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E3泛素连接酶亚基MogrrA调控稻瘟病菌生长发育的分子机制

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 文献综述第8-17页
   ·稻瘟病概况第8-9页
     ·稻瘟病与稻瘟病菌第8页
     ·稻瘟病菌的侵染循环第8-9页
   ·稻瘟病菌生长发育相关基因概述第9-14页
     ·参与分生孢子形成的基因第9-10页
     ·附着胞发育相关基因及调控途径第10-14页
   ·泛素连接酶及其调节亚基的功能研究第14-17页
     ·泛素化系统第14页
     ·泛素连接酶第14-15页
     ·泛素连接酶及其调节亚基的功能研究第15-17页
2 引言第17-19页
3 材料与方法第19-32页
   ·供试菌株第19页
   ·供试培养基第19-20页
   ·供试菌株的培养第20页
   ·稻瘟病菌总DNA、mRNA的提取及cDNA的制备第20-22页
     ·稻瘟病菌菌丝体基因组DNA的提取第20-21页
     ·稻瘟病菌总RNA的提取第21-22页
     ·第一链cDNA的反转录合成第22页
   ·Southern杂交第22-24页
     ·Dig-DNA标记第22页
     ·DNA消化及电泳第22-23页
     ·转膜第23页
     ·Southern杂交第23页
     ·洗膜显色第23-24页
   ·MogrrA氨基酸序列获得及分析第24页
   ·MogrrA敲除载体构建及突变体鉴定第24-27页
     ·MogrrA敲除载体构建第24-25页
     ·原生质体制备第25页
     ·原生质体转化第25-26页
     ·MogrrA缺失突变体的筛选及验证第26页
     ·MogrrA突变体的基因回补第26-27页
   ·MogrrA不同结构域回补载体的构建及突变体鉴定第27页
     ·MogrrA不同结构域回补载体构建第27页
     ·MogrrA不同结构域回补突变体的获得与验证第27页
     ·Southen杂交验证第27页
   ·MogrrA突变体生物学表型分析第27-29页
     ·MogrrA突变体在不同培养基上的生长速率及干重比较第27-28页
     ·MogrrA突变体对几种胁迫因子的敏感性分析第28页
     ·MogrrA突变体原生质体释放观察第28页
     ·MogrrA突变体产孢量测定第28页
     ·MogrrA突变体附着胞形成及膨压测定第28-29页
   ·MogrrA突变体疏水性分析第29页
   ·MogrrA突变体致病性分析第29-30页
     ·MogrrA突变体对大麦叶片致病性测定第29页
     ·MogrrA突变体对水稻叶片致病性测定第29页
     ·MogrrA突变体对水稻根部致病性测定第29-30页
     ·MogrrA突变体创伤接种离体水稻叶片第30页
     ·MogrrA不同功能域敲除突变体对水稻叶片的致病性测定第30页
   ·MogrrA突变体大麦表皮侵染观察第30页
   ·实时荧光定量PCR第30-32页
     ·qRT-PCR检测MogrrA在不同发育阶段的表达第30页
     ·qRT-PCR检测附着胞发育相关基因表达第30-31页
     ·qRT-PCR检测分生孢子发育相关基因表达第31页
     ·qRT-PCR检测几丁质合成酶编码基因表达第31-32页
4 结果与分析第32-45页
   ·MGG_13065.6基因的生物信息学分析第32-33页
   ·MogrrA在不同阶段的特异性表达及敲除突变体的筛选与鉴定第33-34页
   ·MogrrA缺失影响稻瘟病菌菌丝的生长第34-35页
   ·MogrrA缺失影响稻瘟病菌色素的积累第35-36页
   ·MogrrA调控稻瘟病菌无性繁殖及有性生殖第36-37页
   ·MogrrA参与稻瘟病菌对水稻的致病性第37-38页
   ·MogrrA突变体降低对外源胁迫因子的耐受性第38-40页
   ·MogrrA参与稻瘟病菌附着胞的分化第40-41页
   ·MogrrA缺失影响稻瘟病菌附着胞的侵入第41-42页
   ·MogrrA影响稻瘟病菌气生菌丝的疏水性第42-43页
   ·MogrrA不同结构域敲除突变体的功能分析第43-45页
5 小结与讨论第45-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
附录第54-57页
作者简介第57页

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