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南荻抗逆相关NAC转录因子的克隆及功能鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 前言第12-24页
   ·芒属植物简介第12页
   ·逆境胁迫第12-13页
   ·转录因子第13-15页
     ·转录因子的特征及结构第13-15页
       ·DNA结合区第13-14页
       ·转录调控结构域第14页
       ·转录抑制区第14页
       ·核定位信号第14页
       ·寡聚化位点第14-15页
   ·抗逆相关转录因子研究进展第15-24页
     ·bZIP类转录因子第15页
     ·MYB类转录因子第15-16页
     ·AP2/EREBP类转录因子第16-17页
     ·WRKY类转录因子第17页
     ·bHLH转录因子第17-18页
     ·NAC类转录因子第18-24页
       ·NAC转录因子的结构特征和功能第18-19页
       ·NAC基因的表达调控第19-21页
       ·NAC转录因子在植物抗逆基因工程中的作用第21-22页
       ·NAC在植物抗逆中的作用第22-24页
第二章 南荻NAC转录因子的克隆及序列特征分析第24-36页
   ·材料与方法第24-31页
     ·实验材料第24-25页
       ·植物材料、菌株、质粒及培养基第24页
       ·工具酶及生化试剂第24-25页
     ·方法第25-31页
       ·植物RNA提取、纯化和cDNA的合成第25-27页
         ·RNA提取和纯化第25-26页
         ·DNA消化第26页
         ·cDNA合成第26-27页
       ·MlNAC基因扩增第27-31页
         ·DNA片段回收及定量第28-29页
         ·目的DNA片段与载体DNA的连接第29-30页
         ·序列分析及比对第30页
         ·系统进化树的构建第30-31页
         ·NAC保守结构域的鉴定第31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·南荻11个NAC基因cDNA全长序列的获得第31页
     ·序列特征第31-35页
   ·讨论第35-36页
第三章 南荻NAC转录因子的表达模式分析第36-52页
   ·材料及方法第36-38页
     ·实验材料及试剂第36-37页
       ·材料种植与处理第36页
       ·工具酶及生化试剂第36-37页
     ·方法第37-38页
       ·RNA的提取、纯化和cDNA的合成第37页
       ·实时荧光定量PCR第37-38页
   ·结果与分析第38-50页
     ·MlNAC基因在南荻不同组织表达模式分析第38-40页
     ·MlNAC基因在不同胁迫条件下表达模式分析第40-49页
       ·MlNAC基因在叶片中的表达模式分析第40-48页
       ·MlNAC基因在根部的表达模式分析第48-49页
     ·不同胁迫间的交叉效应第49-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 南荻NAC基因功能的初步鉴定第52-65页
   ·材料与方法第52-59页
     ·植物材料第52页
     ·菌株、质粒、培养基及试剂第52-54页
       ·菌株第52页
       ·质粒第52-53页
       ·培养基第53-54页
       ·试剂第54页
     ·方法第54-59页
       ·细胞定位第54-55页
         ·质粒DNA的制备和纯化第54页
         ·植物表达载体的构建第54页
         ·根瘤农杆菌感受态细胞制备及转化第54-55页
         ·烟草叶片的瞬时表达及亚细胞定位分析第55页
       ·转录活性分析第55-58页
         ·酵母表达载体的构建第55-56页
         ·酵母感受态细胞的制备第56页
         ·LiAc介导的质粒向酵母细胞的小规模转化第56-57页
         ·酵母单克隆的初步筛选第57页
         ·酵母克隆的X-α-半乳糖甘酶活性分析第57-58页
       ·过表达MlNAC2基因拟南芥的抗旱性分析第58-59页
         ·MlNAC2基因过表达载体的构建第58页
         ·农杆菌感受态细胞的制备及重组质粒转化农杆菌第58页
         ·农杆菌介导的拟南芥花序转化法第58页
         ·转基因拟南芥种子的筛选第58页
         ·转基因植株的耐旱性鉴定第58-59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·亚细胞定位第59页
     ·酵母阳性克隆的筛选第59-60页
     ·MlNAC基因的转录激活分析第60-62页
     ·过表达MlNAC2基因拟南芥阳性苗筛选第62-63页
     ·过表达MlNAC2基因拟南芥的抗旱性分析第63页
   ·讨论第63-65页
全文总结第65-66页
参考文献第66-73页
缩略词第73-75页
致谢第75-76页
作者简历第76页

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