中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-26页 |
1.1 辣椒病毒病病原种类及危害简介 | 第12-22页 |
1.1.1 马铃薯卷叶病毒属 | 第14-19页 |
1.1.1.1 辣椒脉黄化病毒 | 第15-17页 |
1.1.1.2 甜菜西方黄化病毒 | 第17-18页 |
1.1.1.3 葫芦蚜传黄化病毒 | 第18-19页 |
1.1.2 烟草轻型绿花叶病毒 | 第19页 |
1.1.3 蚕豆萎蔫病毒 | 第19-21页 |
1.1.4 番茄黄化曲叶病毒 | 第21-22页 |
1.2 辣椒病毒病的防治措施 | 第22-23页 |
1.3 辣椒病毒病的检测技术研究概况 | 第23-25页 |
1.3.1 生物学检测法 | 第23页 |
1.3.2 血清学方法 | 第23-24页 |
1.3.3 分子生物学方法 | 第24-25页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-41页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第26-28页 |
2.1.1 病毒样品的采集 | 第26页 |
2.1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 实验所需仪器 | 第27页 |
2.1.4 实验试剂的配制方法 | 第27-28页 |
2.2 辣椒病毒病中RNA病毒的检测鉴定 | 第28-35页 |
2.2.1 样品RNA提取 | 第28页 |
2.2.2 相关引物设计 | 第28-29页 |
2.2.3 反转录cDNA的合成 | 第29-30页 |
2.2.4 PCR扩增 | 第30-31页 |
2.2.5 PCR产物的克隆和测序 | 第31-35页 |
2.2.5.1 琼脂糖凝胶电泳及DNA片段回收 | 第31-32页 |
2.2.5.2 连接载体 | 第32页 |
2.2.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
2.2.5.4 连接产物转化至大肠杆菌DH5α | 第33-34页 |
2.2.5.5 提取质粒DNA | 第34页 |
2.2.5.6 重组克隆质粒的PCR鉴定 | 第34-35页 |
2.2.6 序列分析 | 第35页 |
2.3 辣椒病毒病中双生病毒的检测与鉴定 | 第35-37页 |
2.3.1 样品DNA提取 | 第35页 |
2.3.2 引物的合成 | 第35-36页 |
2.3.3 双生病毒的RCR扩增 | 第36页 |
2.3.4 PCR产物的克隆及测序 | 第36-37页 |
2.3.5 序列分析 | 第37页 |
2.4 辣椒脉黄化病毒全基因组的PCR扩增 | 第37-41页 |
2.4.1 样品RNA提取 | 第37页 |
2.4.2 引物的设计与合成 | 第37-38页 |
2.4.3 反转录cDNA的合成 | 第38页 |
2.4.4 全基因组PCR扩增 | 第38-40页 |
2.4.5 PCR产物的克隆及测序 | 第40页 |
2.4.6 序列分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-54页 |
3.1 山东省侵染辣椒的RNA病毒病病原检测结果 | 第41-46页 |
3.1.1 山东省侵染辣椒的RNA病毒种类检测结果 | 第41-42页 |
3.1.2 山东省侵染辣椒的RNA病毒病检出率 | 第42-43页 |
3.1.3 山东省各地辣椒病毒病分布情况 | 第43-46页 |
3.2 山东省侵染辣椒的双生病毒检测结果 | 第46页 |
3.3 山东省辣椒病毒病复合侵染情况 | 第46-48页 |
3.4 辣椒脉黄化病毒山东分离物(PeVYV-SD)全基因组扩增及序列分析 | 第48-54页 |
3.4.1 辣椒脉黄化病毒山东分离物全长扩增 | 第48-51页 |
3.4.2 辣椒脉黄化病毒山东分离物基因组结构分析 | 第51-52页 |
3.4.3 辣椒脉黄化病毒部分基因序列进化树分析 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
4.1 山东省侵染辣椒的病毒病病原鉴定 | 第54-55页 |
4.2 辣椒病毒病复合侵染 | 第55页 |
4.3 辣椒脉黄化病毒全基因序列分析 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第66页 |