| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 VEGF转基因绒山羊生产性能测定及转基因绒山羊的鉴定 | 第13-38页 |
| 1 实验材料 | 第14-15页 |
| ·主要仪器设备 | 第14页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第14-15页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| 2 实验方法 | 第15-25页 |
| ·转基因绒山羊宏观产绒量检测 | 第15页 |
| ·转基因绒山羊耳尖成纤维细胞的制备 | 第15-17页 |
| ·转基因绒山羊原代耳尖成纤维细胞的分离培养 | 第15-16页 |
| ·转基因绒山羊耳尖成纤维细胞的传代、冻存与复苏培养 | 第16-17页 |
| ·转基因绒山羊耳尖成纤维细胞的传代培养 | 第16页 |
| ·转基因绒山羊耳尖成纤维细胞的冻存培养 | 第16页 |
| ·转基因绒山羊耳尖成纤维细胞的复苏培养 | 第16-17页 |
| ·PCR法对转基因绒山羊的鉴定 | 第17-19页 |
| ·细胞基因组DNA的提取 | 第17页 |
| ·转基因绒山羊耳尖成纤维细胞的PCR鉴定 | 第17-19页 |
| ·Southern blot对转基因绒山羊的鉴定 | 第19-24页 |
| ·皮肤组织基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
| ·探针的制备 | 第20-22页 |
| ·DNA的Southern杂交 | 第22-24页 |
| ·绝对定量PCR对转基因绒山羊拷贝数的检测 | 第24-25页 |
| ·绝对定量PCR标准品的制备 | 第24页 |
| ·绝对定量PCR标准曲线的制作 | 第24-25页 |
| ·Real time PCR对样品的检测 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-32页 |
| ·转基因绒山羊宏观产绒量检测结果 | 第25页 |
| ·PCR鉴定结果 | 第25-27页 |
| ·Southern blot鉴定结果 | 第27-29页 |
| ·探针制备结果 | 第27页 |
| ·探针标记效率的检测结果 | 第27-28页 |
| ·Southern blot结果 | 第28-29页 |
| ·绝对定量PCR检测结果 | 第29-32页 |
| ·绝对定量PCR标准曲线的制作结果 | 第29-31页 |
| ·Real time PCR对样品拷贝数的检测结果 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 第二章 VEGF转基因绒山羊目的基因表达的检测 | 第38-63页 |
| 1 实验材料 | 第39-41页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第39-40页 |
| ·实验液体的配制 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-48页 |
| ·Real time PCR对转基因绒山羊的检测 | 第41-43页 |
| ·皮肤组织总RNA的提取 | 第41页 |
| ·血液总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·Real time PCR检测VEGF的表达量 | 第42-43页 |
| ·Western blot对转基因绒山羊的检测 | 第43-45页 |
| ·皮肤组织蛋白质的提取 | 第43-44页 |
| ·血液组织蛋白质的提取 | 第44页 |
| ·Western blot检测VEGF的表达量 | 第44-45页 |
| ·石蜡切片对转基因绒山羊毛囊的检测 | 第45-47页 |
| ·转基因绒山羊皮肤的石蜡切片纵切 | 第46-47页 |
| ·免疫荧光染色法对毛囊蛋白表达量的检测 | 第47页 |
| ·冰冻切片对转基因绒山羊毛囊数的检测 | 第47-48页 |
| ·转基因绒山羊皮肤的冰冻切片横切 | 第48页 |
| ·HE染色法对皮肤毛囊数的检测 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-58页 |
| ·Real time PCR检测结果 | 第48-53页 |
| ·Real time PCR产物特异性检测 | 第48-51页 |
| ·Real time PCR对皮肤的检测结果 | 第51-52页 |
| ·Real time PCR对血液的检测结果 | 第52-53页 |
| ·Western blot检测结果 | 第53-54页 |
| ·Western blot对皮肤的检测结果 | 第53页 |
| ·Western blot对血液的检测结果 | 第53-54页 |
| ·免疫荧光染色对毛囊蛋白表达量的检测结果 | 第54-56页 |
| ·冰冻切片对毛囊数的检测结果 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 文献综述 | 第63-78页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间已发表学术论文 | 第79页 |
