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解析内生细菌Pantoea ananatis Sd-1的木质纤维素降解体系研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
英文缩略词第16-18页
第1章 绪论第18-29页
    1.1 引言第18页
    1.2 木质纤维素第18-23页
        1.2.1 木质纤维素降解相关酶系第20-23页
            1.2.1.1 纤维素及其降解酶第20-21页
            1.2.1.2 半纤维素及其降解酶第21页
            1.2.1.3 木质素及其降解酶第21-23页
    1.3 真菌降解木质纤维素的研究第23-24页
    1.4 细菌降解木质纤维素的研究第24-27页
    1.5 菠萝属菌株降解木质纤维素的研究第27页
    1.6 本论文的选题意义、目的及研究内容第27-29页
第2章 Pantoea ananatis Sd-1 降解水稻秸秆特性研究第29-40页
    2.1 引言第29页
    2.2 材料与方法第29-33页
        2.2.1 材料与试剂第29-30页
        2.2.2 菌株培养条件第30页
        2.2.3 细菌的生长情况测定第30-31页
        2.2.4 还原糖含量测定第31页
        2.2.5 木质纤维素降解酶类活性测定第31-32页
        2.2.6 木质纤维素各组分含量测定第32-33页
        2.2.7 木质纤维素扫描电镜分析第33页
    2.3 结果与讨论第33-39页
        2.3.1 P. ananatis Sd-1 对预处理水稻秸秆的降解分析第33-34页
        2.3.2 水稻秸秆经P. ananatis Sd-1 处理的木质纤维素组分含量分析第34-35页
        2.3.3 P. ananatis Sd-1 处理水稻秸秆的还原糖产量分析第35-36页
        2.3.4 P. ananatis Sd-1 降解水稻秸秆过程中木质纤维素类酶活分析第36-37页
        2.3.5 水稻秸秆经P. ananatis Sd-1 处理过程中的pH变化分析第37-38页
        2.3.6 水稻秸秆经P. ananatis Sd-1 降解后的微观形态观察第38-39页
    2.4 本章小结第39-40页
第3章 Pantoea ananatis Sd-1 的全基因组测序分析第40-58页
    3.1 引言第40页
    3.2 材料与方法第40-45页
        3.2.1 材料与试剂第40-41页
        3.2.2 菌株培养条件第41页
        3.2.3 细菌全基因组DNA的提取第41-42页
        3.2.4 细菌的RNA提取及cDNA合成第42-43页
        3.2.5 细菌全基因组测序与数据组装第43-44页
        3.2.6 基因预测和功能注释第44页
        3.2.7 木质纤维素降解有关的基因预测分析第44页
        3.2.8 荧光实时定量PCR (qRT-PCR) 检测第44-45页
    3.3 结果与讨论第45-56页
        3.3.1 全基因组测序数据的K-mer统计及基因组组装第45-46页
        3.3.2 基因预测与功能注释第46-47页
        3.3.3 Pantoea ananatis Sd-1 全基因组特征分析第47页
        3.3.4 碳水化合物活性酶基因预测及分析第47-50页
        3.3.5 P. ananatis Sd-1 的木质纤维素降解酶体系特征分析第50-55页
        3.3.6 木质纤维素降解相关基因的验证分析第55-56页
    3.4 本章小结第56-58页
第4章 Pantoea ananatis Sd-1 分泌蛋白质组学研究第58-73页
    4.1 引言第58页
    4.2 材料与方法第58-64页
        4.2.1 材料与试剂第58-59页
        4.2.2 菌株培养条件第59-60页
        4.2.3 细菌的生长测定第60页
        4.2.4 木质纤维素降解酶类活性的测定第60页
        4.2.5 分泌蛋白质的提取第60页
        4.2.6 蛋白质含量的测定第60-61页
        4.2.7 聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)第61-62页
        4.2.8 双向聚丙烯酰氨凝胶电泳(2D-PAGE)第62页
        4.2.9 蛋白质胶内酶解第62-63页
        4.2.10 蛋白质的质谱鉴定分析第63-64页
