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野鸽疱疹病毒的分离鉴定及UL27基因生物信息学分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-20页
   ·疱疹病毒科概述第10-16页
     ·疱疹病毒的分类第10页
     ·疱疹病毒的形态结构第10-11页
     ·疱疹病毒复制第11-13页
     ·疱疹病毒的基因组结构第13-14页
     ·疱疹病毒编码的蛋白第14-15页
     ·实验室诊断技术第15-16页
   ·禽疱疹病毒科概述第16页
   ·疱疹病毒UL27基因及其编码的糖蛋白B的研究进展第16-19页
     ·疱疹病毒UL27基因的特点及作用第16-17页
     ·UL27基因编码的gB的结构特征第17页
     ·gB的生物学特性及病毒感染中的作用机理第17-18页
     ·gB蛋白在预防及诊断方面的研究第18-19页
   ·研究的目的与意义第19-20页
2 研究的主要内容第20-37页
   ·试验材料第20-22页
     ·病料来源第20页
     ·实验动物第20页
     ·质粒及菌株第20页
     ·引物第20页
     ·主要试剂及抗体第20-21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·野鸽疱疹病毒的分离鉴定第22-27页
     ·临床病例的流行病学、临床症状及组织病理学观察第22页
     ·细菌分离培养第22页
     ·病毒分离培养第22-23页
     ·血凝试验第23页
     ·病毒鉴定第23-24页
     ·PCR检测第24-26页
     ·分离病毒的理化特性试验第26-27页
   ·肉鸽回归试验第27-28页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因的克隆第28-32页
     ·鸽疱疹病毒UL27基因保守序列的克隆第28页
     ·鸽疱疹病毒UL27基因上游PUL28-UL27序列的克隆第28-29页
     ·鸽疱疹病毒UL27基因下游UL27-PUL26序列的克隆第29-31页
     ·鸽疱疹病毒UL27基因序列拼接第31页
     ·鸽疱疹病毒UL27基因序列的校对第31-32页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因的序列分析第32页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因及其编码的gB蛋白的生物信息学分析第32页
     ·UL27基因的核苷酸序列同源性分析第32页
     ·UL27基因推导的氨基酸序列分析第32页
     ·gB蛋白的结构预测第32页
     ·gB蛋白的抗原性分析第32页
   ·鸽疱疹病毒gB蛋白主要抗原区域的原核表达、纯化及抗体制备第32-37页
     ·PCR扩增鸽疱疹病毒gB蛋白主要抗原区域及鉴定第32-34页
     ·主要抗原域蛋白pET28a-CoHV-gB的表达第34-35页
     ·主要抗原域蛋白pET28a-CoHV-gB包涵体纯化第35页
     ·重组蛋白pET28a-CoHV-gB的复性第35页
     ·兔抗CoHV-1-HLJ病毒粒子高免血清的制备第35-36页
     ·主要抗原区域表达产物的Western-Blotting分析第36-37页
3 实验结果第37-59页
   ·鸽疱疹病毒的分离鉴定结果第37-40页
     ·临床病例的流行病学、临床症状及组织病理学观察结果第37页
     ·细菌分离培养结果第37-38页
     ·病毒分离培养结果第38页
     ·血凝试验结果第38页
     ·病毒电镜结果第38-39页
     ·PCR检测及测序结果第39页
     ·理化特性试验结果第39-40页
   ·动物回归实验结果第40页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因保守序列的克隆结果第40-44页
     ·鸽疱疹病毒UL27基因序列克隆技术路线及引物第40-41页
     ·UL27基因保守序列的简并引物DP1和DP2设计第41-42页
     ·UL27基因保守序列PCR扩增、纯化及重组质粒PCR鉴定结果第42-43页
     ·UL27基因保守序列测定结果第43-44页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因上游PUL28-UL27序列的克隆结果第44-46页
     ·UL28基因内简并引物DP3设计第44页
     ·PUL28-UL27序列的PCR扩增、纯化及重组质粒PCR鉴定结果第44-45页
     ·UL27基因上游PUL28-UL27序列测定结果第45-46页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因下游UL27-PUL26序列的克隆结果第46-49页
     ·UL27基因下游UL27-PUL26序列的PCR扩增、纯化及重组质粒鉴定结果第46-47页
     ·UL27基因下游UL27-PUL26序列测定结果第47-49页
   ·鸽疱疹病毒UL27基因及其编码gB蛋白的生物信息学分析结果第49-56页
     ·UL27基因序列校对后ORF预测结果第49页
     ·UL27基因的核苷酸序列及其编码gB蛋白的氨基酸序列分析第49-51页
     ·UL27基因的核苷酸序列同源性分析第51-52页
     ·gB蛋白保守区分析结果第52页
     ·gB蛋白氨基酸序列同源性分析第52-53页
     ·gB蛋白氨基酸序列结构预测分析第53-56页
   ·鸽疱疹病毒gB蛋白主要抗原区域的表达第56-57页
     ·主要抗原区域的PCR扩增及表达载体的构建与鉴定第56-57页
     ·重组蛋白的诱导表达第57页
   ·兔抗CoHV-1-HLJ病毒粒子的多克隆抗体的效价测定第57-58页
   ·重组蛋白pET28a-CoHV-gB表达产物的Western Blot鉴定第58-59页
4 讨论第59-62页
   ·鸽疱疹病毒流行特点第59页
   ·鸽疱疹病毒的UL27基因克隆第59-60页
   ·鸽疱疹病毒的UL27基因及其编码的gB蛋白的分子特征第60-62页
结论第62-63页
参考文献第63-72页
附录第72-76页
攻读学位期间发表的学术论文第76-78页
致谢第78-80页

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