| 附件 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| ·WNV分子生物学特性 | 第14-16页 |
| ·WNV物理特性及基因组结构 | 第14页 |
| ·WNV的结构蛋白的功能与特点 | 第14-15页 |
| ·WNV致病机理 | 第15-16页 |
| ·WNV免疫学特性 | 第16页 |
| ·WNV流行病学及防控 | 第16-19页 |
| ·WNV的流行病学及危害 | 第16-17页 |
| ·WNV的诊断方法 | 第17页 |
| ·WNV的治疗和疫苗研究 | 第17-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 WNV prM蛋白单克隆抗体（MAb）的制备 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第20-26页 |
| ·质粒、菌种、细胞及实验动物 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·WNV prM融合蛋白重组表达质粒的构建 | 第20页 |
| ·WNV prM蛋白的原核表达与鉴定 | 第20-21页 |
| ·WNV prM原核表达蛋白的纯化 | 第21页 |
| ·动物免疫 | 第21页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·脾细胞的制备 | 第22页 |
| ·细胞融合 | 第22页 |
| ·阳性单克隆细胞株的筛选 | 第22页 |
| ·间接ELISA试验 | 第22-23页 |
| ·单抗腹水的制备及抗体效价测定 | 第23页 |
| ·单抗亚类的鉴定 | 第23页 |
| ·单抗Western blot鉴定 | 第23页 |
| ·免疫组化试验（IPMA） | 第23-24页 |
| ·单抗表位初步筛选 | 第24-26页 |
| ·结果 | 第26-32页 |
| ·重组质粒pMAL-c5X-prM的构建 | 第26-27页 |
| ·原核表达产物的SDS-PAGE电泳分析结果 | 第27-28页 |
| ·WNV prM原核表达蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·WNV prM原核表达蛋白的Western blot鉴定 | 第28-29页 |
| ·10F7单克隆抗体上清及腹水ELISA效价检测 | 第29页 |
| ·10F7单克隆抗体亚型鉴定 | 第29-30页 |
| ·10F7单克隆抗体Western blot鉴定 | 第30页 |
| ·WNV 10F7单克隆抗体IPMA鉴定 | 第30-31页 |
| ·WNV 10F7单克隆抗体抗原表位初步筛选 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 WNV prM-E蛋白稳定表达细胞系的构建 | 第33-47页 |
| ·材料与方法 | 第33-39页 |
| ·质粒、病毒和细胞 | 第33页 |
| ·试剂和材料 | 第33页 |
| ·主要实验仪器 | 第33页 |
| ·转染质粒的制备 | 第33-34页 |
| ·转染 | 第34页 |
| ·转染细胞的筛选与克隆 | 第34页 |
| ·间接免疫荧光实验(IFA)鉴定 | 第34-35页 |
| ·抗原捕获ELISA（Ag-ELISA）检测 | 第35页 |
| ·Western blot鉴定 | 第35页 |
| ·病毒样颗粒(VLPs)的表达与纯化 | 第35-36页 |
| ·细胞表达目的蛋白稳定性检测 | 第36页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·流式细胞术鉴定 | 第37页 |
| ·IFA鉴定 | 第37页 |
| ·ELISA方法定量检测细胞培养上清中目的蛋白 | 第37-38页 |
| ·小鼠的免疫效果评价 | 第38页 |
| ·鹅的免疫效果评价 | 第38页 |
| ·血清ELISA效价的测定 | 第38-39页 |
| ·血清病毒中和抗体效价的测定 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-45页 |
| ·转染细胞的克隆筛选与IFA鉴定 | 第39-40页 |
| ·表达蛋白的Western blot鉴定 | 第40-41页 |
| ·W-92细胞表达目的蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| ·表达VLPs的电镜观察 | 第42-43页 |
| ·W-92细胞表达prM-E蛋白的稳定性检测 | 第43-44页 |
| ·免疫小鼠抗体水平及免疫保护率 | 第44-45页 |
| ·免疫鹅的抗体水平检测 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |
