| 摘要 | 第2-5页 |
| Summary | 第5-8页 |
| 缩略语表 | 第9-14页 |
| 第一章 传染性造血器官坏死症研究进展 | 第14-24页 |
| 1 传染性造血器官坏死症（IHN） | 第14-19页 |
| 1.1 传染性造血器官坏死症病毒概况 | 第14-16页 |
| 1.1.1 IHNV分类、命名 | 第14-15页 |
| 1.1.2 IHNV形态结构 | 第15页 |
| 1.1.3 IHNV宿主系统 | 第15页 |
| 1.1.4 IHNV基因组结构 | 第15-16页 |
| 1.2 传染性造血器官坏死症流行病学特征 | 第16-18页 |
| 1.3 传染性造血器官坏死症临床症状和病理变化 | 第18页 |
| 1.4 IHN疫苗研究 | 第18-19页 |
| 2 腺病毒表达系统概述 | 第19-22页 |
| 2.1 腺病毒概况 | 第19-20页 |
| 2.2 腺病毒载体的发展 | 第20-21页 |
| 2.2.1 第一代腺病毒载体 | 第20页 |
| 2.2.2 第二代腺病毒载体 | 第20页 |
| 2.2.3 第三代腺病毒载体 | 第20-21页 |
| 2.3 重组腺病毒载体的构建方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 双质粒共转法 | 第21页 |
| 2.3.2 Ad-easy重组系统 | 第21页 |
| 2.3.3 AdMax系统 | 第21-22页 |
| 2.4 重组腺病毒疫苗的研究 | 第22页 |
| 3 传染性造血器官坏死症重组腺病毒疫苗研究展望 | 第22-24页 |
| 第二章 传染性造血器官坏死症病毒的分离与鉴定 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第24-30页 |
| 1.1 病毒与细胞系 | 第24页 |
| 1.2 质粒与感受态细胞 | 第24页 |
| 1.3 试剂 | 第24-25页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第25页 |
| 1.5 引物 | 第25页 |
| 1.6 IHNV的分离 | 第25-30页 |
| 1.6.1 组织病料的处理 | 第25页 |
| 1.6.2 病毒在细胞上增值 | 第25页 |
| 1.6.3 IHNV总RNA的提取 | 第25-27页 |
| 1.6.4 PCR产物的纯化 | 第27-28页 |
| 1.6.5 N基因与克隆载体的连接 | 第28页 |
| 1.6.6 大肠杆菌的遗传转化 | 第28-29页 |
| 1.6.7 质粒DNA的制备 | 第29-30页 |
| 2 结果 | 第30-33页 |
| 2.1 IHNV在EPC细胞增殖 | 第30页 |
| 2.2 IHNV N基因的扩增 | 第30-31页 |
| 2.3 IHNV N基因的同源性及进化树分析 | 第31-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 传染性造血器官坏死症重组腺病毒载体的构建 | 第34-46页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| 1.1 技术路线图 | 第34页 |
| 1.2 病毒与细胞系 | 第34-36页 |
| 1.3 质粒与感受态细胞 | 第36页 |
| 1.4 试剂 | 第36页 |
| 1.5 IHNV G基因的扩增与RT-PCR | 第36-37页 |
| 1.6 G基因的快速克隆和腺病毒载体的构建 | 第37页 |
| 1.7 pAd track CMV载体与pAd easy-1骨架载体的同源重组 | 第37-38页 |
| 1.8 重组质粒转染HEK-293 细胞 | 第38页 |
| 1.9 重组腺病毒G蛋白表达的Western-blot检测 | 第38-39页 |
| 1.10 重组腺病毒半数组织细胞感染量（TCID_50）的测定 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-42页 |
| 2.1 PCR产物电泳分析 | 第39-40页 |
| 2.2 快速克隆重组腺病毒载体的鉴定 | 第40页 |
| 2.3 重组腺病毒质粒的鉴定 | 第40-42页 |
| 2.4 重组腺病毒G蛋白表达的Western-blot检测结果 | 第42页 |
| 2.5 重组腺病毒TCID50的测定 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-46页 |
| 第四章 传染性造血器官坏死症活载体疫苗生物学评价 | 第46-58页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| 1.1 病毒与实验动物 | 第46-47页 |
| 1.2 主要试剂 | 第47页 |
| 1.3 主要仪器及设备 | 第47页 |
| 1.4 活载体疫苗的试制 | 第47页 |
| 1.5 活载体疫苗的安全性试验 | 第47页 |
| 1.6 最佳使用剂量的确定 | 第47页 |
| 1.7 活载体疫苗的免疫效力试验 | 第47-50页 |
| 1.7.1 虹鳟鱼免疫 | 第47-48页 |
| 1.7.2 采血 | 第48页 |
| 1.7.3 免疫因子测定 | 第48-49页 |
| 1.7.4 抗体水平测定 | 第49-50页 |
| 1.7.5 动物攻毒试验 | 第50页 |
| 1.8 活载体疫苗的免疫持续期试验 | 第50-51页 |
| 1.9 活载体疫苗的保存期试验 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-56页 |
| 2.1 活载体疫苗安全性试验结果 | 第51页 |
| 2.2 最佳使用剂量的确定 | 第51-52页 |
| 2.3 虹鳟鱼免疫后体内IHNV-G，TLRs，IFN-1和IFN刺激的基因表达 | 第52页 |
| 2.4 虹鳟鱼免疫后体内CD4，CD8，IgM和IgT的基因表达 | 第52-54页 |
| 2.5 虹鳟鱼免疫后体内抗体水平的测定 | 第54页 |
| 2.6 动物攻毒试验 | 第54-55页 |
| 2.7 活载体疫苗的免疫持续期试验 | 第55-56页 |
| 2.8 活载体疫苗的保存期试验 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-75页 |
