| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语 | 第10-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-20页 |
| ·研究的背景及意义 | 第14页 |
| ·结核抗性基因及相关因子研究进展 | 第14-19页 |
| ·相关基因研究进展 | 第14-16页 |
| ·相关细胞因子、效应分子、及趋化因子研究进展 | 第16-19页 |
| ·展望 | 第19-20页 |
| 第二章 实验研究 | 第20-43页 |
| 实验一 Ipr1 基因的获取及原核表达载体的构建及表达 | 第20-32页 |
| 摘要 | 第20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·实验动物、载体及菌种 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-27页 |
| ·Ipr1 基因引物设计 | 第20-21页 |
| ·胸腺组织总 RNA 提取及反转录 | 第21-22页 |
| ·Ipr1 基因的扩增 | 第22页 |
| ·胶回收与连接 | 第22-23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23-24页 |
| ·克隆质粒 pMD18-T-Ipr1 的鉴定 | 第24-25页 |
| ·重新构建重组质粒 PMD18-T-Ipr1 | 第25-26页 |
| ·原核表达质粒 pET32a(+)-Ipr1 的构建 | 第26页 |
| ·原核表达质粒 pET32a(+)-Ipr1 在 E.coli 中的表达 | 第26页 |
| ·Ipr1 基因的序列测定及分析 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-30页 |
| ·胸腺组织总 RNA 的提取 | 第27页 |
| ·Ipr1 基因的 RT-PCR 扩增结果 | 第27页 |
| ·Ipr1 基因重组质粒菌液 PCR 鉴定 | 第27-28页 |
| ·pMDl8-T-Ipr1 基因重组质粒双酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·pET32a(+)-Ipr1 基因重组质粒双酶切图 | 第29页 |
| ·pET32a(+)-Ipr1 原核表达结果 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 实验二 真核表达载体 pEGFP- Ipr1 的构建及在巨噬细胞内的表达 | 第32-43页 |
| 摘要 | 第32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-38页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·质粒、菌株 | 第32页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·构建真核表达载体 pEGFP-Ipr1 | 第33-34页 |
| ·真核表达质粒 pEGFP-Ipr1 的鉴定 | 第34-35页 |
| ·真核表达质粒 pEGFP-Ipr1 转染小鼠腹腔巨噬细胞 | 第35-36页 |
| ·细胞的复苏和传代培养 | 第35页 |
| ·真核表达质粒 pEGFP-Ipr1 转染小鼠腹腔巨噬细胞 | 第35-36页 |
| ·小鼠巨噬细胞 RAW264.7 转染后的筛选 | 第36页 |
| ·pEGFP-Ipr1 转染小鼠腹腔巨噬细胞的鉴定 | 第36-38页 |
| ·pEGFP-Ipr1 转染小鼠腹腔巨噬细胞的 RT-PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·Ipr1 基因在小鼠腹腔巨噬细胞中表达产物的 Western blot 检测 | 第37-38页 |
| ·Ipr1 基因在小鼠腹腔巨噬细胞内的蛋白表达及定位 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-42页 |
| ·小鼠腹腔巨噬细胞株 RAW264.7 的培养 | 第38-39页 |
| ·真核表达质粒 pEGFP-Ipr1 的 PCR 鉴定 | 第39页 |
| ·真核表达质粒 pEGFP-Ipr1 的 PCR 鉴定酶切 | 第39-40页 |
| ·pEGFP-Ipr1 转染小鼠腹腔巨噬细胞的 RT-PCR 鉴定 | 第40页 |
| ·整合入真核表达载体的小鼠腹腔巨噬细胞 Western blot 检测结果 | 第40-41页 |
| ·荧光显微镜检测结果 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 全文总结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第54页 |
