| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-33页 |
| 第一章 棉花纤维伸长发育研究进展 | 第15-21页 |
| 1 棉花纤维发育过程 | 第15-16页 |
| 2 棉花纤维发育伸长期研究进展 | 第16-21页 |
| ·棉纤维伸长生理机制 | 第16-17页 |
| ·棉花纤维伸长影响因素 | 第17-18页 |
| ·棉花纤维伸长相关基因的研究进展 | 第18-21页 |
| ·纤维细胞代谢相关基因在纤维伸长过程中的重要作用 | 第18-19页 |
| ·纤维细胞结构相关基因在纤维伸长时期的重要作用 | 第19页 |
| ·转录因子在纤维伸长时期的重要作用 | 第19-21页 |
| 第二章 植物MYB蛋白 | 第21-31页 |
| 1 植物MYB简介 | 第21-25页 |
| ·植物MYB的发现 | 第21-22页 |
| ·植物MYB的结构 | 第22页 |
| ·植物MYB的分类 | 第22-24页 |
| ·植物MYB基因的进化 | 第24-25页 |
| 2 植物R2R3-MYB因子 | 第25-29页 |
| ·植物R2R3-MYB的基因结构 | 第25页 |
| ·植物R2R3-MYB的生物学功能 | 第25-29页 |
| ·R2R3-MYB调控初级及次级代谢 | 第25-26页 |
| ·R2R3-MYB决定细胞命运及特征 | 第26页 |
| ·R2R3-MYB蛋白调节植物生长 | 第26-29页 |
| ·R2R3-MYB响应生物及非生物胁迫 | 第29页 |
| 3 植物MYB60以及MYB25基因相关研究 | 第29-30页 |
| 4 棉花MYB相关研究进展 | 第30-31页 |
| 本研究的目的及意义 | 第31-33页 |
| 第二部分 研究报告 | 第33-105页 |
| 第三章 GhMYB60及GhMYB25-1的分子克隆与序列分析 | 第33-63页 |
| 1 材料与方法 | 第33-40页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株、质粒、试剂及引物 | 第33-34页 |
| ·RNA提取所用试剂 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-40页 |
| ·棉花胚珠总RNA的提取及纯化 | 第35-36页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第36-37页 |
| ·3'RACE的cDNA第一链合成 | 第36页 |
| ·5'RACE的cDNA第一链合成 | 第36-37页 |
| ·cDNA内标扩增检测 | 第37-38页 |
| ·目的基因的克隆及全长的获得 | 第38-40页 |
| ·目的基因的RACE及ORF扩增 | 第38页 |
| ·PCR产物的分离及回收纯化 | 第38-39页 |
| ·胶回收产物的连接、转化及测序 | 第39-40页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-59页 |
| ·棉花胚珠总RNA的提取和反转录 | 第40-41页 |
| ·GhMYB60基因全长的克隆 | 第41-42页 |
| ·GhMYB60的生物信息学分析 | 第42-49页 |
| ·GhMYB60全长cDNA序列分析 | 第42-43页 |
| ·GhMYB60基因编码蛋白序列分析 | 第43-47页 |
| ·GhMYB60基因组序列分析 | 第47-48页 |
| ·GhMYB60启动子序列分析 | 第48-49页 |
| ·GhMYB25-1基因全长的克隆 | 第49-50页 |
| ·GhMYB25-1的生物信息学分析 | 第50-59页 |
| ·GhMYB25-1全长cDNA序列分析 | 第50-51页 |
| ·GhMYB25-1基因编码蛋白序列分析 | 第51-55页 |
| ·GhMYB25-1基因组序列分析 | 第55-58页 |
| ·GhMYB25-1启动子序列分析 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-63页 |
| ·GhMYB60蛋白结构特征 | 第60页 |
| ·GhMYB60基因组序列分析 | 第60页 |
| ·GhMYB25-1蛋白结构特征 | 第60-61页 |
| ·GhMYB25-1基因组序列分析 | 第61-63页 |
| 第四章 GhMYB60及GhMYB25-1表达特征分析与亚细胞定位 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第63-67页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·植物材料 | 第63页 |
| ·菌株、质粒、试剂及引物 | 第63页 |
