| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩略词 | 第15-16页 |
| 第一部分 用基因工程手段提高裂壶藻生长速度和脂肪酸含量 | 第16-68页 |
| 第一章 绪论 | 第16-34页 |
| ·裂壶藻 | 第16页 |
| ·裂壶藻生产二十二碳六烯酸(DHA) | 第16-30页 |
| ·DHA性质 | 第16-17页 |
| ·DHA生理功能 | 第17-20页 |
| ·DHA的应用 | 第20-22页 |
| ·DHA来源 | 第22页 |
| ·DHA替代资源 | 第22-24页 |
| ·DHA的合成途径 | 第24-27页 |
| ·用裂壶藻生产DHA的进展、优势、产量和安全性 | 第27-29页 |
| ·培养裂壶藻生产DHA的影响因素 | 第29-30页 |
| ·微藻的转基因研究 | 第30-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-48页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·藻种和细胞株 | 第34页 |
| ·质粒 | 第34页 |
| ·仪器与试剂 | 第34-37页 |
| ·试验方法 | 第37-46页 |
| ·研究的技术路线 | 第37页 |
| ·同源重组质粒构建 | 第37-40页 |
| ·电穿孔遗传转化裂壶藻 | 第40页 |
| ·基因整合的PCR检测 | 第40-41页 |
| ·Southern Blot检测 | 第41页 |
| ·半定量逆转录PCR(RT-PCR)分析 | 第41页 |
| ·蛋白提取、含量分析 | 第41页 |
| ·Western杂交检测 | 第41-42页 |
| ·葡萄糖和醋酸盐分析 | 第42-44页 |
| ·生物量和脂肪含量,DHA含量分析 | 第44-46页 |
| ·裂壶藻发酵罐培养 | 第46-48页 |
| ·发酵罐(5L)放大培养 | 第47页 |
| ·裂壶藻生物量测定 | 第47页 |
| ·总脂提取与DHA含量测定 | 第47-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-64页 |
| ·质粒构建 | 第48-56页 |
| ·外源(大肠杆菌ACS)基因导入裂壶藻的研究 | 第56-58页 |
| ·过表达ACS基因裂壶藻的生物学效应 | 第58-59页 |
| ·过表达大肠杆菌ACS基因裂壶藻转化子生物量和脂肪酸组成 | 第59-61页 |
| ·发酵罐培养结果 | 第61-64页 |
| 第四章 讨论 | 第64-68页 |
| ·转基因裂壶藻研究 | 第64-65页 |
| ·利用转基因裂壶藻生产DHA的研究 | 第65-66页 |
| ·结论与展望 | 第66-68页 |
| 第二部分 雨生红球藻遗传转化研究 | 第68-108页 |
| 第五章 绪论 | 第68-80页 |
| ·雨生红球藻 | 第68-69页 |
| ·雨生红球藻生产虾青素 | 第69-77页 |
| ·虾青素的性质 | 第69-70页 |
| ·虾青素的生理功能 | 第70-72页 |
| ·虾青素的应用 | 第72-73页 |
| ·天然虾青素安全性 | 第73-74页 |
| ·虾青素的不同来源 | 第74-76页 |
| ·利用雨生红球藻生产虾青素的研究进展 | 第76-77页 |
| ·雨生红球藻转基因研究 | 第77页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第77-80页 |
| 第六章 材料与方法 | 第80-92页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·仪器与试剂 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80-92页 |
| ·载体构建所用引物 | 第80-82页 |
| ·p3300Zeo/EGFP质粒构建 | 第82-83页 |
| ·p3300Zeo/Glut1/VHB构建 | 第83-85页 |
| ·pSV40Glut1/35sVHB/ubiBar质粒构建 | 第85-87页 |
| ·雨生红球藻藻种(株)及培养 | 第87-88页 |
| ·农杆菌介导的雨生红球藻转化 | 第88-89页 |
| ·雨生红球藻基因枪转化 | 第89-90页 |
| ·转化子鉴定 | 第90-92页 |
| 第七章 结果与讨论 | 第92-108页 |
| ·P3300ZEo/EGFP构建 | 第92-95页 |
| ·P3300ZEo/GLUT1/VHB构建 | 第95-99页 |
| ·PSV40GLUT1/35sVHB/UBIBAR质粒构建 | 第99-104页 |
| ·转化子的鉴定 | 第104-105页 |
| ·农杆菌介导法转化子的鉴定 | 第104-105页 |
| ·基因枪法转化子的鉴定 | 第105页 |
| ·讨论 | 第105-106页 |
| ·展望 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
| 附录 | 第124-125页 |
| 附件 | 第125-131页 |
