| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 符号说明及缩略词 | 第17-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-41页 |
| ·真菌木质纤维素酶 | 第19-21页 |
| ·真菌纤维素酶系统 | 第20页 |
| ·半纤维素酶系统 | 第20-21页 |
| ·丝状真菌木质纤维素酶合成调控机制研究进展 | 第21-31页 |
| ·碳源对纤维素酶的诱导作用 | 第21-25页 |
| ·碳源信号途径对纤维素酶的调控作用 | 第25-27页 |
| ·木质纤维素酶的转录水平调控 | 第27-31页 |
| ·木质纤维素酶的分泌水平调控 | 第31页 |
| ·糖转运蛋白在丝状真菌木质纤维素酶合成调控中的作用 | 第31-39页 |
| ·MFS超家族 | 第32-33页 |
| ·MFS超家族蛋白三维结构 | 第33页 |
| ·MFS超家族蛋白结构预测 | 第33-34页 |
| ·MFS超家族蛋白底物转运机制 | 第34-35页 |
| ·MFS超家族蛋白在丝状真菌木质纤维素酶合成调控中的功能研究进展 | 第35-39页 |
| ·本论文的立题依据和研究内容 | 第39-41页 |
| 第二章 草酸青霉纤维寡糖转运蛋白的预测及其功能研究 | 第41-70页 |
| ·材料和方法 | 第41-52页 |
| ·菌株、载体及培养条件 | 第41-43页 |
| ·常用储备液 | 第43-44页 |
| ·常用试剂与仪器 | 第44页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白的预测 | 第44-45页 |
| ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| ·基因克隆与表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·大肠杆菌DH5α的转化 | 第47-48页 |
| ·酿酒酵母的转化 | 第48页 |
| ·酿酒酵母转化子的传代及重组菌株的PCR验证 | 第48-49页 |
| ·纤维糊精的制备 | 第49-50页 |
| ·菌株纤维二糖利用能力及残糖量的检测 | 第50页 |
| ·菌株纤维寡糖利用能力及残糖量的检测 | 第50-51页 |
| ·糖转运蛋白二级结构及三级结构的预测 | 第51页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白与乳糖透过酶序列的系统进化树分析 | 第51页 |
| ·草酸青霉纤维寡糖转运蛋白表达水平的测定 | 第51-52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-68页 |
| ·草酸青霉纤维寡糖转运蛋白的预测 | 第52-54页 |
| ·草酸青霉候选纤维寡糖转运蛋白在酿酒酵母中的异源表达 | 第54-58页 |
| ·酿酒酵母重组菌株对纤维二糖的利用能力 | 第58-60页 |
| ·酿酒酵母重组菌株对纤维糊精的利用能力 | 第60-61页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白二级结构与三级结构的预测 | 第61-63页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白与乳糖透过酶序列的系统进化分析 | 第63-64页 |
| ·碳源对草酸青霉纤维寡糖转运蛋白基因表达的影响 | 第64-68页 |
| 本章小结 | 第68-70页 |
| 第三章 纤维寡糖转运蛋白在纤维素降解及纤维素酶合成调控中的功能 | 第70-106页 |
| ·材料和方法 | 第70-80页 |
| ·菌株及培养条件 | 第70-71页 |
| ·常用储备液 | 第71-72页 |
| ·常用试剂与仪器 | 第72页 |
| ·草酸青霉基因组DNA的提取 | 第72-73页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白单缺失菌株敲除盒的构建 | 第73-75页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白双缺失和三缺失菌株敲除盒的构建 | 第75-76页 |
| ·原生质体的制备与转化 | 第76-77页 |
| ·转化子的传代和单敲除株的验证 | 第77页 |
| ·双敲除菌株和三敲除菌株的获得和验证 | 第77-78页 |
| ·突变菌株的表型分析 | 第78页 |
| ·突变菌株对纤维二糖利用能力的测定 | 第78页 |
| ·胞内总蛋白含量的测定 | 第78-79页 |
| ·胞外蛋白浓度与木质纤维素酶活力测定 | 第79页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白和木质纤维素酶基因表达水平的测定 | 第79-80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-104页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白单缺失对纤维素酶合成调控的影响 | 第80-89页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白双缺失对木质纤维素酶合成调控的影响 | 第89-98页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白三缺失菌株的构建及表型分析 | 第98-101页 |
| ·转录因子的敲除对纤维寡糖转运蛋白基因转录量的影响 | 第101-104页 |
| 本章小结 | 第104-106页 |
| 第四章 过表达纤维寡糖转运蛋白对草酸青霉木质纤维素酶合成调控的影响 | 第106-127页 |
| ·材料和方法 | 第106-110页 |
| ·菌株及培养条件 | 第106-107页 |
| ·常用溶液、试剂及仪器 | 第107页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白基因的克隆与表达载体的构建 | 第107-110页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白过表达菌株的获得和验证 | 第110页 |
| ·突变菌株对纤维二糖利用能力的测定 | 第110页 |
| ·胞外蛋白浓度与木质纤维素酶活力测定 | 第110页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白和木质纤维素酶基因表达水平的测定 | 第110页 |
| ·结果与讨论 | 第110-125页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白表达载体的构建 | 第110-113页 |
| ·过表达对草酸青霉野生菌株木质纤维素酶合成调控的影响 | 第113-118页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白影响纤维素酶调控模型构建 | 第118-120页 |
| ·过表达对Δbgl2木质纤维素酶合成调控的影响 | 第120-125页 |
| 本章小结 | 第125-127页 |
| 第五章 纤维寡糖转运蛋白在乳糖代谢中的作用 | 第127-139页 |
| ·材料和方法 | 第127-129页 |
| ·菌株及培养条件 | 第127页 |
| ·常用溶液、试剂及仪器 | 第127-128页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白单糖底物谱的鉴定方法 | 第128页 |
| ·乳糖培养条件下突变株的表型分析 | 第128页 |
| ·乳糖培养条件下缺失突变株生长量的测定 | 第128-129页 |
| ·缺失突变株对乳糖利用能力的测定 | 第129页 |
| ·胞外纤维素酶活力测定和SDS-PAGE分析 | 第129页 |
| ·胞外淀粉酶活力测定 | 第129页 |
| ·结果与讨论 | 第129-137页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白单糖底物谱的鉴定 | 第129-131页 |
| ·乳糖培养条件下纤维寡糖转运蛋白缺失菌株表型分析 | 第131页 |
| ·乳糖培养条件下纤维寡糖转运蛋白的缺失对菌株生长能力的影响 | 第131-132页 |
| ·纤维寡糖转运蛋白的缺失对菌株乳糖利用能力的影响 | 第132-134页 |
| ·乳糖培养条件下纤维寡糖转运蛋白缺失菌株胞外纤维素酶活力测定 | 第134-136页 |
| ·乳糖培养条件下突变株胞外淀粉酶活力的测定 | 第136-137页 |
| 本章小结 | 第137-139页 |
| 论文创新性结果总结与展望 | 第139-141页 |
| 参考文献 | 第141-159页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第159-161页 |
| 致谢 | 第161-163页 |
| 附件 | 第163-173页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第173页 |
