Cu~(2+)和总Cr的吸附等温模型分析 | 第66-79页 |
| 4.1 引言 | 第66页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第66页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第66页 |
| 4.2.2 培养基 | 第66页 |
| 4.2.3 常用实验设备 | 第66页 |
| 4.2.4 主要试剂 | 第66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 4.3.1 分析方法 | 第66页 |
| 4.3.2 S.cescerevisiae HACg吸附实验 | 第66-67页 |
| 4.3.3 吸附等温模型 | 第67-68页 |
| 4.4 结果与分析 | 第68-78页 |
| 4.4.1 S.cescerevisiae HACg对Cd~(2+)的吸附等温模型分析 | 第68-71页 |
| 4.4.2 S.cescerevisiae HACg对Cu~(2+)的吸附等温模型分析 | 第71-75页 |
| 4.4.3 S.cescerevisiae HACg对总Cr的吸附等温模型分析 | 第75-78页 |
| 4.5 小结 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 附录A cup1基因序列 | 第89-90页 |
| 附录B P_(PGK1)基因序列 | 第90-91页 |
| 附录C AGA2-CUP1基因序列 | 第91-92页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 大连理工大学学位论文版权使用授权书 | 第94页 |
