| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 雷帕霉素(rapamycin)和mTOR信号通路 | 第12-14页 |
| 1.1.1 吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)及其代谢产物雷帕霉素 | 第12-13页 |
| 1.1.2 mTOR信号通路 | 第13-14页 |
| 1.2 奶牛乳腺上皮细胞及其原代培养 | 第14-15页 |
| 1.2.1 奶牛乳腺上皮细胞的分离 | 第14-15页 |
| 1.2.2 原代培养奶牛乳腺上皮细胞的意义 | 第15页 |
| 1.3 mTOR信号通路在乳脂合成中的调控作用 | 第15-19页 |
| 1.3.1 对脂质合成基因表达相关转录因子SREBPs和PPARs的调控作用 | 第16页 |
| 1.3.2 在脂肪酸从头合成中的作用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 在长链脂肪酸摄取和转运中的作用 | 第17-18页 |
| 1.3.4 在脂肪酸酯化和甘油三酯合成中的作用 | 第18-19页 |
| 1.4 无乳链球菌以及奶牛乳腺炎 | 第19-22页 |
| 第二章 mTOR信号通路在乳脂合成中的调控作用 | 第22-47页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 细胞系以及质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 乳汁分离法分离奶牛乳腺上皮细胞 | 第23-24页 |
| 2.2.2 rapamycin对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第24页 |
| 2.2.3 rapamycin处理奶牛乳腺上皮细胞后对mTOR信号通路的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.4 rapamycin处理奶牛乳腺上皮细胞后对超长链脂肪酸延伸酶以及甘油三脂合成关键酶的影响 | 第25页 |
| 2.2.5 rapamycin处理奶牛乳腺上皮细胞后对脂肪酸以及甘油三脂合成的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Rheb基因转录后沉默对甘油三脂合成的影响 | 第26-29页 |
| 2.2.7 Rheb基因过表达对甘油三脂合成的影响 | 第29-33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-46页 |
| 2.3.1 乳汁分离法分离得到奶牛乳腺上皮细胞 | 第33页 |
| 2.3.2 rapamycin抑制奶牛乳腺上皮细胞增殖且具有时间依赖性 | 第33-34页 |
| 2.3.3 rapamycin处理奶牛乳腺上皮细胞抑制mTOR信号通路的活性 | 第34-35页 |
| 2.3.4 rapamycin抑制ELOVL1和DGAT1的表达 | 第35-36页 |
| 2.3.5 rapamyciny抑制软脂酸、DHA和甘油三脂的合成 | 第36-37页 |
| 2.3.6 Rheb基因转录后沉默抑制甘油三脂合成 | 第37-41页 |
| 2.3.7 Rheb基因过表达促进甘油三脂合成 | 第41-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 mTOR信号通路介导胰岛素信号对奶牛乳腺上皮细胞甘油三酯和脂肪酸合成的影响 | 第47-53页 |
| 3.1 材料 | 第47页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂及仪器 | 第47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 胰岛素处理时间与处理浓度的优化 | 第47页 |
| 3.2.2 胰岛素对奶牛乳腺上皮细胞中甘油三脂合成的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.3 胰岛素对奶牛乳腺上皮细胞中的脂肪酸合成的影响 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-52页 |
| 3.3.1 胰岛素促进甘油三脂合成具有时间依赖性 | 第49-50页 |
| 3.3.2 rapamycin抑制胰岛素诱导的甘油三脂合成 | 第50页 |
| 3.3.3 rapamycin抑制胰岛素诱导的脂肪酸合成 | 第50-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 第四章 无乳链球菌侵染对奶牛乳腺上皮细胞甘油三酯和脂肪酸合成的影响 | 第53-59页 |
| 4.1 材料 | 第53页 |
| 4.1.1 细胞系以及菌株 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂及仪器 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.2.1 无乳链球菌侵染奶牛乳腺上皮细胞的条件优化 | 第53-54页 |
| 4.2.2 无乳链球菌侵染对奶牛乳腺上皮细胞中甘油三脂合成的影响 | 第54页 |
| 4.2.3 无乳链球菌侵染对奶牛乳腺上皮细胞中脂肪酸合成的影响 | 第54-55页 |
| 4.3 实验结果 | 第55-57页 |
| 4.3.1 无乳链球菌侵染奶牛乳腺上皮细胞的条件优化 | 第55页 |
| 4.3.2 短时间无乳链球菌侵染诱导奶牛乳腺上皮细胞甘油三脂的合成和分泌 | 第55-56页 |
| 4.3.3 短时间无乳链球菌侵染影响细胞内脂肪酸的组成 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-77页 |
