| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-24页 |
| ·驱动蛋白(Kinesin)的概述 | 第9-10页 |
| ·染色体驱动蛋白KIF4A的概述 | 第10-11页 |
| ·染色体驱动蛋白KIF4A的主要功能 | 第11-14页 |
| ·KIF4A在正常细胞有丝分裂中的作用 | 第11页 |
| ·KIF4A调控细胞骨架微管的动态不稳定性 | 第11-13页 |
| ·KIF4A在肿瘤形成中的作用 | 第13-14页 |
| ·Supervillin(SVIL)的发现与结构 | 第14-15页 |
| ·SVIL在肿瘤细胞侵袭过程中的作用 | 第15-19页 |
| ·黏着斑与SVIL | 第15-17页 |
| ·细胞伪足与SVIL | 第17-19页 |
| ·肿瘤转移概述 | 第19页 |
| ·肿瘤转移的过程 | 第19-20页 |
| ·肿瘤转移的影响因素 | 第20-21页 |
| ·细胞黏附因子 | 第20页 |
| ·血管形成 | 第20-21页 |
| ·蛋白降解酶 | 第21页 |
| ·胃癌及胃癌转移 | 第21页 |
| ·细胞迁移概述 | 第21-22页 |
| ·细胞迁移的过程 | 第22-24页 |
| ·局部细胞膜前伸形成伪足 | 第22页 |
| ·细胞伪足粘附到基底面 | 第22-23页 |
| ·细胞骨架的收缩 | 第23页 |
| ·细胞尾部脱粘附及回缩 | 第23-24页 |
| ·细胞侵袭 | 第24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-40页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·实验材料与细胞株 | 第24页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第24-28页 |
| ·实验方法 | 第28-40页 |
| ·细胞培养 | 第28页 |
| ·细胞冻存和复苏 | 第28-29页 |
| ·细胞转染实验 | 第29-30页 |
| ·SGC-790I细胞株内KIF4A蛋白表达水平检测 | 第30-32页 |
| ·稳筛细胞株的构建 | 第32-33页 |
| ·免疫荧光染色 | 第33-34页 |
| ·细胞迁移实验 | 第34-35页 |
| ·免疫共沉淀(IP)实验 | 第35-36页 |
| ·质粒构建实验 | 第36-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-59页 |
| ·KIF4A影响胃癌细胞迁移 | 第40-48页 |
| ·KIF4A低表达与过表达的SGC稳筛细胞株的构建与验证 | 第40-43页 |
| ·低表达KIF4A增强SGC细胞的迁移运动能力 | 第43-46页 |
| ·过表达KIF4A降低SGC细胞的迁移运动能力 | 第46-48页 |
| ·KIF4A影响胃癌细胞(SGC)的侵袭 | 第48-50页 |
| ·KIF4A与SVIL的关系研究 | 第50-59页 |
| ·SVIL过表达细胞株(SGC-SVIL)稳筛细胞株的构建与验证 | 第50-53页 |
| ·SGC-SVIL稳筛细胞株的外源GFP-SVIL与内源KIF4A结合 | 第53页 |
| ·KIF4A与SVIL在细胞内共定位 | 第53-55页 |
| ·内源KIF4A与外源的SVIL在胃癌细胞(SGC)中共定位 | 第53-55页 |
| ·内源SVIL与外源GFP-KIF4A在胃癌细胞(SGC)中共定位 | 第55页 |
| ·Flag-SVIL截短突变体的构建 | 第55-59页 |
| ·PCR引物设计 | 第55-56页 |
| ·目的片段及载体的制备 | 第56-58页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第58-59页 |
| ·连接后的质粒测序 | 第59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-63页 |
| ·稳筛细胞株构建及鉴定中的问题探讨 | 第59-61页 |
| ·稳筛细胞株构建中的问题 | 第59-61页 |
| ·稳筛细胞株鉴定中问题的探讨 | 第61页 |
| ·质粒构建过程中问题的探讨 | 第61-62页 |
| ·本课题进一步的实验思路探讨 | 第62-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
