摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
英文缩略语 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-48页 |
1 昆虫神经细胞的功能 | 第14-23页 |
1.1 昆虫神经细胞的类型和形态 | 第15-17页 |
1.2 昆虫神经细胞上的离子通道及其药理学特性 | 第17-20页 |
1.3 神经元的体外培养 | 第20-23页 |
2 DUM神经元 | 第23-31页 |
2.1 DUM神经元的分类和功能 | 第25-28页 |
2.2 DUM神经元离子通道的多样性 | 第28-29页 |
2.3 DUM神经元的应用 | 第29-31页 |
3 nAChRs互作蛋白 | 第31-46页 |
3.1 nAChRs转录和翻译的调控蛋白 | 第32-33页 |
3.2 nAChRs折叠和组装的调控蛋白 | 第33-37页 |
3.3 nAChRs运输和聚集的调控蛋白 | 第37-40页 |
3.4 nAChRs功能调节蛋白 | 第40-43页 |
3.5 nAChRs磷酸化 | 第43-46页 |
4 研究目的与意义 | 第46-48页 |
第二章 东亚飞蝗神经细胞转录组 | 第48-74页 |
1 材料与方法 | 第50-60页 |
1.1 供试虫源 | 第50页 |
1.2 主要试剂 | 第50页 |
1.3 昆虫神经细胞解离 | 第50-51页 |
1.4 神经细胞密度梯度离心 | 第51页 |
1.5 神经细胞RNA提取 | 第51-52页 |
1.6 神经细胞转录组测序及结果分析 | 第52页 |
1.7 东亚飞蝗不同组织样品的准备及RNA提取 | 第52-53页 |
1.8 cDNA合成 | 第53-54页 |
1.9 序列验证 | 第54-58页 |
1.10 实时荧光定量PCR检测 | 第58-60页 |
2 结果与分析 | 第60-71页 |
2.1 东亚飞蝗与美洲大蠊腹神经索及DUM神经元比对 | 第60-62页 |
2.2 东亚飞蝗神经细胞分离纯化 | 第62-63页 |
2.3 东亚飞蝗神经细胞转录组结果分析 | 第63-66页 |
2.4 东亚飞蝗nAChRs互作蛋白筛选 | 第66-69页 |
2.5 Lynx、ubiquilin-1、CRELD2和PICK1组织表达谱分析 | 第69-71页 |
3 讨论 | 第71-74页 |
第三章 东亚飞蝗Lynx蛋白对烟碱型乙酰胆碱受体调节作用的选择性 | 第74-92页 |
1 材料与方法 | 第75-81页 |
1.1 供试虫源 | 第75页 |
1.2 主要试剂 | 第75页 |
1.3 lynx基因全长的克隆 | 第75-76页 |
1.4 外源表达载体构建 | 第76-77页 |
1.5 异源表达及电生理实验 | 第77-80页 |
1.6 放射性配基结合实验 | 第80-81页 |
1.7 曲线拟合 | 第81页 |
1.8 统计分析 | 第81页 |
2 结果与分析 | 第81-88页 |
2.1 重组型nAChRs Locα1/rβ2和Locα2/rβ2的表达 | 第81-83页 |
2.2 Lynx对nAChRs电流值的影响 | 第83-87页 |
2.3 Lynx对nAChRs配基结合量的影响 | 第87-88页 |
3 讨论 | 第88-92页 |
第四章 东亚飞蝗烟碱型乙酰胆碱受体调控蛋白鉴定与功能研究 | 第92-112页 |
1 材料与方法 | 第93-98页 |
1.1 供试虫源 | 第93-94页 |
1.2 主要试剂 | 第94页 |
1.3 siRNA设计与合成 | 第94页 |
1.4 DUM神经元解离及RNAi | 第94-96页 |
1.5 DUM神经元RNA提取 | 第96页 |
1.6 荧光定量PCR cDNA合成 | 第96页 |
1.7 实时荧光定量PCR检测 | 第96-97页 |
1.8 RNAi后DUM神经元对吡虫啉和乙酰胆碱的响应 | 第97-98页 |
1.9 统计分析 | 第98页 |
2 结果与分析 | 第98-109页 |
2.1 转染效率检测 | 第98-100页 |
2.2 靶标基因干扰效率 | 第100-101页 |
2.3 nAChRs调控蛋白对DUM神经元膜电位的影响 | 第101-104页 |
2.4 nAChRs调控蛋白对受体反应电流的影响 | 第104-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
全文总结 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-134页 |
附录Ⅰ 东亚飞蝗转录组注释信息分类图及配体门控离子通道聚类分析 | 第134-139页 |
附录Ⅱ 攻读学位期间发表的论文及获得奖励 | 第139-140页 |
致谢 | 第140-141页 |