| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-20页 |
| ·南极极端环境 | 第16页 |
| ·海藻糖 | 第16-18页 |
| ·海藻糖简述 | 第16页 |
| ·海藻糖生物合成途径 | 第16-17页 |
| ·海藻糖功能 | 第17-18页 |
| ·海藻糖应用 | 第18页 |
| ·本论文拟采用的研究路线、目的和意义 | 第18-20页 |
| ·本论文拟采用的技术路线 | 第18页 |
| ·本论文研究目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 南极酵母Pseudozyma sp.JCC207基因组测序组装及分析 | 第20-46页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-24页 |
| ·基因组DNA准备 | 第20页 |
| ·基因组测序和组装 | 第20-22页 |
| ·质控分析 | 第22页 |
| ·基因组拼装完整性与连续性评估 | 第22-23页 |
| ·基因组初步分析 | 第23-24页 |
| ·海藻糖在南极酵母中的代谢途径及全基因组测序得到的TPS1、TPS2基因全长 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-44页 |
| ·基因组测序组装 | 第24-26页 |
| ·质控统计 | 第26-29页 |
| ·基因组拼装完整性与连续性评估 | 第29-30页 |
| ·基因组初步分析 | 第30-39页 |
| ·海藻糖在南极酵母中的代谢途径及全基因组测序得到的TPS1、TPS2基因全长 | 第39-44页 |
| ·讨论与小结 | 第44-46页 |
| 第三章 南极酵母Pseudozyma sp.JCC207 TPS1、TPS2基因克隆与生物信息学分析 | 第46-58页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·菌株 | 第46页 |
| ·试剂和培养基 | 第46-47页 |
| ·仪器及软件 | 第47页 |
| ·引物设计及合成 | 第47页 |
| ·试验方法 | 第47-49页 |
| ·南极酵母Pseudozyma sp.JCC207总RNA提取与鉴定 | 第47-48页 |
| ·cDNA第一联合成 | 第48页 |
| ·TPS1的PCR克隆 | 第48页 |
| ·目的片段回收 | 第48页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第48页 |
| ·连接转化 | 第48页 |
| ·挑取单克隆进行阳性检验 | 第48-49页 |
| ·TPS1、TPS2生物信息学分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-57页 |
| ·南极酵母Pseudozyma sp.JCC207总RNA提取鉴定 | 第49页 |
| ·TPS1基因片段的PCR扩增结果 | 第49-50页 |
| ·TPS1基因序列分析 | 第50-53页 |
| ·TPS2基因序列分析 | 第53-57页 |
| ·讨论与小结 | 第57-58页 |
| 第四章 南极酵母Pseudozyma sp.JCC207 TPS1表达调控 | 第58-62页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·菌株 | 第58页 |
| ·试剂和主要仪器 | 第58页 |
| ·试验方法 | 第58-59页 |
| ·定量引物设计 | 第58页 |
| ·数据处理 | 第58页 |
| ·酵母培养条件 | 第58-59页 |
| ·南极酵母总RNA提取及cDNA合成 | 第59页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-60页 |
| ·盐度对TPS1基因的转录调控 | 第59-60页 |
| ·温度对TPS1基因的转录调控 | 第60页 |
| ·讨论与小结 | 第60-62页 |
| 第五章 南极酵母Pseudozyma sp.JCC207 Pseudozyma sp.JCC207培养条件优化 | 第62-66页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·菌株 | 第62页 |
| ·试剂、培养基和仪器 | 第62页 |
| ·试验方法 | 第62-63页 |
| ·南极酵母Pseudozyma sp.JCC207摇瓶培养条件的单因素试验优化 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-65页 |
| ·酵母摇瓶培养条件的单因素考察 | 第63-65页 |
| ·讨论与小结 | 第65-66页 |
| 第六章 南极酵母Pseudozyma sp.JCC207海藻糖提取及提取条件优化及海藻糖保种功能比较 | 第66-77页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·菌株 | 第66页 |
| ·试剂与仪器 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-68页 |
| ·南极酵母培养及菌体制备 | 第66-67页 |
| ·海藻糖标准曲线的绘制 | 第67页 |
| ·三氯乙酸法提取海藻糖 | 第67页 |
| ·提取时间、提取溶剂的浓度和体积对海藻糖提取量的影响 | 第67页 |
| ·Box-Behnken响应面优化海藻糖提取的最佳工艺条件设计 | 第67页 |
| ·海藻糖保种功能比较 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-75页 |
| ·海藻糖标准曲线 | 第68页 |
| ·海藻糖提取的单因素实验 | 第68-70页 |
| ·RSM优化海藻糖提取量的工艺参数 | 第70页 |
| ·回归方程的建立和方差分析 | 第70-72页 |
| ·响应曲面和等高线图分析 | 第72-74页 |
| ·验证实验 | 第74页 |
| ·海藻糖保种功能的验证 | 第74-75页 |
| ·讨论与小结 | 第75-77页 |
| 第七章 总结与后续工作计划 | 第77-79页 |
| ·总结 | 第77-78页 |
| ·展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 硕士期间发表文章 | 第90-91页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第91页 |
