摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
常用中英文缩略词 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-20页 |
引言 | 第20-22页 |
1 材料与方法 | 第22-32页 |
·实验菌株与质粒 | 第22页 |
·酶类与主要试剂(盒) | 第22页 |
·实验动物与饲养 | 第22-23页 |
·主要培养基和溶液配制 | 第23-25页 |
·主要培养基的配制 | 第23页 |
·感受态细胞制备及转化用溶液 | 第23页 |
·SDS-PAGE电泳所需溶液 | 第23-24页 |
·蛋白表达及提纯所需溶液 | 第24-25页 |
·Western-Blot所用溶液 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·模拟表位串联基因的设计与合成 | 第26页 |
·重组模拟表位串联肽r6EPIS的制备 | 第26-28页 |
·重组质粒及表达质粒双酶切 | 第26页 |
·目的基因与表达质粒的连接 | 第26-27页 |
·连接产物的转化 | 第27页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第27页 |
·诱导表达 | 第27页 |
·表达产物的鉴定 | 第27-28页 |
·表达形式分析 | 第28页 |
·重组蛋白的纯化 | 第28页 |
·模拟表位串联肽诱导草鱼的免疫应答 | 第28-31页 |
·免疫原制备 | 第28-29页 |
·实验草鱼分组与免疫程序 | 第29页 |
·组织样品的采集 | 第29页 |
·血清样品的采集 | 第29页 |
·免疫相关基因mRNA表达水平的检测 | 第29-31页 |
·血清抗体水平测定 | 第31页 |
·模拟表位串联肽对草鱼免疫保护性的测定 | 第31-32页 |
·拟态弧菌安徽分离株LD50测定 | 第31页 |
·免疫草鱼的攻毒保护性试验 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-45页 |
·模拟表位串联基因的设计与合成 | 第32-33页 |
·重组模拟表位串联肽r6EPIS的制备 | 第33-35页 |
·荧光定量PCR反应体系与条件的优化 | 第35-37页 |
·荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第37-38页 |
·草鱼免疫与攻毒后IgM的mRNA表达水平 | 第38-40页 |
·草鱼免疫与攻毒后特异性抗体水平 | 第40-41页 |
·草鱼免疫与攻毒后细胞因子的mRNA表达水平 | 第41-43页 |
·拟态弧菌安徽分离株的LD50测定结果 | 第43-44页 |
·模拟表位串联肽的免疫保护性 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-48页 |
·表位选择与表位疫苗的设计 | 第45-46页 |
·模拟表位串联肽6EPIS对草鱼IgM表达的影响 | 第46页 |
·模拟表位串联肽6EPIS对草鱼细胞因子表达的影响 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |