| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| ·细菌素的研究进展 | 第11-19页 |
| ·细菌素的发现及定义 | 第11-12页 |
| ·细菌素的命名及分类 | 第12-15页 |
| ·细菌素的分子生物学特性 | 第15-16页 |
| ·细菌素的作用机制 | 第16-17页 |
| ·细菌素与抗生素的区别 | 第17页 |
| ·细菌素的应用 | 第17-19页 |
| ·主要肠球菌素的介绍 | 第19-23页 |
| ·Class Ⅰ羊毛硫类肠球菌素—溶细胞素 | 第19-20页 |
| ·Class Ⅱa片球菌样肠球菌素—肠球菌素A、P | 第20页 |
| ·Class Ⅱb无前导肽的肠球菌素—肠球菌素L50、Q | 第20-21页 |
| ·Class Ⅱc线性非片球菌素样肠球菌素—肠球菌素B | 第21-22页 |
| ·Class Ⅱd环状肠球菌—肠球菌素AS-48 | 第22-23页 |
| 2 本研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-39页 |
| ·试验材料 | 第24-28页 |
| ·试验菌株及载体 | 第24-25页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第25-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-39页 |
| ·屎肠球菌HDRsEf1发酵液上清抑菌谱的试验 | 第28页 |
| ·肠球菌属菌体抑菌试验 | 第28页 |
| ·肠球菌素基因PCR的检测 | 第28-30页 |
| ·产细菌素菌株的表型鉴定 | 第30页 |
| ·产细菌素菌株的生长动力学测定 | 第30-31页 |
| ·细菌素基因位置的确定 | 第31-32页 |
| ·entL50基因片段的克隆 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·表达载体pET28a-L50A和pET28a-L50B的构建 | 第34-35页 |
| ·表达载体pET28a-L50A和pET28a-L50B的鉴定 | 第35页 |
| ·Ent.L50在大肠杆菌表达系统中的融合表达 | 第35-37页 |
| ·原核表达融合蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·融合肠球菌素蛋白抑菌活性的研究 | 第38-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-53页 |
| ·屎肠球菌HDRsEfl发酵液上清抑菌谱 | 第39页 |
| ·肠球菌属菌体抑菌结果 | 第39-40页 |
| ·肠球菌素分子生物学鉴定 | 第40-43页 |
| ·肠球菌肠球菌素的基因检测 | 第40-41页 |
| ·阳性肠球菌素基因PCR扩增及测序结果 | 第41页 |
| ·产细菌素菌株抑菌表型鉴定 | 第41-42页 |
| ·产细菌素菌株生长动力学曲线 | 第42-43页 |
| ·产细菌素菌株野生质粒的提取及质粒PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒pMD-L50的正确构建 | 第44-45页 |
| ·Ent.L50序列特征及其结构蛋白预测分析 | 第45-46页 |
| ·Ent.L50A和B蛋白理化性质分析 | 第45页 |
| ·Ent.L50A和B二级结构的模拟 | 第45-46页 |
| ·重组表达载体的正确构建 | 第46-47页 |
| ·重组菌诱导后生长曲线 | 第47页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析结果 | 第47-49页 |
| ·融合蛋白His-Ent.L50A、His-Ent.L50B的表达 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白His-Ent.L50A、His-Ent.L50B细胞定位 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白His-Ent.L50A、His-Ent.L50B的纯化 | 第49页 |
| ·表达产物的Westen blot鉴定 | 第49-50页 |
| ·表达产物抑菌活性鉴定 | 第50-53页 |
| ·His-Ent.L50抑菌活性及MIC、MBC测定 | 第50-51页 |
| ·His-Ent.L50抑菌谱测定 | 第51页 |
| ·His-Ent.L50对常见致病菌生长的影响 | 第51-53页 |
| 5 讨论 | 第53-57页 |
| ·肠球菌的抑菌作用 | 第53-54页 |
| ·肠球菌素基因的PCR检测 | 第54页 |
| ·Ent.L50基因序列特征 | 第54-55页 |
| ·Ent.L50蛋白结构与其功能的关系 | 第55页 |
| ·细菌素的异源表达 | 第55-56页 |
| ·细菌素抑菌作用 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
