| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 实验材料 | 第12-15页 |
| 1.1 实验药品 | 第12页 |
| 1.2 实验细胞 | 第12页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第12页 |
| 1.4 主要实验耗材 | 第12-13页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第13页 |
| 1.6 Affymetrix PrimeView? Human Gene Expression Array | 第13页 |
| 1.7 常用试剂配制 | 第13-15页 |
| 1.7.1 完全培养基 10 %（V/V） | 第13-14页 |
| 1.7.2 盐酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS） | 第14页 |
| 1.7.3 细胞冻存液 | 第14页 |
| 1.7.4 胰酶消化液 | 第14页 |
| 1.7.5 MTT细胞工作液 | 第14页 |
| 1.7.6 0.1 % DEPC水 | 第14-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-24页 |
| 2.1 细胞培养和处理 | 第15-16页 |
| 2.1.1 细胞复苏 | 第15页 |
| 2.1.2 细胞传代 | 第15页 |
| 2.1.3 细胞冻存 | 第15-16页 |
| 2.1.4 细胞计数 | 第16页 |
| 2.2 MTT法检测细胞增殖 | 第16页 |
| 2.3 总RNA提取 | 第16-18页 |
| 2.4 RNA质量鉴定 | 第18页 |
| 2.4.1 RNA浓度及纯度测定 | 第18页 |
| 2.4.2 RNA变性琼脂糖凝胶电泳 | 第18页 |
| 2.5 逆转录合成cDNA | 第18-19页 |
| 2.6 基因芯片检测和数据分析 | 第19-21页 |
| 2.6.1 基因芯片实验过程 | 第19-20页 |
| 2.6.2 基因芯片数据分析 | 第20-21页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR | 第21-23页 |
| 2.7.1 合成引物 | 第21-22页 |
| 2.7.2 实时荧光定量PCR体系 | 第22页 |
| 2.7.3 实时荧光定量PCR数据分析 | 第22-23页 |
| 2.8 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第23页 |
| 2.9 TBT诱导肝细胞凋亡的毒性机制图绘制 | 第23页 |
| 2.10 统计分析 | 第23-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-42页 |
| 3.1 TBT对HL7702细胞增殖的影响 | 第24页 |
| 3.2 TBT诱导细胞形态发生改变 | 第24-25页 |
| 3.3 RNA质量鉴定结果 | 第25-27页 |
| 3.4 芯片实验质量控制 | 第27-28页 |
| 3.4.1 芯片归一化箱图 | 第27页 |
| 3.4.2 芯片聚类分析 | 第27-28页 |
| 3.5 芯片结果 | 第28-38页 |
| 3.5.1 芯片结果总体情况概述 | 第28-30页 |
| 3.5.2 HL7702细胞暴露于低浓度TBT后的芯片结果 | 第30-32页 |
| 3.5.3 HL7702细胞暴露于中浓度TBT后的芯片结果 | 第32-34页 |
| 3.5.4 HL7702细胞暴露于高浓度TBT后的芯片结果 | 第34-37页 |
| 3.5.5 芯片结果总结 | 第37-38页 |
| 3.6 实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
| 3.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-48页 |
| 4.1 高通量技术手段进行TBT毒性机制研究的必要性 | 第42页 |
| 4.2 热休克蛋白对TBT诱导的细胞凋亡作用 | 第42-44页 |
| 4.2.1 热休克蛋白参与了TBT诱导的线粒体凋亡途径 | 第43页 |
| 4.2.2 热休克蛋白参与了TBT诱导的死亡受体凋亡途径 | 第43-44页 |
| 4.2.3 热休克蛋白参与了TBT诱导的内质网凋亡途径 | 第44页 |
| 4.3 凋亡抑制蛋白家族对TBT诱导的细胞凋亡作用 | 第44-45页 |
| 4.4 BAG家族对TBT诱导的细胞凋亡作用 | 第45页 |
| 4.5 MAPK信号通路对TBT诱导的细胞凋亡作用 | 第45-46页 |
| 4.6 其他激酶对TBT诱导的细胞凋亡作用 | 第46页 |
| 4.7 TBT诱导肝毒性的其他重要信号通路 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录A 综述 | 第54-65页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 在学研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
