| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstarct | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 纳米抗体的简介 | 第12-18页 |
| 1.1.1 抗体的发展 | 第12-14页 |
| 1.1.2 纳米抗体的结构与生物学特性 | 第14-16页 |
| 1.1.3 纳米抗体的应用 | 第16-18页 |
| 1.2 癌胚抗原 | 第18-21页 |
| 1.2.1 肿瘤标志物 | 第18页 |
| 1.2.2 CEACAM 6 | 第18-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-39页 |
| 2.1 主要材料试剂及实验设备 | 第21-25页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验材料及试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 常用溶液的配制 | 第23-25页 |
| 2.2 三种纳米抗体的诱导表达 | 第25-30页 |
| 2.2.1 纳米抗体原核表达菌株的鉴定 | 第25-28页 |
| 2.2.2 三种纳米抗体高表达菌株的筛选 | 第28-29页 |
| 2.2.3 Nb15-2、Nb35-2 和Nb37-1 诱导表达条件优化 | 第29-30页 |
| 2.3 Nb15-2、Nb35-2 和Nb37-1 的纯化 | 第30-35页 |
| 2.3.1 Nb15-2、Nb35-2 和Nb37-1 可溶性验证 | 第30-32页 |
| 2.3.2 Nb15-2、Nb35-2 和Nb37-1 纯化条件筛选 | 第32-34页 |
| 2.3.3 Nb15-2、Nb35-2 和Nb37-1 大量纯化 | 第34-35页 |
| 2.4 纳米抗体初步活性研究 | 第35-39页 |
| 2.4.1 流式细胞术筛选CEACAM 6 高表达肿瘤细胞株 | 第35-37页 |
| 2.4.2 纳米抗体亲和力分析 | 第37页 |
| 2.4.3 纳米抗体Nb15-2 的提纯优化 | 第37-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-53页 |
| 3.1 纳米抗体阳性表达菌株的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.1.1 pSJF2-15、pSJF2-35和pSJF2-37质粒双酶切 | 第39页 |
| 3.1.2 pSJF2-15、pSJF2-35和pSJF2-37序列比对 | 第39-40页 |
| 3.2 三种纳米抗体诱导表达 | 第40-45页 |
| 3.2.1 IPTG小量快速诱导表达 | 第40-41页 |
| 3.2.2 诱导表达条件优化 | 第41-45页 |
| 3.3 纳米抗体的纯化 | 第45-49页 |
| 3.3.1 纳米抗体诱导表达可溶性分析 | 第45-46页 |
| 3.3.2 纳米抗体诱导表达蛋白Western blot验证 | 第46页 |
| 3.3.3 纳米抗体亲和层析条件筛选 | 第46-48页 |
| 3.3.4 纳米抗体大量纯化 | 第48页 |
| 3.3.5 大量纯化的纳米抗体蛋白Western blot验证 | 第48-49页 |
| 3.3.6 蛋白浓度测定 | 第49页 |
| 3.4 纳米抗体的初步活性分析 | 第49-53页 |
| 3.4.1 CEACAM 6 高表达肿瘤细胞的筛选 | 第49-50页 |
| 3.4.2 纳米抗体亲和力分析 | 第50-52页 |
| 3.4.3 纳米抗体Nb15-2 的提纯优化 | 第52-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 结论 | 第55-56页 |
| 第六章 参考文献 | 第56-60页 |
| 第七章 致谢 | 第60页 |
