| 英文缩写词对照表 | 第9-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 油酸诱导的HepG2细胞脂肪变性模型的建立 | 第16-21页 |
| 1. 材料与方法 | 第16-17页 |
| 1.1 实验材料 | 第16页 |
| 1.2 试剂 | 第16页 |
| 1.3 仪器 | 第16-17页 |
| 1.4 实验方法 | 第17页 |
| 1.4.1 HepG2细胞培养 | 第17页 |
| 1.4.2 HepG2细胞脂肪变性鉴定 | 第17页 |
| 1.4.3 HepG2细胞活力鉴定 | 第17页 |
| 2. 实验结果与分析 | 第17-20页 |
| 2.1 不同浓度油酸引起的HepG2细胞内脂滴的积聚 | 第18页 |
| 2.2 不同浓度油酸处理后HepG2细胞不同时间后,细胞活力鉴定 | 第18-20页 |
| 3. 讨论 | 第20-21页 |
| 第二章 脂肪变性前后HepG2细胞蛋白样品制备以及质谱鉴定 | 第21-42页 |
| 1. HepG2细胞脂肪变性前后转录因子的富集及预分离 | 第21-29页 |
| 1.1. 实验材料 | 第21-24页 |
| 1.2 提取核蛋白试剂及配方 | 第24页 |
| 1.3 转录因子富集试剂及配方 | 第24-25页 |
| 1.4 仪器 | 第25-26页 |
| 1.5 实验方法 | 第26-29页 |
| 1.5.1 高盐低盐法提取细胞核蛋白 | 第26页 |
| 1.5.2 Thermo Kit法提取细胞核蛋白 | 第26-27页 |
| 1.5.3 Biotin标记的TFRE扩增和获得 | 第27-28页 |
| 1.5.4 转录因子富集及预分离 | 第28-29页 |
| 2. HepG2细胞脂肪变性前后全蛋白、脂滴蛋白的提取及预分离 | 第29-33页 |
| 2.1. 实验材料 | 第29页 |
| 2.2 试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.1 全蛋白提取试剂及配方 | 第29页 |
| 2.2.2 脂滴蛋白提取试剂及配方 | 第29-30页 |
| 2.2.3 还原烷基化及溶液内酶解所用试剂及配方 | 第30页 |
| 2.2.4 sRP所用试剂及配方 | 第30页 |
| 2.3 仪器 | 第30-31页 |
| 2.4 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.4.1 HepG2细胞全蛋白提取 | 第31页 |
| 2.4.2 HepG2细胞脂滴蛋白提取 | 第31-32页 |
| 2.4.3 还原烷基化及溶液内酶解 | 第32页 |
| 2.4.4 sRP对油酸处理组和对照组的细胞全蛋白、脂滴蛋白进行预分离 | 第32-33页 |
| 3. 蛋白样品的质谱鉴定 | 第33-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.2 试剂及配方 | 第33页 |
| 3.3 仪器 | 第33页 |
| 3.4 实验方法 | 第33-34页 |
| 4. 实验结果与分析 | 第34-40页 |
| 4.1 Biotin-TFRE的质控 | 第35页 |
| 4.2 两种不同方法提取核蛋白的比较 | 第35页 |
| 4.3 转录因子富集及SDS-PAGE预分离 | 第35-36页 |
| 4.4 TFRE对转录因子富集作用的质谱鉴定结果 | 第36-39页 |
| 4.4.1 TFRE对转录因子富集作用 | 第36-38页 |
| 4.4.2 转录因子DNA结合活性差异分析 | 第38-39页 |
| 4.5 全蛋白、脂滴蛋白获取与预分离结果 | 第39页 |
| 4.6 HepG2细胞全蛋白质谱鉴定结果 | 第39-40页 |
| 4.7 HepG2细胞脂相关蛋白质谱鉴定结果 | 第40页 |
| 5. 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第42-50页 |
| 1. 材料与方法 | 第42-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第42页 |
| 1.2 软件 | 第42页 |
| 1.3 实验方法 | 第42-43页 |
| 1.3.1 聚类分析 | 第42页 |
| 1.3.2 利用Cytoscape_3.2.0进行基因的GO分类分析以及蛋白的Reactome分析 | 第42页 |
| 1.3.3 利用IPA对分析变化的蛋白所反应的油酸对HepG2的毒性作用以及变化的生物功能 | 第42-43页 |
| 2. 实验结果与分析 | 第43-48页 |
| 2.1 生物信息学分析DNA结合活性变化的转录因子的作用 | 第43-46页 |
| 2.2 生物信息学分析油酸处理后HepG2细胞内表达量变化的蛋白的作用 | 第46-48页 |
| 3. 讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录1 | 第56-57页 |
| 附录2 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 相关文献综述 肝脏内脂肪酸对基因表达调控研究现状 | 第60-72页 |
| 中文摘要 | 第60页 |
| Abstract | 第60-61页 |
| 1. 脂肪酸的来源和对基因表达的控制 | 第61-62页 |
| 1.1 外源摄入的脂肪酸及其对基因表达的调控 | 第61-62页 |
| 1.2 内源性脂肪酸及其对基因表达的调控 | 第62页 |
| 2. 脂肪酸对肝脏转录因子的调控 | 第62-64页 |
| 2.1 脂肪酸对核受体的调控 | 第62-63页 |
| 2.2 脂肪酸对其他转录因子的调控 | 第63-64页 |
| 3. 源自膜结构的脂肪酸对基因表达的调控 | 第64-65页 |
| 3.1 细胞的膜结构 | 第65页 |
| 3.2 G蛋白偶联的脂肪酸受体 | 第65页 |
| 3.3 异前列腺素与氧化应激 | 第65页 |
| 4. 脂肪酸控制的基因表达与疾病的关系 | 第65-66页 |
| 5. 总结与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
