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拟态弧菌模拟表位的串联表达及其对草鱼的免疫应答研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
常用中英文缩略词第10-11页
文献综述第11-20页
引言第20-22页
1 材料与方法第22-32页
   ·实验菌株与质粒第22页
   ·酶类与主要试剂(盒)第22页
   ·实验动物与饲养第22-23页
   ·主要培养基和溶液配制第23-25页
     ·主要培养基的配制第23页
     ·感受态细胞制备及转化用溶液第23页
     ·SDS-PAGE电泳所需溶液第23-24页
     ·蛋白表达及提纯所需溶液第24-25页
     ·Western-Blot所用溶液第25页
   ·主要仪器第25-26页
   ·模拟表位串联基因的设计与合成第26页
   ·重组模拟表位串联肽r6EPIS的制备第26-28页
     ·重组质粒及表达质粒双酶切第26页
     ·目的基因与表达质粒的连接第26-27页
     ·连接产物的转化第27页
     ·重组表达质粒的鉴定第27页
     ·诱导表达第27页
     ·表达产物的鉴定第27-28页
     ·表达形式分析第28页
     ·重组蛋白的纯化第28页
   ·模拟表位串联肽诱导草鱼的免疫应答第28-31页
     ·免疫原制备第28-29页
     ·实验草鱼分组与免疫程序第29页
     ·组织样品的采集第29页
     ·血清样品的采集第29页
     ·免疫相关基因mRNA表达水平的检测第29-31页
   ·血清抗体水平测定第31页
   ·模拟表位串联肽对草鱼免疫保护性的测定第31-32页
     ·拟态弧菌安徽分离株LD50测定第31页
     ·免疫草鱼的攻毒保护性试验第31-32页
2 结果与分析第32-45页
   ·模拟表位串联基因的设计与合成第32-33页
   ·重组模拟表位串联肽r6EPIS的制备第33-35页
   ·荧光定量PCR反应体系与条件的优化第35-37页
   ·荧光定量PCR标准曲线的建立第37-38页
   ·草鱼免疫与攻毒后IgM的mRNA表达水平第38-40页
   ·草鱼免疫与攻毒后特异性抗体水平第40-41页
   ·草鱼免疫与攻毒后细胞因子的mRNA表达水平第41-43页
   ·拟态弧菌安徽分离株的LD50测定结果第43-44页
   ·模拟表位串联肽的免疫保护性第44-45页
3 讨论第45-48页
   ·表位选择与表位疫苗的设计第45-46页
   ·模拟表位串联肽6EPIS对草鱼IgM表达的影响第46页
   ·模拟表位串联肽6EPIS对草鱼细胞因子表达的影响第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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