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山东省辣椒病毒病病原分子鉴定及辣椒脉黄化病毒全基因组序列分析

中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-26页
    1.1 辣椒病毒病病原种类及危害简介第12-22页
        1.1.1 马铃薯卷叶病毒属第14-19页
            1.1.1.1 辣椒脉黄化病毒第15-17页
            1.1.1.2 甜菜西方黄化病毒第17-18页
            1.1.1.3 葫芦蚜传黄化病毒第18-19页
        1.1.2 烟草轻型绿花叶病毒第19页
        1.1.3 蚕豆萎蔫病毒第19-21页
        1.1.4 番茄黄化曲叶病毒第21-22页
    1.2 辣椒病毒病的防治措施第22-23页
    1.3 辣椒病毒病的检测技术研究概况第23-25页
        1.3.1 生物学检测法第23页
        1.3.2 血清学方法第23-24页
        1.3.3 分子生物学方法第24-25页
    1.4 本研究的目的与意义第25-26页
2 材料与方法第26-41页
    2.1 实验材料与仪器第26-28页
        2.1.1 病毒样品的采集第26页
        2.1.2 实验试剂第26-27页
        2.1.3 实验所需仪器第27页
        2.1.4 实验试剂的配制方法第27-28页
    2.2 辣椒病毒病中RNA病毒的检测鉴定第28-35页
        2.2.1 样品RNA提取第28页
        2.2.2 相关引物设计第28-29页
        2.2.3 反转录cDNA的合成第29-30页
        2.2.4 PCR扩增第30-31页
        2.2.5 PCR产物的克隆和测序第31-35页
            2.2.5.1 琼脂糖凝胶电泳及DNA片段回收第31-32页
            2.2.5.2 连接载体第32页
            2.2.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第32-33页
            2.2.5.4 连接产物转化至大肠杆菌DH5α第33-34页
            2.2.5.5 提取质粒DNA第34页
            2.2.5.6 重组克隆质粒的PCR鉴定第34-35页
        2.2.6 序列分析第35页
    2.3 辣椒病毒病中双生病毒的检测与鉴定第35-37页
        2.3.1 样品DNA提取第35页
        2.3.2 引物的合成第35-36页
        2.3.3 双生病毒的RCR扩增第36页
        2.3.4 PCR产物的克隆及测序第36-37页
        2.3.5 序列分析第37页
    2.4 辣椒脉黄化病毒全基因组的PCR扩增第37-41页
        2.4.1 样品RNA提取第37页
        2.4.2 引物的设计与合成第37-38页
        2.4.3 反转录cDNA的合成第38页
        2.4.4 全基因组PCR扩增第38-40页
        2.4.5 PCR产物的克隆及测序第40页
        2.4.6 序列分析第40-41页
3 结果与分析第41-54页
    3.1 山东省侵染辣椒的RNA病毒病病原检测结果第41-46页
        3.1.1 山东省侵染辣椒的RNA病毒种类检测结果第41-42页
        3.1.2 山东省侵染辣椒的RNA病毒病检出率第42-43页
        3.1.3 山东省各地辣椒病毒病分布情况第43-46页
    3.2 山东省侵染辣椒的双生病毒检测结果第46页
    3.3 山东省辣椒病毒病复合侵染情况第46-48页
    3.4 辣椒脉黄化病毒山东分离物(PeVYV-SD)全基因组扩增及序列分析第48-54页
        3.4.1 辣椒脉黄化病毒山东分离物全长扩增第48-51页
        3.4.2 辣椒脉黄化病毒山东分离物基因组结构分析第51-52页
        3.4.3 辣椒脉黄化病毒部分基因序列进化树分析第52-54页
4 讨论第54-56页
    4.1 山东省侵染辣椒的病毒病病原鉴定第54-55页
    4.2 辣椒病毒病复合侵染第55页
    4.3 辣椒脉黄化病毒全基因序列分析第55-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-66页
攻读硕士学位期间发表论文第66页

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