中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-29页 |
1.1 双向转录(“头对头”)基因对研究概述 | 第17-22页 |
1.1.1 染色体上相邻基因的分布情况 | 第17-19页 |
1.1.2 双向转录(“头对头”)基因对存在共表达现象 | 第19-21页 |
1.1.3 双向转录(“头对头”)基因对功能相关性研究 | 第21-22页 |
1.2 真核生物双向启动子研究概述 | 第22-27页 |
1.2.1 真核生物中双向启动子的筛选及生物信息学分析 | 第22-23页 |
1.2.2 真核生物双向启动子序列结构分析 | 第23-25页 |
1.2.3 真核生物双向启动子结构与基因表达稳定性的关系研究 | 第25-26页 |
1.2.4 真核生物双向启动子结构与基因共表达的关系 | 第26-27页 |
1.3 立题依据与主要研究内容 | 第27-29页 |
第二章 双向基因对AtUCH4/AtPTP1共转录调控研究 | 第29-69页 |
2.1 引言 | 第29-31页 |
2.2 实验材料 | 第31-32页 |
2.2.1 植物材料 | 第31页 |
2.2.2 主要试剂 | 第31页 |
2.2.3 主要载体和菌株 | 第31-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-43页 |
2.3.1 植物材料种植 | 第32页 |
2.3.2 质粒小量提取(碱法) | 第32-33页 |
2.3.3 大肠杆菌(DH5α)感受态细胞的制备和转化 | 第33-34页 |
2.3.4 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第34-35页 |
2.3.5 植物基因组DNA提取 | 第35-36页 |
2.3.6 AtUCH4/AtPTP1双向启动子序列分析 | 第36-37页 |
2.3.7 AtUCH4启动子系列表达载体构建 | 第37-38页 |
2.3.8 AtPTP1启动子系列表达载体构建 | 第38-39页 |
2.3.9 转基因拟南芥筛选 | 第39-40页 |
2.3.10 GUS染色分析 | 第40-41页 |
2.3.11 GUS酶活测定 | 第41-42页 |
2.3.12 启动子瞬时表达活性检测 | 第42-43页 |
2.3.13 冷胁迫处理条件下启动子表达模式分析 | 第43页 |
2.4 结果与分析 | 第43-61页 |
2.4.1 双向基因对AtUCH4/AtPTP1的间隔序列具有双向不对称转录活性 | 第43-47页 |
2.4.2 AtUCH4/AtPTP1双向启动子组织特异性元件分析 | 第47-48页 |
2.4.3 AtPTP1启动子组织特异性表达活性分析 | 第48-52页 |
2.4.4 AtUCH4启动子组织特异性表达活性分析 | 第52-55页 |
2.4.5 AtUCH4/AtPTP1双向启动子非生物胁迫响应元件分析 | 第55-57页 |
2.4.6 AtUCH4启动子冷胁迫响应表达活性分析 | 第57-59页 |
2.4.7 AtPTP1启动子冷胁迫响应表达活性分析 | 第59-61页 |
2.5 讨论 | 第61-69页 |
2.5.1 AtUCH4/AtPTP1双向启动子指导外源基因共表达于相同的组织部位 | 第61-62页 |
2.5.2 AtUCH4/AtPTP1双向启动子由不同的正、负调控区组成 | 第62-65页 |
2.5.3 AtUCH4/AtPTP1双向启动子在低温胁迫时调控外源基因表达负相关 | 第65页 |
2.5.4 AtUCH4/AtPTP1双向启动子中存在响应低温胁迫的方向敏感性元件 | 第65-69页 |
第三章 双向转录基因对AtUCH4/AtPTP1参与盐胁迫响应的作用研究 | 第69-98页 |
3.1 引言 | 第69-73页 |
3.1.1 蛋白酪氨酸磷酸酶基因研究概述 | 第69-71页 |
3.1.2 泛素C-端水解酶家族基因研究概述 | 第71-73页 |
3.2 实验材料 | 第73-74页 |
3.2.1 植物材料 | 第73页 |
3.2.2 主要试剂 | 第73页 |
3.2.3 载体和菌株 | 第73-74页 |
3.3 实验方法 | 第74-79页 |
3.3.1 植物材料种植 | 第74页 |
3.3.2 常用分子生物学方法 | 第74页 |
3.3.3 植物总RNA提取和反转录 | 第74-75页 |
3.3.4 AtUCH4和AtPTP1基因表达模式分析 | 第75-76页 |
3.3.5 uch4和ptp1 T-DNA插入突变体鉴定 | 第76-77页 |
3.3.6 uch4和ptp1突变体的功能回复株系鉴定及获得 | 第77-79页 |
3.3.7 生理性状实验 | 第79页 |
3.4 结果与分析 | 第79-94页 |
3.4.1 双向基因对AtUCH4/AtPTP1组织特异性表达模式分析 | 第79-80页 |
3.4.2 AtUCH4/AtPTP1双向启动子盐胁迫响应表达模式分析 | 第80-81页 |
3.4.3 盐胁迫下AtUCH4/AtPTP1双向基因对表达正相关 | 第81-82页 |
3.4.4 uch4和ptp1功能缺失突变体的鉴定 | 第82-84页 |
3.4.5 uch4和ptp1突变体对NaCl胁迫超敏感 | 第84-87页 |
3.4.6 uch4和ptp1功能回复株系的鉴定 | 第87-88页 |
3.4.7 AtUCH4基因的表达可以恢复uch4突变体的种子萌发表型 | 第88-91页 |
3.4.8 AtPTP1基因的表达可以恢复ptp1突变体的种子萌发表型 | 第91-94页 |
3.5 讨论 | 第94-98页 |
3.5.1 AtUCH4/AtPTP1双向基因对共表达于相同的组织部位 | 第94-97页 |
3.5.2 AtUCH4/AtPTP1双向基因对在盐胁迫条件下表达正相关 | 第97页 |
3.5.3 AtUCH4/AtPTP1双向基因对参与盐胁迫响应 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-111页 |
在学期间发表的学术论文和承担的课题 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |