| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-44页 |
| ·课题研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| ·国内外在该方向的研究现状及分析 | 第17-42页 |
| ·表达序列标签（EST） | 第17-19页 |
| ·木霉在植物病虫害生物防治中的应用 | 第19-23页 |
| ·几丁质酶研究进展 | 第23-30页 |
| ·超氧化物歧化酶研究进展 | 第30-33页 |
| ·热激蛋白研究进展 | 第33-39页 |
| ·丝状真菌转基因研究进展 | 第39-42页 |
| ·目前生物防治菌哈茨木霉应用中存在的问题 | 第42-43页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第43-44页 |
| ·课题来源 | 第43页 |
| ·主要研究内容 | 第43-44页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第44-68页 |
| ·哈茨木霉功能基因真菌表达 | 第44-57页 |
| ·真菌表达载体与菌株 | 第44页 |
| ·真菌表达载体构建主要试剂 | 第44-47页 |
| ·真菌表达载体构建实验方法 | 第47-52页 |
| ·真菌转化实验方法 | 第52-56页 |
| ·T88 及其转化子对峙实验方法 | 第56-57页 |
| ·T88 及其转化子的逆境胁迫实验 | 第57页 |
| ·哈茨木霉功能基因原核表达及酵母表达 | 第57-68页 |
| ·原核表达载体与菌株及主要试剂 | 第57-58页 |
| ·超氧化物歧化酶基因（sod）原核表达材料与方法 | 第58-59页 |
| ·小热激蛋白基因（hsp24）原核表达材料与方法 | 第59页 |
| ·酵母表达载体与菌株 | 第59-60页 |
| ·酵母表达主要试剂及培养基 | 第60-61页 |
| ·表达载体pYES2-sod、pYES2-hsp24 构建 | 第61-62页 |
| ·重组表达载体酵母转化 | 第62-63页 |
| ·酵母转化子的鉴定 | 第63-67页 |
| ·转sod、hsp24 基因酵母逆境胁迫实验方法 | 第67-68页 |
| 第3章 哈茨木霉ChiⅤ基因在真菌中的表达研究 | 第68-86页 |
| ·表达载体 pCA-G ChiV 构建 | 第68-73页 |
| ·克隆载体pUC-GUS的构建 | 第68-70页 |
| ·中间载体pUC-GC的构建 | 第70-71页 |
| ·pUC18-G ChiⅤ的测序 | 第71-72页 |
| ·真菌表达载体pCA-G ChiⅤ的构建 | 第72-73页 |
| ·真菌转化实验 | 第73-78页 |
| ·转化前T88 对潮霉素的敏感性测定 | 第73页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第73页 |
| ·根癌农杆菌转化真菌影响因素分析 | 第73-76页 |
| ·转化pCA-G ChiⅤ及其初步鉴定 | 第76页 |
| ·转化子T-ChiⅤ的Southern blot分析 | 第76-77页 |
| ·转化子T- ChiⅤ的RT-PCR检测 | 第77页 |
| ·转化子T-ChiⅤ的传代分析结果 | 第77-78页 |
| ·对峙及胁迫实验 | 第78-83页 |
| ·T88 及转化子T- ChiⅤ对立枯丝核菌室内拮抗实验 | 第78-80页 |
| ·T88 及转化子T- ChiⅤ对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验 | 第80-81页 |
| ·T88 及转化子T- ChiⅤ和核盘菌室内拮抗实验 | 第81-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·真菌表达载体的选择 | 第83-84页 |
| ·真菌转化条件的优化 | 第84-85页 |
| ·几丁质酶的应用 | 第85页 |
| ·本章小结 | 第85-86页 |
| 第4章 哈茨木霉Sod基因在真菌中的表达研究 | 第86-107页 |
| ·sod真菌表达载体构建 | 第86-90页 |
| ·克隆载体pUC-GUS的构建 | 第86页 |
| ·中间载体pUC-GS的构建 | 第86-88页 |
| ·pUC18-GSOD的测序 | 第88-89页 |
| ·真菌表达载体pCA-GSOD的构建 | 第89-90页 |
| ·真菌转化实验 | 第90-92页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第90页 |
| ·转化pCA-GSOD及其转初步鉴定 | 第90页 |
| ·转化子T-SOD的Southern blot分析 | 第90-91页 |
| ·转化子T-SOD的RT-PCR检测 | 第91页 |
| ·转化子T-SOD的传代分析 | 第91-92页 |
| ·对峙及胁迫实验 | 第92-104页 |
| ·T88 及转化子T-SOD对立枯丝核菌室内拮抗实验 | 第92-94页 |
| ·T88 及转化子T-SOD对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验 | 第94-95页 |
| ·T88 及转化子T-SOD和核盘菌室内拮抗实验 | 第95-97页 |
| ·T88 及转化子T-SOD逆境胁迫及对峙实验 | 第97-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·逆境条件下的T-SOD转化子 | 第104-105页 |
| ·全长cDNA基因获取方法的选择 | 第105-106页 |
| ·本章小结 | 第106-107页 |
| 第5章 哈茨木霉菌功能基因原核及酵母表达研究 | 第107-133页 |
| ·超氧化物歧化酶基因的原核表达研究 | 第107-114页 |
| ·原核表达载体pET28-sod的构建 | 第107-109页 |
| ·原核表达质粒pET28-sod在大肠杆菌中的表达 | 第109-114页 |
| ·小热激蛋白基因的原核表达 | 第114-117页 |
| ·原核表达载体pET28-hsp24 的构建 | 第114-115页 |
| ·原核表达质粒pET28-hsp24 在大肠杆菌中的表达 | 第115-117页 |
| ·酿酒酵母生长曲线 | 第117-118页 |
| ·超氧化物歧化酶基因的酵母表达研究 | 第118-123页 |
| ·重组酵母表达载体pYES2-sod的构建 | 第118-120页 |
| ·sod基因酵母表达转录水平检测 | 第120-122页 |
| ·转基因酵母胁迫实验 | 第122-123页 |
| ·小热激蛋白基因的酵母表达 | 第123-129页 |
| ·重组酵母表达载体pYES2-hsp24 的构建 | 第123-126页 |
| ·hsp24 基因酵母表达转录水平检测 | 第126-127页 |
| ·转基因酵母胁迫实验 | 第127-129页 |
| ·原核表达及酵母表达的讨论 | 第129-132页 |
| ·原核表达过程中出现的问题及解决办法 | 第129页 |
| ·酵母转化子检测方法 | 第129-130页 |
| ·酵母总RNA提取方法改进 | 第130页 |
| ·酿酒酵母转化的影响因素分析 | 第130-131页 |
| ·转基因酵母逆境胁迫实验中碳源的选择原则 | 第131-132页 |
| ·本章小结 | 第132-133页 |
| 结论 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-148页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
| 个人简历 | 第151-153页 |
