南荻抗逆相关NAC转录因子的克隆及功能鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| ·芒属植物简介 | 第12页 |
| ·逆境胁迫 | 第12-13页 |
| ·转录因子 | 第13-15页 |
| ·转录因子的特征及结构 | 第13-15页 |
| ·DNA结合区 | 第13-14页 |
| ·转录调控结构域 | 第14页 |
| ·转录抑制区 | 第14页 |
| ·核定位信号 | 第14页 |
| ·寡聚化位点 | 第14-15页 |
| ·抗逆相关转录因子研究进展 | 第15-24页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第15页 |
| ·MYB类转录因子 | 第15-16页 |
| ·AP2/EREBP类转录因子 | 第16-17页 |
| ·WRKY类转录因子 | 第17页 |
| ·bHLH转录因子 | 第17-18页 |
| ·NAC类转录因子 | 第18-24页 |
| ·NAC转录因子的结构特征和功能 | 第18-19页 |
| ·NAC基因的表达调控 | 第19-21页 |
| ·NAC转录因子在植物抗逆基因工程中的作用 | 第21-22页 |
| ·NAC在植物抗逆中的作用 | 第22-24页 |
| 第二章 南荻NAC转录因子的克隆及序列特征分析 | 第24-36页 |
| ·材料与方法 | 第24-31页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料、菌株、质粒及培养基 | 第24页 |
| ·工具酶及生化试剂 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-31页 |
| ·植物RNA提取、纯化和cDNA的合成 | 第25-27页 |
| ·RNA提取和纯化 | 第25-26页 |
| ·DNA消化 | 第26页 |
| ·cDNA合成 | 第26-27页 |
| ·MlNAC基因扩增 | 第27-31页 |
| ·DNA片段回收及定量 | 第28-29页 |
| ·目的DNA片段与载体DNA的连接 | 第29-30页 |
| ·序列分析及比对 | 第30页 |
| ·系统进化树的构建 | 第30-31页 |
| ·NAC保守结构域的鉴定 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·南荻11个NAC基因cDNA全长序列的获得 | 第31页 |
| ·序列特征 | 第31-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 南荻NAC转录因子的表达模式分析 | 第36-52页 |
| ·材料及方法 | 第36-38页 |
| ·实验材料及试剂 | 第36-37页 |
| ·材料种植与处理 | 第36页 |
| ·工具酶及生化试剂 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·RNA的提取、纯化和cDNA的合成 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-50页 |
| ·MlNAC基因在南荻不同组织表达模式分析 | 第38-40页 |
| ·MlNAC基因在不同胁迫条件下表达模式分析 | 第40-49页 |
| ·MlNAC基因在叶片中的表达模式分析 | 第40-48页 |
| ·MlNAC基因在根部的表达模式分析 | 第48-49页 |
| ·不同胁迫间的交叉效应 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 南荻NAC基因功能的初步鉴定 | 第52-65页 |
| ·材料与方法 | 第52-59页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·菌株、质粒、培养基及试剂 | 第52-54页 |
| ·菌株 | 第52页 |
| ·质粒 | 第52-53页 |
| ·培养基 | 第53-54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-59页 |
| ·细胞定位 | 第54-55页 |
| ·质粒DNA的制备和纯化 | 第54页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第54页 |
| ·根瘤农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第54-55页 |
| ·烟草叶片的瞬时表达及亚细胞定位分析 | 第55页 |
| ·转录活性分析 | 第55-58页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第56页 |
| ·LiAc介导的质粒向酵母细胞的小规模转化 | 第56-57页 |
| ·酵母单克隆的初步筛选 | 第57页 |
| ·酵母克隆的X-α-半乳糖甘酶活性分析 | 第57-58页 |
| ·过表达MlNAC2基因拟南芥的抗旱性分析 | 第58-59页 |
| ·MlNAC2基因过表达载体的构建 | 第58页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及重组质粒转化农杆菌 | 第58页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥花序转化法 | 第58页 |
| ·转基因拟南芥种子的筛选 | 第58页 |
| ·转基因植株的耐旱性鉴定 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-63页 |
| ·亚细胞定位 | 第59页 |
| ·酵母阳性克隆的筛选 | 第59-60页 |
| ·MlNAC基因的转录激活分析 | 第60-62页 |
| ·过表达MlNAC2基因拟南芥阳性苗筛选 | 第62-63页 |
| ·过表达MlNAC2基因拟南芥的抗旱性分析 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 缩略词 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简历 | 第76页 |