小鼠支持细胞重编程为诱导多能干细胞的研究
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语中英文对照 | 第12-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-24页 |
| 第一章 体细胞重编程技术 | 第14-19页 |
| 1. 体细胞核移植介导的细胞重编程 | 第14-15页 |
| 2. 体细胞融合或共培养介导的体细胞重编程 | 第15页 |
| 3. iPS细胞重编程技术 | 第15-17页 |
| 4. 谱系重编程技术 | 第17-19页 |
| ·体内重编程 | 第17-18页 |
| ·体外重编程 | 第18页 |
| ·谱系重编程特征 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-24页 |
| 第二部分 试验研究 | 第24-82页 |
| 第一章 逆转录病毒载体的扩增与检测 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第24-28页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| 2 试验结果与分析 | 第28-30页 |
| ·获得单克隆最佳的接种体积 | 第28页 |
| ·逆转录病毒载体浓度和纯度鉴定 | 第28-29页 |
| ·逆转录病毒载体测序鉴定 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-34页 |
| 第二章 小鼠支持细胞的原代培养 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·试验材料 | 第34-35页 |
| ·试验方法 | 第35-39页 |
| 2 试验结果与分析 | 第39-40页 |
| ·支持细胞生物学特征 | 第39页 |
| ·支持细胞总RNA的完整性 | 第39页 |
| ·支持细胞PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 第三章 小鼠支持细胞重编程为iPS细胞 | 第44-58页 |
| 1 材料与方法 | 第44-49页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·试验方法 | 第45-49页 |
| 2 试验结果与分析 | 第49-55页 |
| ·原代培养MEF生物学特性 | 第49页 |
| ·逆转录病毒液的获取 | 第49-50页 |
| ·逆转录病毒液滴度测定 | 第50-51页 |
| ·病毒液感染支持细胞后支持细胞重编程变化过程 | 第51-53页 |
| ·重编程过程中荧光蛋白表达与沉默 | 第53-54页 |
| ·iPS细胞获得 | 第54-55页 |
| 3. 讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第四章 支持细胞来源的iPS细胞鉴定 | 第58-74页 |
| 1 材料与方法 | 第58-64页 |
| ·试验材料 | 第58-59页 |
| ·试验方法 | 第59-64页 |
| 2 试验结果与分析 | 第64-69页 |
| ·iPS细胞AKP活性分析 | 第64-65页 |
| ·iPS细胞核型分析 | 第65页 |
| ·iPS细胞的周期分布模式 | 第65-67页 |
| ·iPS细胞多能基因表达模式 | 第67-68页 |
| ·iPS细胞体外分化 | 第68页 |
| ·iPS细胞体内分化 | 第68-69页 |
| 3. 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第五章 低浓度NO维持iPS细胞自我更新及多能性 | 第74-82页 |
| 1 材料与方法 | 第74-76页 |
| ·试验材料 | 第74-75页 |
| ·试验方法 | 第75-76页 |
| 2 试验结果与分析 | 第76-79页 |
| ·多能基因Nanog表达水平分析 | 第76-78页 |
| ·多能基因Oct4表达水平分析 | 第78页 |
| ·多能基因Sox2表达水平分析 | 第78页 |
| ·抗凋亡基因Bcl2lll表达水平分析 | 第78页 |
| ·抗凋亡基因Bcl2表达水平分析 | 第78-79页 |
| ·促凋亡基因Bac表达水平分析 | 第79页 |
| ·促凋亡基因Bak1表达水平分析 | 第79页 |
| ·促凋亡基因Casp7表达水平分析 | 第79页 |
| 3. 讨论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 全文结论 | 第82-84页 |
| 创新点 | 第84-86页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
