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小麦条锈菌吸器转录组分析及PSTha5a23基因的功能研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第13-20页
    1.1 小麦条锈病的发病现状及危害第13-14页
    1.2 小麦条锈菌的生物学特性第14页
    1.3 植物病原菌效应蛋白的研究进展第14-17页
        1.3.1 植物与病原菌互作的Z字模型第14-16页
        1.3.2 效应基因的序列特征第16页
        1.3.3 胞外效应蛋白和胞内效应蛋白第16页
        1.3.4 效应基因的鉴定技术第16-17页
    1.5 小麦条锈菌转录组分析第17页
    1.6 miRNA的发现与功能第17-18页
    1.7 miRNA的鉴定方法第18-19页
    1.8 本研究的目的和意义第19-20页
第二章 小麦条锈菌吸器RNA-Seq序列分析第20-40页
    前言第20页
    2.1 材料和方法第20-30页
        2.1.1 小麦幼苗培养、接种和取样第20页
        2.1.2 试剂与仪器第20-21页
        2.1.3 琼脂糖凝胶柱的制备第21页
        2.1.4 小麦条锈菌吸器的提取第21-22页
        2.1.5 显微镜观察提取的吸器第22页
        2.1.6 吸器总RNA提取第22-23页
        2.1.7 小麦条锈菌吸器总RNA浓度、纯度及完整性检测第23页
        2.1.8 条锈菌rRNA去除和RNA片断化(rRNA depleted and RNA fragmentation)第23-24页
        2.1.9 mRNA纯化及片段化(Purify the m RNA and Fragmentation)第24页
        2.1.10 cDNA第一链合成第24-25页
        2.1.11 cDNA第二链合成第25页
        2.1.12 末端修复(Perform End Repair)第25-26页
        2.1.13 3 '末端加腺苷酸(Adenylate 3' Ends)第26页
        2.1.14 连接接头(Ligate the Adapters)第26-27页
        2.1.15 富集纯化的cDNA模板( Enrich the cDNA Templates)第27-28页
        2.1.16 文库质检(QC the libraries)第28页
        2.1.17 试剂和仪器(Reagent and Equipment)第28-29页
        2.1.18 序列处理与拼接第29页
        2.1.19 功能注释第29-30页
    2.2 结果与分析第30-37页
        2.2.1 小麦条锈菌吸器分离效率与纯度检测第30页
        2.2.2 RNA浓度、纯度及完整性检测第30-31页
        2.2.3 测序数据和从头组装( de novo)第31-32页
        2.2.4 序列比对及功能注释第32-34页
        2.2.5 功能分类第34-35页
        2.2.6 代谢途径分析第35-37页
    2.3 讨论第37-38页
    2.4 小结第38-40页
第三章 小麦条锈菌PSTha5a23效应蛋白的筛选及其功能研究第40-55页
    3.1 材料第40-41页
    3.2 方法第41-44页
        3.2.1 生物信息学分析方法第41页
        3.2.2 抑制子PSTha5a23效应蛋白的筛选第41页
        3.2.3 PSTha5a23基因质粒构建方法第41-43页
        3.2.4 PSTha5a23基因的表达特征分析第43页
        3.2.5 PSTha5a23基因的多态性分析第43页
        3.2.6 PSTha5a23蛋白的分泌特性验证第43页
        3.2.7 PSTha5a23基因的亚细胞定位第43页
        3.2.8 PSTha5a23基因的过表达第43-44页
        3.2.9 PSTha5a23基因的沉默第44页
    3.3 结果与分析第44-52页
        3.3.1 生物信息学分析结果第44页
        3.3.2 PSTha5a23基因的筛选与鉴定第44-45页
        3.3.3 PSTha5a23基因的表达特征分析第45-46页
        3.3.4 PSTha5a23基因的多态性分析第46-47页
        3.3.5 PSTha5a23蛋白的分泌特性验证第47-48页
        3.3.6 PSTha5a23基因的亚细胞定位第48-49页
        3.3.7 PSTha5a23基因的过表达第49-51页
        3.3.8 PSTha5a23基因的沉默第51-52页
    3.4 讨论第52-54页
    3.5 小结第54-55页
第四章 结论和创新点第55-57页
    4.1 结论第55-56页
        4.1.1 条锈菌CYR32吸器转录组第55页
        4.1.2 条锈菌CYR32 unigene的GO注释分类第55页
        4.1.3 条锈菌CYR32 unigene的KEGG数据库的代谢通路( pathway)分析第55页
        4.1.4 条锈菌CYR32效应因子的预测第55-56页
        4.1.5 条锈菌PSTha5a23的基因功能第56页
    4.2 创新点第56-57页
参考文献第57-79页
附录第79-94页
附表第94-104页
附件 3第104-107页
致谢第107-109页
作者简介第109页

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