摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1章 绪论 | 第9-15页 |
·唾液酸化糖蛋白质组学研究背景及意义 | 第9-13页 |
·蛋白质唾液酸糖基化概况 | 第9-10页 |
·唾液酸分子简介 | 第10页 |
·生物质谱技术及其在唾液酸化糖蛋白/糖肽鉴定中的应用 | 第10-11页 |
·唾液酸化糖蛋白及糖肽富集技术研究进展 | 第11-13页 |
·本论文研究的主要内容及意义 | 第13-15页 |
第2章 二氧化钛富集唾液酸化糖肽方法优化考察 | 第15-25页 |
·仪器和试剂 | 第15页 |
·样本制备 | 第15-16页 |
·牛胎球蛋白肽段的制备 | 第15页 |
·C57BL/6J 小鼠脑组织蛋白提取与酶切肽段的制备 | 第15-16页 |
·实验方法 | 第16-18页 |
·二氧化钛微量萃取柱制备及富集方法建立 | 第16页 |
·去糖基化反应 | 第16-17页 |
·MALDI-TOF/MS 条件 | 第17页 |
·液相色谱质谱联用条件 | 第17页 |
·数据库检索条件 | 第17-18页 |
·生物信息学分析 | 第18页 |
·结果与讨论 | 第18-23页 |
·二氧化钛与样品质量比的考察 | 第18-19页 |
·C8 筛板对糖肽残留作用的考察 | 第19-20页 |
·鼠脑组织中唾液酸化糖蛋白质组分析 | 第20-23页 |
·本章小结 | 第23-25页 |
第3章 人血浆 N-唾液酸糖基化蛋白质组研究 | 第25-43页 |
·仪器和试剂 | 第25页 |
·样本制备 | 第25-27页 |
·健康人血浆去白蛋白和免疫球蛋白处理 | 第25-26页 |
·健康人血浆去 14 种高丰度蛋白处理 | 第26页 |
·血浆蛋白胰酶酶切肽段制备 | 第26页 |
·血浆蛋白 trypsin-Glu-C 酶切肽段制备 | 第26页 |
·血浆蛋白 Glu-C 酶切肽段制备 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-29页 |
·二氧化钛微量萃取柱富集血浆中 N-唾液酸化糖肽 | 第27页 |
·去糖基化反应 | 第27页 |
·碱性反相色谱预分离 | 第27-28页 |
·液相色谱质谱联用条件 | 第28页 |
·数据库检索条件 | 第28-29页 |
·生物信息学分析 | 第29页 |
·结果与讨论 | 第29-41页 |
·人血浆全蛋白酶切肽段经二氧化钛富集后富集效率及重复性考察 | 第29-31页 |
·多酶酶切方法与单一酶切方法的互补性考察 | 第31-33页 |
·高 pH 反相色谱预分离对人血浆中唾液酸化糖肽进行富集与鉴定 | 第33-35页 |
·去除 14 种高丰度蛋白后对血浆中唾液酸糖基化位点鉴定的影响 | 第35页 |
·健康人血浆中鉴定到的唾液酸化位点及蛋白的分析 | 第35-40页 |
·健康人血浆中鉴定到的唾液酸化蛋白在生物学通路中的分析 | 第40-41页 |
·本章小结 | 第41-43页 |
第4章 唾液酸化蛋白质组定量研究 | 第43-51页 |
·仪器和试剂 | 第43页 |
·样本制备 | 第43-44页 |
·血清去白蛋白和免疫球蛋白处理 | 第43页 |
·血清蛋白胰酶酶切肽段制备 | 第43页 |
·利用 iTRAQ 试剂对血清样本进行同位素标记 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-45页 |
·二氧化钛微量萃取柱对标记后血清样本进行富集 | 第44页 |
·去糖基化反应 | 第44页 |
·液相色谱质谱联用条件 | 第44-45页 |
·iTRAQ 定量数据库检索条件 | 第45页 |
·结果与讨论 | 第45-49页 |
·iTRAQ 结合 TiO2技术分析血清中差异蛋白策略的建立与评价 | 第45-47页 |
·肝癌患者与正常人血清样本差异蛋白分析 | 第47-49页 |
·本章小结 | 第49-51页 |
结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-83页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第83-85页 |
致谢 | 第85页 |