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草酸青霉木质纤维素降解酶系的解析及主要相关蛋白组分的功能研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-18页
符号说明第18-21页
第一章 前言第21-43页
   ·生物炼制第21-29页
     ·生物炼制的重要意义及产物多样化第21-23页
     ·植物纤维资源的复杂性第23-25页
     ·木质纤维原料的降解机制及预处理方法第25-26页
     ·生物燃料的国内外产业化进展第26-29页
   ·木质纤维素降解酶系第29-38页
     ·纤维素酶系统第29-30页
     ·半纤维素酶系统第30页
     ·纤维素酶生产用工业微生物第30-33页
     ·纤维素酶系的优化第33-37页
     ·纤维素酶的产业化生产现状第37-38页
   ·蛋白质组学的研究第38-41页
     ·蛋白质组学研究的意义第38-39页
     ·蛋白质组学研究的方法第39-40页
     ·木质纤维素降解酶系的组学研究第40-41页
   ·本论文的立题依据和研究内容第41-43页
第二章 草酸青霉木质纤维素酶系的优化第43-73页
   ·材料和方法第43-48页
     ·纤维素酶制剂第43-44页
     ·常用储备液第44-45页
     ·常用试剂与仪器第45页
     ·实验方法第45-48页
   ·结果与讨论第48-70页
     ·木糖渣的化学成分分析及糖化抑菌方式的选择第48-50页
     ·草酸青霉与里氏木霉产纤维素酶酶活的分析第50页
     ·草酸青霉与里氏木霉产纤维素酶对木糖渣的糖化差异第50-51页
     ·糖化过程中蛋白浓度及纤维素酶活的动态变化第51-55页
     ·BG的添加提升了草酸青霉木质纤维素降解酶系的糖化效率第55-57页
     ·草酸青霉纤维素降解酶系协同蛋白的寻找第57-70页
 本章小结第70-73页
第三章 蛋白质组学工具分析草酸青霉木质纤维素降解酶系第73-85页
   ·材料和方法第73-75页
     ·纤维素酶制剂第73页
     ·LC-MS/MS所用溶液第73-74页
     ·常用试剂与仪器第74页
     ·非标记定量质谱样品的制备方法第74-75页
   ·结果与讨论第75-83页
     ·GH家族种类及数量的差异第76-78页
     ·蛋白种类及含量的差异第78-80页
     ·糖化前后蛋白质组分的差异第80-81页
     ·碳水化合物结合模块种类及数量的差异第81-83页
 本章小结第83-85页
第四章 Cel5B和Cel7A-2的酶学性质及作用第85-101页
   ·材料和方法第85-89页
     ·菌株及培养条件第85-86页
     ·常用储备液第86页
     ·常用试剂与仪器第86页
     ·生物信息学分析第86页
     ·纤维素酶活力的测定方法第86页
     ·蛋白浓度的测定和SDS-PAGE分析第86-87页
     ·酶液的浓缩第87页
     ·蛋白的分离纯化第87-88页
     ·酶学性质分析第88页
     ·糖化添加实验第88-89页
   ·结果与讨论第89-100页
     ·Cel5B和Cel7A-2生物信息学分析第89-92页
     ·Cel5B和Cel7A-2的分离纯化第92-94页
     ·Cel5B和Cel7A-2的性质分析第94-97页
     ·Cel5B和Cel7A-2添加实验第97-100页
 本章小结第100-101页
第五章 Cu/Zn-SOD和膨胀素蛋白的功能研究第101-147页
   ·材料和方法第102-118页
     ·菌株及质粒培养条件第102页
     ·培养基第102-103页
     ·常用溶液、试剂及实验仪器第103-104页
     ·草酸青霉基因组DNA的提取第104-105页
     ·Cu/Zn-SOD及膨胀素蛋白敲除盒的构建第105-109页
     ·草酸青霉原生质体的制备与转化第109-112页
     ·SDS-PAGE的分析第112页
     ·胞外蛋白浓度与木质纤维素酶活力测定第112页
     ·质谱鉴定第112页
     ·膨胀素蛋白的本源表达及分离纯化第112-117页
     ·膨胀素蛋白过表达菌株的获得第117页
     ·突变菌株的表型分析第117页
     ·糖化添加实验第117-118页
   ·结果与讨论第118-146页
     ·Cu/Zn-SOD生物信息学的分析第118-120页
     ·Cu/Zn-SOD缺失对草酸青霉纤维素酶糖化的的影响第120-124页
     ·外源添加SOD对糖化的影响第124-125页
     ·膨胀素蛋白生物信息学的分析第125-131页
     ·膨胀素蛋白缺失对纤维素酶糖化的影响第131-138页
     ·草酸青霉Swo4蛋白的表达和性质分析第138-142页
     ·过表达Swo4对草酸青霉野生菌株木质纤维素酶合成的影响第142-146页
 本章小结第146-147页
论文创新性结果总结与展望第147-149页
参考文献第149-165页
攻读学位期间发表的学术论文第165-167页
致谢第167-169页
附录第169-199页
学位论文评阅及答辩情况表第199页

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