| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-66页 |
| 第一节 球毛壳菌概述 | 第15-19页 |
| ·球毛壳菌形态特征 | 第15-17页 |
| ·球毛壳菌的研究价值 | 第17-18页 |
| ·球毛壳菌分子生物学研究进展 | 第18-19页 |
| 第二节 真菌次生代谢产物的研究进展 | 第19-28页 |
| ·真菌次生代谢与生长发育 | 第20-23页 |
| ·真菌次生代谢与信号传导通路 | 第23页 |
| ·调控次生代谢物生物合成的基因 | 第23-26页 |
| ·真菌次生代谢产物的多样性 | 第26-28页 |
| 第三节 真菌聚酮化合物和聚酮合酶研究进展 | 第28-40页 |
| ·真菌聚酮合酶分类 | 第29-30页 |
| ·真菌聚酮合酶的结构和特性 | 第30-32页 |
| ·真菌聚酮合酶的功能及参与的次生代谢物合成 | 第32-36页 |
| ·真菌PKS基因的功能分析方法 | 第36-38页 |
| ·球毛壳菌素 | 第38-40页 |
| 第四节 真菌G蛋白及其信号转导通路 | 第40-47页 |
| ·真菌G蛋白的结构和功能 | 第40-45页 |
| ·真菌G蛋白信号通路介导的生物学过程 | 第45-47页 |
| 第五节 真菌降解利用纤维素研究进展 | 第47-55页 |
| ·纤维素酶的组成及作用机理 | 第47-49页 |
| ·纤维素酶基因表达的调控 | 第49-53页 |
| ·真菌降解纤维素的功能基因组学研究 | 第53-54页 |
| ·纤维素酶的应用与发展趋势 | 第54-55页 |
| 第六节 真菌RNA干扰的研究进展 | 第55-64页 |
| ·RNA干扰的发现 | 第55-56页 |
| ·小RNA的分类 | 第56页 |
| ·真菌不同RNAi途径 | 第56-58页 |
| ·RNAi在真菌基因功能研究中的应用 | 第58-64页 |
| 第七节 研究目的和意义 | 第64-66页 |
| 第二章 球毛壳菌RNA干扰方法的建立 | 第66-111页 |
| 第一节 实验材料 | 第66-71页 |
| ·菌种 | 第66-67页 |
| ·质粒 | 第67-68页 |
| ·引物 | 第68页 |
| ·试剂 | 第68-70页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第70页 |
| ·实验仪器 | 第70-71页 |
| 第二节 实验方法 | 第71-89页 |
| ·沉默质粒的构建 | 第71-78页 |
| ·沉默质粒原生质体转化NK102 | 第78-80页 |
| ·转化子的筛选和鉴定 | 第80-84页 |
| ·转录水平基因表达分析 | 第84-89页 |
| 第三节 实验结果 | 第89-109页 |
| ·球毛壳菌NK102中PKS-1蛋白的生物信息学分析 | 第89-91页 |
| ·pks-1的表达量随时间梯度变化 | 第91-92页 |
| ·球毛壳菌黑色素合成通路的鉴定 | 第92-93页 |
| ·沉默质粒pPKS-1a和pPKS-1b的构建 | 第93-95页 |
| ·沉默质粒转化得到黑色素缺失转化子 | 第95-98页 |
| ·RNA干扰质粒在转化子中的存在状态 | 第98-102页 |
| ·用实时定量验证沉默转化子的pks-1基因的表达量 | 第102-106页 |
| ·pks-1沉默转化子的显微结构变化 | 第106-109页 |
| 第四节 讨论 | 第109-111页 |
| 第三章 球毛壳菌素生物合成分子机制的初步研究 | 第111-146页 |
| 第一节 实验材料 | 第111-116页 |
| ·菌种和质粒 | 第111页 |
| ·引物 | 第111-112页 |
| ·试剂 | 第112-114页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第114页 |
| ·实验仪器 | 第114-116页 |
| 第二节 实验方法 | 第116-122页 |
| ·沉默质粒的构建 | 第116-119页 |
| ·基因沉默转化子的获得 | 第119页 |
| ·转化子的筛选和鉴定 | 第119页 |
| ·转录水平基因表达分析 | 第119页 |
| ·发酵产物的检测 | 第119-120页 |
| ·发酵产物的鉴定 | 第120-122页 |
| 第三节 实验结果 | 第122-143页 |
| ·C.globosum NK102中ChA的鉴定和分离提纯 | 第122-124页 |
| ·PKS-1的基因沉默对球毛壳菌素生物合成的影响 | 第124-127页 |
| ·G蛋白GNA-1和PKA调节亚基PKAR的基因沉默 | 第127-139页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶HDAC的基因沉默 | 第139-143页 |
| 第四节 讨论 | 第143-146页 |
| 第四章 球毛壳菌纤维素酶系的研究 | 第146-169页 |
| 第一节 实验材料 | 第146-150页 |
| ·菌株和质粒 | 第146页 |
| ·引物 | 第146-147页 |
| ·试剂 | 第147-149页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第149页 |
| ·实验仪器 | 第149-150页 |
| 第二节 实验方法 | 第150-154页 |
| ·纤维素降解菌的鉴定 | 第150-151页 |
| ·纤维素酶活力测定 | 第151-152页 |
| ·纤维素基因的表达量测定 | 第152页 |
| ·RNA-Seq及数据分析 | 第152-154页 |
| 第三节 实验结果 | 第154-166页 |
| ·球毛壳菌NK102具有降解纤维素的能力 | 第154页 |
| ·球毛壳菌中纤维素酶分析及主要纤维素酶基因的差异表达谱 | 第154-156页 |
| ·不同碳源对纤维素酶基因表达和酶活性的影响 | 第156-159页 |
| ·光照对纤维素酶基因表达和酶活性的影响 | 第159页 |
| ·cAMP通路对NK102纤维素酶基因表达酶活性的调控 | 第159-166页 |
| 第四节 讨论 | 第166-169页 |
| 第五章 球毛壳菌对根结线虫的生物防治作用 | 第169-188页 |
| 第一节 实验材料 | 第170-171页 |
| ·菌种和线虫 | 第170页 |
| ·试剂 | 第170页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第170页 |
| ·实验仪器 | 第170-171页 |
| ·分析软件 | 第171页 |
| 第二节 实验方法 | 第171-176页 |
| ·南方根结线虫二龄幼虫(J2)的准备 | 第171页 |
| ·南方根结线虫卵准备 | 第171-172页 |
| ·球毛壳菌发酵液的准备和球毛壳菌素的提纯 | 第172页 |
| ·J2趋化性实验 | 第172-173页 |
| ·NK102发酵滤液和提纯ChA对J2的致死率 | 第173页 |
| ·NK102发酵滤液和提纯ChA对卵孵化的影响 | 第173-174页 |
| ·NK102发酵滤液和提纯ChA处理线虫后对其侵染根部的影响 | 第174-175页 |
| ·提纯ChA对线虫繁殖和植物的影响 | 第175-176页 |
| ·统计学分析方法 | 第176页 |
| 第三节 实验结果 | 第176-186页 |
| ·南方根结线虫的生活史观察 | 第176-178页 |
| ·NK102对二龄幼虫的趋避 | 第178-179页 |
| ·NK102发酵液和提纯ChA对J2的影响 | 第179-181页 |
| ·发酵液和提纯ChA对卵孵化的影响 | 第181-183页 |
| ·NK102发酵液和提纯ChA对线虫侵染的影响 | 第183-184页 |
| ·NK102发酵液和提纯ChA对线虫繁殖的影响 | 第184-186页 |
| 第四节 讨论 | 第186-188页 |
| 第六章 结论 | 第188-191页 |
| 参考文献 | 第191-213页 |
| 致谢 | 第213-214页 |
| 附录 常规溶液的配制 | 第214-226页 |
| 附录A 培养基 | 第214-218页 |
| 附录B 常用抗生素及药品类溶液 | 第218页 |
| 附录C 缓冲液和相关试剂的配制 | 第218-226页 |
| 个人简历、在学期间发表的论文与研究成果 | 第226页 |