| ·RNA提取所用试剂及配法 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-67页 |
| ·棉花胚珠总RNA的提取及纯化 | 第64页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第64页 |
| ·洋葱表皮细胞瞬时表达分析 | 第64-67页 |
| ·PJIT166瞬时表达载体的构建 | 第64-66页 |
| ·基因枪介导的重组质粒转化 | 第66-67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-74页 |
| ·不同棉花组织总RNA提取结果 | 第67-68页 |
| ·GhMYB60组织表达特征分析 | 第68-70页 |
| ·GhMYB25-1组织表达特征分析 | 第70-71页 |
| ·GhMYB60及GhMYB25-1亚细胞定位 | 第71-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| ·GhMYB60组织表达特征分析 | 第74-75页 |
| ·GhMYB60亚细胞定位分析 | 第75页 |
| ·GhMYB25-1组织表达特征分析 | 第75页 |
| ·GhMYB25-1亚细胞定位分析 | 第75-77页 |
| 第五章 GhMYB60及GhMYB25-1在拟南芥中过表达与功能分析 | 第77-95页 |
| 1 材料与方法 | 第77-82页 |
| ·实验材料 | 第77-78页 |
| ·菌株、质粒及试剂 | 第77页 |
| ·溶液 | 第77-78页 |
| ·拟南芥种子 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-82页 |
| ·拟南芥过表达载体构建 | 第78-79页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第79-80页 |
| ·液氮冻融法转化农杆菌 | 第80页 |
| ·拟南芥的处理及培养 | 第80页 |
| ·Floral-dip转化拟南芥 | 第80-81页 |
| ·转基因拟南芥的鉴定 | 第81-82页 |
| ·拟南芥植株的初筛 | 第81页 |
| ·简单CTAB法提取拟南芥叶片基因组DNA | 第81页 |
| ·拟南芥转基因后代的表型观察 | 第81-82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-93页 |
| ·GhMYB60及GhMYB25-1拟南芥过表达载体的构建 | 第82页 |
| ·转基因拟南芥的Kan~+筛选及PCR鉴定 | 第82-84页 |
| ·GhMYB60转基因拟南芥的表型观察 | 第84-93页 |
| ·GhMYB60对转基因拟南芥生长发育的影响 | 第84-89页 |
| ·不同植物激素及甘露醇促进GhMYB60的表达 | 第89-92页 |
| ·GhMYB60影响转基因拟南芥的初花期 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| ·GhMYB60响应逆境胁迫 | 第93页 |
| ·GhMYB60响应植物激素 | 第93页 |
| ·GhMYB60影响植物生长周期 | 第93-95页 |
| 第六章 GhMYB60在棉花中过表达 | 第95-105页 |
| 1 材料与方法 | 第95-100页 |
| ·实验材料 | 第95页 |
| ·培养基及溶液 | 第95-96页 |
| ·实验方法 | 第96-100页 |
| ·pBI121载体的改造 | 第96-97页 |
| ·三种转基因棉花过表达载体的构建 | 第97-98页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态细胞的制备 | 第98页 |
| ·液氮冻融法转化农杆菌LBA4404 | 第98页 |
| ·棉花转基因实验步骤 | 第98-99页 |
| ·转基因棉花愈伤各个时期的形态观察及鉴定 | 第99-100页 |
| 2 结果与分析 | 第100-104页 |
| ·启动子FBP7、SCFP以及AGL5序列扩增 | 第100页 |
| ·FBP7-pBI121、SCFP-pBI121以及AGL5-pBI121载体的构建 | 第100-101页 |
| ·转基因棉花的获得 | 第101-103页 |
| ·转基因棉花胚性愈伤的GUS检测 | 第103页 |
| ·转基因棉花再生植株的获得 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-105页 |
| 全文结论 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 附录 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
