| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 研究现状、成果 | 第14-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-18页 |
| 一、mTOR通路对PGAM1表达的调控与调控机制 | 第18-43页 |
| 1.1 对象与方法 | 第18-34页 |
| 1.1.1 主要仪器及设备 | 第18页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第18-20页 |
| 1.1.3 病例来源 | 第20页 |
| 1.1.4 细胞系构建与培养 | 第20-27页 |
| 1.1.5 蛋白提取 | 第27-28页 |
| 1.1.6 Western Blot | 第28-31页 |
| 1.1.7 PGAM1酶活性检测 | 第31页 |
| 1.1.8 染色质免疫共沉淀 | 第31-33页 |
| 1.1.9 统计学处理 | 第33-34页 |
| 1.2 结果 | 第34-38页 |
| 1.2.1 PGAM1蛋白表达和酶活性在mTOR通路活化的MEF中上调 | 第34-35页 |
| 1.2.2 PGAM1蛋白表达和酶活性在ELT3细胞中上调 | 第35-36页 |
| 1.2.3 Tsc2del3/+小鼠肾脏肿瘤与人类肺癌组织中PGAM1蛋白表达上调 | 第36-37页 |
| 1.2.4 HIF1α 敲低的Tsc2-/-/Pten-/- MEF中PGAM1表达下调 | 第37页 |
| 1.2.5 ChIP实验证明HIF1α 通过与启动子区的结合直接调节PGAM1表达 | 第37-38页 |
| 1.3 讨论 | 第38-42页 |
| 1.3.1 mTOR通路 | 第38-40页 |
| 1.3.2 mTOR通路与肿瘤代谢 | 第40-41页 |
| 1.3.3 HIF1α 调节糖酵解相关酶表达 | 第41-42页 |
| 1.4 小结 | 第42-43页 |
| 二、PGAM1对mTOR活化细胞Warburg效应、增殖和成瘤能力的影响 | 第43-52页 |
| 2.1 对象与方法 | 第43-45页 |
| 2.1.1 主要仪器及设备 | 第43页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 2.1.3 细胞系构建与细胞培养 | 第43页 |
| 2.1.4 细胞葡萄糖消耗与乳酸生成检测 | 第43-44页 |
| 2.1.5 MTT检测细胞增殖 | 第44页 |
| 2.1.6 平板克隆形成实验 | 第44-45页 |
| 2.1.7 动物试验 | 第45页 |
| 2.1.8 统计学处理 | 第45页 |
| 2.2 结果 | 第45-48页 |
| 2.2.1 敲低PGAM1下调mTOR活化MEF中的Warburg效应 | 第45-46页 |
| 2.2.2 敲低PGAM1下调mTOR活化MEF的体外增殖与克隆形成 | 第46-47页 |
| 2.2.3 敲低PGAM1下调mTOR活化MEF裸鼠体内成瘤能力 | 第47-48页 |
| 2.3 讨论 | 第48-51页 |
| 2.3.1 PGAM1的调节 | 第48页 |
| 2.3.2 PGAM1在细胞糖代谢中的重要作用 | 第48-50页 |
| 2.3.3 PGAM1抑制剂的应用 | 第50-51页 |
| 2.4 小结 | 第51-52页 |
| 三、非小细胞肺癌与结直肠癌中PGAM1和p S6表达的相关性及与预后的关系 | 第52-67页 |
| 3.1 对象与方法 | 第52-56页 |
| 3.1.1 主要仪器及设备 | 第52页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 3.1.3 病例来源 | 第52-53页 |
| 3.1.4 临床病理分期 | 第53页 |
| 3.1.5 RNA提取 | 第53页 |
| 3.1.6 逆转录反应 | 第53-54页 |
| 3.1.7 realtime-PCR测定PGAM表达 | 第54页 |
| 3.1.8 石蜡切片免疫组化染色实验操作流程 | 第54-55页 |
| 3.1.9 结果判定 | 第55-56页 |
| 3.1.10 统计学处理 | 第56页 |
| 3.2 结果 | 第56-62页 |
| 3.2.1 NSCLC肿瘤组织中PGAM1 mRNA表达升高 | 第56页 |
| 3.2.2 NSCLC肿瘤组织中PGAM1与pS6表达相关 | 第56-60页 |
| 3.2.3 结直肠癌组织中PGAM1与pS6表达相关 | 第60-62页 |
| 3.3 讨论 | 第62-66页 |
| 3.3.1 糖酵解酶与肿瘤患者预后 | 第62-65页 |
| 3.3.2 PGAM1与肿瘤患者预后 | 第65页 |
| 3.3.3 pS6与PGAM1 | 第65-66页 |
| 3.4 小结 | 第66-67页 |
| 全文结论 | 第67-68页 |
| 论文创新点 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-86页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87-94页 |
| 综述 mTOR通路与PGAM1在肿瘤糖酵解中的研究进展 | 第94-117页 |
| 综述参考文献 | 第105-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