        4.2.11 分泌蛋白质水解糖化水稻秸秆第64页
    4.3 结果与讨论第64-72页
        4.3.1 Pantoea ananatis Sd-1 在不同碳源中的生长和蛋白质浓度分析第64-66页
        4.3.2 Pantoea ananatis Sd-1 在不同碳源中的木质纤维素降解酶类活性分析第66-67页
        4.3.3 Pantoea ananatis Sd-1 在不同碳源中的分泌蛋白质分析第67-68页
        4.3.4 Pantoea ananatis Sd-1 在不同碳源中的分泌蛋白质鉴定分析第68-71页
        4.3.5 Pantoea ananatis Sd-1 的分泌蛋白质降解能力分析第71-72页
    4.4 本章小结第72-73页
第5章 Pantoea ananatis Sd-1 降解体系中的非酶氧化机制探究第73-101页
    5.1 引言第73页
    5.2 材料与方法第73-79页
        5.2.1 材料与试剂第73-74页
        5.2.2 菌株培养条件第74页
        5.2.3 细菌的生长测定第74页
        5.2.4 芬顿试剂处理水稻秸秆第74页
        5.2.5 羟基自由基清除剂对降解率的影响实验第74页
        5.2.6 还原糖含量的测定第74-75页
        5.2.7 木质纤维素各组分含量的测定第75页
        5.2.8 木质纤维素降解酶类活性测定第75页
        5.2.9 高效液相色谱(HPLC)分析降解产物第75页
        5.2.10 甲基亚磺酸的测定第75-76页
        5.2.11 热裂解-气质联用(Py-GC/MS)分析第76页
        5.2.12 红外光谱(FTIR)分析第76页
        5.2.13 气质联用(GC-MS)分析第76-77页
        5.2.14 铁离子还原性的测定第77页
        5.2.15 总铁离子测定第77页
        5.2.16 分泌蛋白质的提取第77页
        5.2.17 细菌的RNA提取及cDNA合成第77页
        5.2.18 荧光实时定量PCR (qRT-PCR) 检测第77-78页
        5.2.19 GMC家族氧化还原酶活性测定第78页
        5.2.20 过氧化氢浓度测定第78-79页
    5.3 结果与讨论第79-99页
        5.3.1 Pantoea ananatis Sd-1 对未预处理水稻秸秆的降解分析第79-82页
            5.3.1.1 Pantoea ananatis Sd-1 在未预处理水稻秸秆底物中的生长及产还原糖分析第79-80页
            5.3.1.2 Pantoea ananatis Sd-1 对未预处理水稻秸秆的降解率分析第80-81页
            5.3.1.3 Pantoea ananatis Sd-1 降解过程中木质纤维素降解酶类活性分析第81-82页
        5.3.2 羟基自由基清除剂对 Pantoea ananatis Sd-1 降解未预处理水稻秸秆的影响第82-89页
            5.3.2.1 DMSO 对 Pantoea ananatis Sd-1 降解过程中菌体生长及产还原糖影响第82-83页
            5.3.2.2 DMSO 对 Pantoea ananatis Sd-1 降解能力的影响第83-85页
            5.3.2.3 DMSO 对 Pantoea ananatis Sd-1 降解过程中产糖及糖降解的影响第85-86页
            5.3.2.4 DMSO 对 Pantoea ananatis Sd-1 的木质纤维素降解酶类活性的影响第86-87页
            5.3.2.5 其他羟基自由基清除剂对 Pantoea ananatis Sd-1 降解能力的影响第87-89页
        5.3.3 Pantoea ananatis Sd-1 降解后的水稻秸秆化学结构分析第89-91页
            5.3.3.1 热裂解-气质联用(Py-GC/MS)分析第89-90页
            5.3.3.2 傅立叶红外光谱(FTIR)分析第90-91页
        5.3.4 Pantoea ananatis Sd-1 的铁离子还原活性分析第91-97页
        5.3.5 Pantoea ananatis Sd-1 降解过程中过氧化氢的产生与消耗分析第97-99页
    5.4 本章小结第99-101页
结论第101-102页
参考文献第102-120页
附录A第120-128页
附录B(攻读博士学位期间所发表的学术论文目录)第128-129页
致谢第129-130页

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