论文创新点 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 引言 | 第16-27页 |
·DNA错配修复 | 第16-21页 |
·简介 | 第16-17页 |
·错配修复系统能改正生物合成中产生的错误 | 第17-21页 |
·真核细胞中的错配修复 | 第17-20页 |
·DNA错配修复和肿瘤 | 第20-21页 |
·DNA错配修复系统的应用 | 第21页 |
·烟草提取物 | 第21-23页 |
·砷 | 第23-25页 |
·丙烯醛 | 第25-27页 |
第二章 材料和方法 | 第27-62页 |
·构建T-G错配底物 | 第27-38页 |
·实验原理 | 第27页 |
·材料 | 第27-30页 |
·菌种和噬菌体 | 第27页 |
·酶及主要化学试剂 | 第27-28页 |
·主要溶液的配置 | 第28-30页 |
·实验仪器 | 第30页 |
·方法 | 第30-38页 |
·大肠杆菌XL1Blue菌株阳性检测 | 第30-31页 |
·培养单克隆XL1Blue菌 | 第31页 |
·噬菌体浓度测定 | 第31页 |
·噬菌体的鉴定 | 第31-32页 |
·噬菌体再扩大培养(50 ml培养基) | 第32-33页 |
·噬菌体再扩大培养(3 L培养基) | 第33页 |
·分离f1MR3噬菌体的双链DNA | 第33-34页 |
·分离f1MR1噬菌体单链DNA | 第34-35页 |
·同源双链分子和异源双链分子的准备 | 第35-36页 |
·HAP层析柱 | 第36页 |
·ExoV消化双链线性DNA | 第36-37页 |
·S-500层析柱 | 第37-38页 |
·细胞培养和细胞核蛋白的提取 | 第38-43页 |
·实验原理 | 第38页 |
·材料 | 第38-40页 |
·细胞 | 第38页 |
·主要化学试剂 | 第38页 |
·主要溶液的配置 | 第38-40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·细胞培养 | 第40-43页 |
·细胞复苏 | 第40-41页 |
·细胞传代 | 第41-42页 |
·细胞冻存 | 第42页 |
·抽提Hela细胞核抽提物 | 第42-43页 |
·DNA错配修复 | 第43-47页 |
·实验原理 | 第43页 |
·材料 | 第43-45页 |
·底物和核抽提物 | 第43-44页 |
·酶及主要化学试剂 | 第44页 |
·主要溶液配制 | 第44-45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·人类DNA错配修复检验方法 | 第45-46页 |
·反应 | 第45-46页 |
·平衡酚抽提 | 第46页 |
·乙醇沉淀 | 第46页 |
·酶切检测 | 第46页 |
·错配修复反应预期结果 | 第46-47页 |
·Southern Blot实验 | 第47-51页 |
·实验原理 | 第47页 |
·材料 | 第47-49页 |
·主要溶液配制 | 第48-49页 |
·主要仪器 | 第49页 |
·变性胶的配制 | 第49页 |
·变性胶电泳及转膜 | 第49-50页 |
·Southern杂交具体过程 | 第50-51页 |
·探针的标记 | 第50页 |
·探针杂交 | 第50-51页 |
·Western杂交 | 第51-55页 |
·实验原理 | 第51页 |
·材料 | 第51-53页 |
·主要溶液配制 | 第51-53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·跑胶转膜杂交 | 第53-55页 |
·配胶 | 第53-54页 |
·样品的制备 | 第54-55页 |
·跑胶转膜和杂交 | 第55页 |
·免疫沉淀反应 | 第55-56页 |
·实验原理 | 第55页 |
·材料 | 第55-56页 |
·主要溶液的配制 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·实验过程 | 第56页 |
·蛋白纯化 | 第56-62页 |
·实验原理 | 第56页 |
·主要仪器 | 第56-57页 |
·PCNA和P21C纯化 | 第57-58页 |
·溶液的配制 | 第57-58页 |
·实验过程 | 第58页 |
·MutSα和MutLα的纯化 | 第58-62页 |
·主要溶液的配制 | 第58-60页 |
·实验过程 | 第60-62页 |
第三章 实验结果和讨论 | 第62-83页 |
·烟草抽提物通过影响PCNA的功能而影响DNA错配修复 | 第62-66页 |
·烟草抽提物通过影响PCNA功能而影响DNA错配修复 | 第62-64页 |
·烟草提取物抑制PCNA在起始反应中的功能而抑制DNA错配修复 | 第64-65页 |
·烟草提取物抑制PCNA在合成反应中的作用 | 第65-66页 |
·砷通过PCNA磷酸化影响DNA错配修复功能 | 第66-74页 |
·砷在体内和体外都会抑制DNA错配修复功能 | 第66-67页 |
·砷通过影响PCNA的功能而抑制DNA错配修复功能 | 第67-68页 |
·砷抑制PCNA在起始反应中的作用 | 第68-69页 |
·砷通过影响PCNA在合成反应中的功能而延迟合成反应 | 第69-71页 |
·砷在体内或体外造成PCNA 211位点酪氨酸磷酸化 | 第71-72页 |
·砷通过影响PCNA磷酸化而影响肺癌细胞中的DNA错配修复 | 第72-74页 |
·烟草提取物可以与砷协同作用抑制DNA错配修复 | 第74-75页 |
·烟草提取物可以与砷协同作用抑制DNA错配修复 | 第74-75页 |
·烟草提取物可以与砷协同作用抑制DNA错配修复中的合成反应 | 第75页 |
·丙烯醛通过影响MutLα的功能影响DNA错配修复 | 第75-83页 |
·丙烯醛在体内和体外都抑制DNA错配修复 | 第75-76页 |
·丙烯醛通过影响MutLα功能而抑制DNA错配修复 | 第76-77页 |
·丙烯醛抑制MLH1在A549细胞体内表达 | 第77-78页 |
·丙烯醛造成MLH1交联 | 第78-79页 |
·质谱检测丙烯醛处理后的MutLα蛋白和细胞中的MutLα修饰 | 第79-83页 |
第四章 讨论 | 第83-87页 |
参考文献 | 第87-93页 |
科研成果 | 第93-94页 |
英文缩写对照表 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |