| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-32页 |
| ·荧光蛋白简介 | 第12-16页 |
| ·野生型绿色荧光蛋白简介 | 第12-13页 |
| ·野生型绿色荧光蛋白衍生体 | 第13-15页 |
| ·循环排列的荧光蛋白简介 | 第15-16页 |
| ·基于荧光蛋白的遗传编码传感器设计 | 第16-21页 |
| ·基于荧光蛋白的遗传编码传感器的设计模式 | 第16-19页 |
| ·识别元件的选择 | 第19页 |
| ·传感器优化-提高信噪比 | 第19-21页 |
| ·α-酮戊二酸代谢研究的相关背景 | 第21-27页 |
| ·α-酮戊二酸调控蓝细菌的氮源吸收 | 第21-23页 |
| ·α-酮戊二酸调控棕色固氮菌响应氮源限制 | 第23-24页 |
| ·高等植物中α-酮戊二酸的代谢 | 第24-27页 |
| ·遗传编码传感器成功应用于代谢分析简介 | 第27-30页 |
| ·胞内ATP水平的可视化 | 第27-28页 |
| ·传感器用于细胞内NADH(辅酶I)的检测 | 第28-29页 |
| ·氨基酸的光学检测 | 第29-30页 |
| ·研究的目的与思路 | 第30-32页 |
| 第2章 基于荧光共振能量转移的α-酮戊二酸传感器设计及研究 | 第32-78页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·实验原理 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第33-36页 |
| ·实验菌种 | 第33页 |
| ·实验试剂 | 第33-35页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·溶液的配制方法 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-61页 |
| ·gaf基因以及gaf-aaa+基因的克隆 | 第36-41页 |
| ·荧光蛋白基因yfp/cfp的克隆 | 第41-43页 |
| ·FRET传感器质粒构建 | 第43-49页 |
| ·传感器的优化 | 第49-57页 |
| ·检测分析方法 | 第57-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-77页 |
| ·gaf/gaf+基因的克隆及蛋白表达 | 第61-64页 |
| ·cfp/pET-28a(+)/BL21(DE3)和yfp/pET-28a(+)/BL21(DE3)的构建 | 第64页 |
| ·传感器表达菌种的建立 | 第64-66页 |
| ·传感器性质研究 | 第66-68页 |
| ·传感器优化 | 第68-70页 |
| ·结构域优化传感器的检测分析结果 | 第70-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 第3章 基于单个荧光蛋白的α-酮戊二酸传感器设计及研究 | 第78-110页 |
| ·引言 | 第78页 |
| ·实验原理 | 第78页 |
| ·实验材料 | 第78-82页 |
| ·实验菌种 | 第78-79页 |
| ·实验材料 | 第79-80页 |
| ·实验仪器 | 第80-81页 |
| ·培养基的配制方法 | 第81-82页 |
| ·实验方法 | 第82-99页 |
| ·带酶切位点的单荧光传感器设计 | 第82-88页 |
| ·结构域优化研究 | 第88-92页 |
| ·单荧光传感器定点突变 | 第92-99页 |
| ·传感器蛋白的性质分析 | 第99页 |
| ·结果与讨论 | 第99-109页 |
| ·带酶切位点的传感器基因片段PCR结果 | 第99-100页 |
| ·传感器结构域优化结果 | 第100-102页 |
| ·单荧光传感器定点突变结果 | 第102-103页 |
| ·传感器检测分析结果 | 第103-109页 |
| ·本章小结 | 第109-110页 |
| 第4章 基于荧光共振能量转移的信号分子传感器设计及研究 | 第110-125页 |
| ·引言 | 第110-113页 |
| ·群体感应简介 | 第110-111页 |
| ·海洋费氏弧菌中的群体感应系统 | 第111-113页 |
| ·实验原理 | 第113页 |
| ·实验材料 | 第113-115页 |
| ·菌株与质粒 | 第113页 |
| ·实验材料 | 第113-114页 |
| ·实验仪器 | 第114-115页 |
| ·培养基的配制方法 | 第115页 |
| ·实验方法 | 第115-118页 |
| ·传感器质粒构建 | 第115-117页 |
| ·Linker优化 | 第117-118页 |
| ·检测分析方法 | 第118页 |
| ·结果与讨论 | 第118-123页 |
| ·传感器质粒构建 | 第118页 |
| ·传感器性质检测结果 | 第118-120页 |
| ·传感器优化 | 第120-121页 |
| ·优化传感器检测分析结果 | 第121-123页 |
| ·本章小结 | 第123-125页 |
| 第5章 总结与展望 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-147页 |
| 附录 | 第147-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
