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四株海洋新菌的鉴定及菌株HQM9~T和Q1~T的琼胶降解酶研究

摘要第11-14页
ABSTRACT第14-16页
缩略词第17-19页
第一章 绪论第19-30页
    1.1 琼胶及琼胶寡糖第19-21页
        1.1.1 琼胶第19-20页
        1.1.2 琼胶寡糖第20-21页
    1.2 琼胶降解酶第21-25页
        1.2.1 琼胶酶第21-23页
        1.2.2 新琼二糖水解酶第23-25页
    1.3 琼胶降解途径第25-29页
        1.3.1 α-琼胶酶降解途径第25页
        1.3.2 β-琼胶酶降解途径第25-27页
        1.3.3 β-紫菜胶酶降解途径第27-29页
    1.4 立题依据第29-30页
第二章 四株海洋新菌的分类鉴定及两株噬琼胶菌的基因组分析第30-74页
    2.1 实验材料第30-32页
        2.1.1 实验菌株第30-31页
        2.1.2 主要试剂及仪器第31页
        2.1.3 培养基与溶液第31-32页
    2.2 实验方法第32-41页
        2.2.1 表型特征鉴定第32页
        2.2.2 生理生化特征鉴定第32-34页
        2.2.3 基于遗传学的分类鉴定第34-39页
        2.2.4 化学特征鉴定第39-40页
        2.2.5 基因组测序第40-41页
        2.2.6 菌株保藏第41页
    2.3 实验结果与分析第41-73页
        2.3.1 噬琼胶科尔韦尔氏菌(Colwellia agarivorans sp.nov)QM50~T的多相分类鉴定第41-47页
        2.3.2 噬琼胶黏着杆菌(Tenacibaculum agarivorans sp.nov.)HZ1~T的多相分类鉴定第47-53页
        2.3.3 橙色鲨鱼球菌(Pistricoccus aurantiacus gen.nov,sp.nov)SS9T的多相分类鉴定第53-61页
        2.3.4 沉积物深海杆菌(Thalassotalea sediminis sp.nov)N211~T的多相分类鉴定第61-68页
        2.3.5 噬琼胶菌QM50~T和HZ1~T的基因组分析第68-73页
    2.4 本章小结第73-74页
第三章 菌株Q1~T和HQM9~T琼胶降解酶基因的克隆表达分析第74-112页
    3.1 实验材料第74-75页
        3.1.1 实验菌株与质粒第74页
        3.1.2 主要试剂及仪器第74-75页
        3.1.3 培养基与溶液第75页
    3.2 实验方法第75-85页
        3.2.1 琼胶降解酶基因的生物信息学分析第75页
        3.2.2 琼胶降解酶基因的克隆第75-79页
        3.2.3 重组琼胶降解酶的表达与纯化第79-82页
        3.2.4 重组琼胶酶酶学性质研究第82-83页
        3.2.5 重组琼胶降解酶酶解产物分析第83-85页
    3.3 结果与分析第85-111页
        3.3.1 琼胶降解酶基因的生物信息学分析第85-94页
        3.3.2 琼胶降解酶基因的克隆表达第94-99页
        3.3.3 琼胶酶基因诱导表达优化及可溶性重组琼胶酶的纯化第99-102页
        3.3.4 重组琼胶降解酶粗酶液降解底物的产物分析第102-104页
        3.3.5 重组酶Q1B1的纯化与复性第104-105页
        3.3.6 重组酶Q1B1的酶学性质研究第105-111页
    3.4 本章小结第111-112页
第四章 菌株Q1~T中的琼胶降解相关基因表达特性研究第112-122页
    4.1 实验材料第112-113页
        4.1.1 实验菌株及培养基第112-113页
        4.1.2 主要试剂与仪器第113页
    4.2 实验方法第113-117页
        4.2.1 菌株Q1~T生长曲线的测定第113页
        4.2.2 菌株Q1~T的诱导培养及菌体收集第113页
        4.2.3 细菌总RNA的提取及浓度检测第113-114页
        4.2.4 cDNA的合成第114页
        4.2.5 菌株Q1~T琼胶降解相关基因的筛选及引物设计第114-116页
        4.2.6 实时荧光定量PCR检测琼胶降解相关基因的表达第116-117页
    4.3 结果与分析第117-121页
        4.3.1 菌株Q1~T的生长曲线第117-118页
        4.3.2 细菌总RNA检测第118页
        4.3.3 琼胶降解相关基因的表达差异分析第118-121页
    4.4 本章小结第121-122页
总结与展望第122-123页
参考文献第123-134页
附录1第134-137页
附录2第137-151页
致谢第151-152页
资助情况第152-153页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第153-154页
学位论文评阅及答辩情况表第154页

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