| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-4页 |
| 插图及附表清单 | 第4-5页 |
| 缩略语中英文对照表 | 第5-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-13页 |
| ·研究目的和意义 | 第9页 |
| ·产气荚膜梭菌研究进展 | 第9-13页 |
| ·产气荚膜梭菌生物学特性 | 第9-10页 |
| ·产气荚膜梭菌 β 毒素研究进展 | 第10-11页 |
| ·产气荚膜梭菌 ε 毒素研究进展 | 第11-12页 |
| ·产气荚膜梭菌疫苗研究进展 | 第12-13页 |
| 第二章 产气荚膜梭菌 β 毒素和 ε 毒素抗原表位分析 | 第13-16页 |
| ·方法 | 第13页 |
| ·结果 | 第13-15页 |
| ·讨论与小结 | 第15-16页 |
| 第三章 不同片段产气荚膜梭菌 ε 毒素与 β 毒素融合基因的构建表达 | 第16-41页 |
| ·材料 | 第16-19页 |
| ·菌株及质粒 | 第16页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第16-17页 |
| ·溶液的配制 | 第17-19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·B型产气荚膜梭菌（C58-2）基因组的提取 | 第19-20页 |
| ·融合基因的扩增 | 第20-23页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第23-26页 |
| ·重组菌的诱导表达及表达产物的鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白的Western blot分析 | 第27页 |
| ·重组蛋白毒性测定及毒素中和试验 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-39页 |
| ·β、β_(1~610)、β_(419~927)、ε、ε_(1~432)、ε_(430~889)扩增结果 | 第28-29页 |
| ·融合基因 ε_(1~432)-β_(1~610），β_(419~927)-ε_(430~889)， β-ε 扩增结果 | 第29-30页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第30-36页 |
| ·融合蛋白表达 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的Western blot分析结果 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白毒性测定结果 | 第39页 |
| ·讨论与小结 | 第39-41页 |
| ·关于目的基因的选取 | 第39页 |
| ·关于融合基因的构建 | 第39-40页 |
| ·关于表达载体的选择 | 第40页 |
| ·关于Western blot验证融合蛋白反应原性 | 第40页 |
| ·关于重组蛋白 β-ε 毒性试验结果 | 第40-41页 |
| 第四章 不同产气荚膜梭菌 β-ε 融合蛋白免疫原性试验 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·抗原 | 第41页 |
| ·佐剂 | 第41页 |
| ·毒素稀释液 | 第41页 |
| ·试验动物 | 第41-42页 |
| ·溶液配制 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·包涵体提取 | 第42页 |
| ·重组蛋白免疫程序 | 第42页 |
| ·血清中和 | 第42-43页 |
| ·家兔攻毒试验 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44页 |
| ·重组蛋白免疫后血清中和效价 | 第44页 |
| ·家兔攻毒结果 | 第44页 |
| ·讨论与小结 | 第44-47页 |
| ·包涵体提取 | 第44-45页 |
| ·血清中和效价分析 | 第45-46页 |
| ·攻毒保护分析 | 第46页 |
| ·保护性抗原片段选取 | 第46-47页 |
| 第五章 产气荚膜梭菌 ε_(1~432)-β 融合蛋白表达与免疫原性试验 | 第47-62页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·菌株及质粒 | 第47页 |
| ·抗原 | 第47页 |
| ·佐剂 | 第47页 |
| ·毒素稀释液 | 第47-48页 |
| ·试验动物 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-54页 |
| ·B型产气荚膜梭菌（C58-2）基因组的提取 | 第48页 |
| ·融合基因的扩增 | 第48-49页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第49-51页 |
| ·重组菌的诱导表达及表达产物的鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白的Western blot分析 | 第52页 |
| ·包涵体提取 | 第52页 |
| ·重组蛋白毒性测定 | 第52页 |
| ·重组蛋白免疫程序 | 第52页 |
| ·血清中和 | 第52-53页 |
| ·家兔攻毒试验 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-60页 |
| ·ε_(1~432)、β 片段扩增结果 | 第54页 |
| ·融合基因 ε_(1~432)-β 扩增结果 | 第54页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第54-58页 |
| ·重组菌的诱导表达鉴定结果 | 第58页 |
| ·重组蛋白的Western blot分析结果 | 第58-59页 |
| ·重组蛋白毒性测定结果 | 第59页 |
| ·重组蛋白免疫后血清中和效价 | 第59-60页 |
| ·家兔攻毒结果 | 第60页 |
| ·讨论与小结 | 第60-62页 |
| 第六章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附图 | 第70-75页 |
| 作者简历 | 第75-76页 |
