CRISPR/Cas9基因组编辑系统的应用与靶蛋白REV1线粒体功能鉴定
| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第8-11页 |
| 1. 引言 | 第11-22页 |
| ·背景及意义 | 第11-20页 |
| ·基因组编辑系统概述 | 第11-13页 |
| ·CRISPR/Cas9的作用原理 | 第13-15页 |
| ·线粒体与线粒体疾病 | 第15-16页 |
| ·线粒体中存在DNA修复机制 | 第16-18页 |
| ·REV1是跨损伤合成(TLS)中的重要蛋白 | 第18-20页 |
| ·研究方案 | 第20-22页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| ·研究路线 | 第21页 |
| ·研究方法 | 第21-22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-50页 |
| ·实验材料 | 第22-27页 |
| ·实验方法 | 第27-50页 |
| ·MTS预测 | 第27-28页 |
| ·NES预测 | 第28页 |
| ·合成gRNA退火产物 | 第28-29页 |
| ·质粒构建 | 第29-33页 |
| ·细胞培养 | 第33-34页 |
| ·sgRNA活性鉴定 | 第34-38页 |
| ·构建基因敲除稳定细胞系 | 第38-43页 |
| ·蛋白表达鉴定 | 第43-47页 |
| ·差速离心提取线粒体 | 第47-48页 |
| ·ROS产量检测实验 | 第48-49页 |
| ·ATP水平检测实验 | 第49-50页 |
| 3. 结果分析 | 第50-60页 |
| ·REV1蛋白MTS及NES在线预测结果 | 第50页 |
| ·REV1与线粒体共定位 | 第50-51页 |
| ·针对REV1基因的sgRNA设计 | 第51-52页 |
| ·sgRNA活性检测 | 第52-54页 |
| ·REV1基因敲除细胞系筛选 | 第54-55页 |
| ·REV1基因敲除细胞系验证 | 第55-57页 |
| ·REV1对线粒体功能的影响 | 第57-60页 |
| 4. 结论 | 第60-61页 |
| ·成果总结 | 第60页 |
| ·创新点 | 第60-61页 |
| 5 参考文献 | 第61-68页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第68页 |
