中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩写词表 | 第13-14页 |
实验研究中常用的单位符号 | 第14-15页 |
第1章 综述 | 第15-25页 |
1.1 肝癌发生微环境 | 第15-17页 |
1.2 肝癌治疗的新靶点 | 第17-25页 |
第2章 实验研究 | 第25-93页 |
前言 | 第25-27页 |
第1节 选择高效沉默Endocan基因的RNA干扰序列 | 第27-46页 |
1.1 材料与仪器 | 第27-29页 |
1.1.1 主要材料 | 第27-29页 |
1.1.2 主要仪器 | 第29页 |
1.2 实验方法 | 第29-41页 |
1.2.1 细胞准备 | 第29-30页 |
1.2.2 Endocan基因沉默 | 第30-34页 |
1.2.3 Endocan基因沉默PCR检测 | 第34-37页 |
1.2.4 蛋白检测 | 第37-41页 |
1.2.5 结果分析 | 第41页 |
1.3 实验结果 | 第41-44页 |
1.3.1 RNAi技术进行Endocan基因沉默后的基因表达检测 | 第41-42页 |
1.3.2 RNAi技术进行Endocan基因沉默后的蛋白表达检测 | 第42-44页 |
1.4 讨论 | 第44-46页 |
第2节 实验研究Endocan基因沉默对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响 | 第46-55页 |
2.1 材料与仪器 | 第46-47页 |
2.1.1 主要材料 | 第46-47页 |
2.1.2 主要仪器 | 第47页 |
2.2 实验方法 | 第47-50页 |
2.2.1 MTT方法检测细胞增殖情况 | 第47-48页 |
2.2.2 Transwell小室实验 | 第48-50页 |
2.2.3 结果分析 | 第50页 |
2.3 实验结果 | 第50-53页 |
2.3.1 MTT法检测Endocan基因沉默后对肝癌细胞存活的影响 | 第50-51页 |
2.3.2 Transwell小室实验检测Endocan基因沉默后对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第51-53页 |
2.4 讨论 | 第53-55页 |
第3节 实验研究Endocan基因沉默对肝癌细胞凋亡的影响 | 第55-61页 |
3.1 材料与仪器 | 第55-56页 |
3.1.1 主要材料 | 第55页 |
3.1.2 主要仪器 | 第55-56页 |
3.2 实验方法 | 第56-57页 |
3.2.1 细胞培养 | 第56页 |
3.2.2 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第56-57页 |
3.2.3 结果分析 | 第57页 |
3.3 实验结果 | 第57-60页 |
3.4 讨论 | 第60-61页 |
第4节 实验研究Endocan基因沉默对肝癌细胞自噬的影响 | 第61-76页 |
4.1 材料与仪器 | 第61-63页 |
4.1.1 主要材料 | 第61-62页 |
4.1.2 主要仪器 | 第62-63页 |
4.2 实验方法 | 第63-68页 |
4.2.1 细胞准备 | 第63页 |
4.2.2 Western Blot检测自噬相关蛋白 | 第63-66页 |
4.2.3 mRFP-GFP-LC3双荧光体系检测自噬 | 第66-68页 |
4.2.4 结果分析 | 第68页 |
4.3 实验结果 | 第68-74页 |
4.3.1 自噬相关蛋白的检测 | 第68-71页 |
4.3.2 mRFP-GFP-LC3双荧光体系检测各组SK-HEP-1 细胞自噬的发生 | 第71-74页 |
4.4 讨论 | 第74-76页 |
第5节 实验研究Endocan基因与NF-κB通路相互调节 | 第76-93页 |
5.1 材料与仪器 | 第76-78页 |
5.1.1 主要材料 | 第76-77页 |
5.1.2 主要仪器 | 第77-78页 |
5.2 实验方法 | 第78-87页 |
5.2.1 细胞培养 | 第78-79页 |
5.2.2 Western Blot检测细胞核及细胞浆中NF-κB | 第79-83页 |
5.2.3 EMSA法检测细胞核中NF-κB | 第83-86页 |
5.2.4 NF-κB通路抑制后Endocan表达的检测 | 第86页 |
5.2.5 结果分析 | 第86-87页 |
5.3 实验结果 | 第87-91页 |
5.3.1 Endocan基因沉默后对NF-κB通路的影响 | 第87-89页 |
5.3.2 NF-κB通路抑制后对Endocan表达的影响 | 第89-91页 |
5.4 讨论 | 第91-93页 |
第3章 讨论 | 第93-97页 |
3.1 Endocan基因沉默后对肝癌细胞生存的影响 | 第93页 |
3.2 Endocan基因沉默后诱导肝癌细胞的程序性死亡 | 第93-94页 |
3.3 Endocan基因沉默通过NF-κB通路抑制细胞存活 | 第94-97页 |
第4章 结论 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-113页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第113-115页 |
致谢 | 第115页 |