| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·马铃薯晚疫病及其抗病分子机理 | 第10-13页 |
| ·马铃薯晚疫病及其危害 | 第10页 |
| ·马铃薯晚疫病菌 | 第10-11页 |
| ·马铃薯晚疫病抗性分子机理 | 第11-13页 |
| ·病毒诱导基因沉默现象与VIGS技术 | 第13-18页 |
| ·病毒诱导基因沉默的发现 | 第13页 |
| ·VIGS技术的原理与研究进展 | 第13-17页 |
| ·VIGS技术的优点与不足 | 第17-18页 |
| ·本课题的提出及研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·植物材料、晚疫病病原菌、菌株和质粒 | 第20页 |
| ·目标基因EST片段的选择与克隆 | 第20-22页 |
| ·瞬时干涉沉默载体构建 | 第22-25页 |
| ·质粒酶切及目标片段连接 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌热击感受态制备及转化 | 第23-24页 |
| ·载体酶切检测与测序 | 第24页 |
| ·农杆菌电击感受态细胞的制备及转化 | 第24-25页 |
| ·TRV病毒介导的VIGS瞬时沉默体系 | 第25页 |
| ·根癌农杆菌菌液制备 | 第25页 |
| ·TRV病毒介导VIGS根癌农杆菌注射法 | 第25页 |
| ·实验处理植株内源基因RT-PCR表达分析 | 第25页 |
| ·晚疫病原菌的繁殖与接种 | 第25-27页 |
| ·燕麦培养基配置与病原菌繁殖法 | 第25-26页 |
| ·病原菌块茎薄片繁殖法 | 第26页 |
| ·晚疫病接种鉴定方法 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-37页 |
| ·晚疫病水平抗性相关基因cDNA芯片中ESTs挑选结果 | 第27页 |
| ·目标基因片段扩增 | 第27-28页 |
| ·VIGS瞬时沉默载体的构建 | 第28-30页 |
| ·本氏烟草VIGS实验 | 第30-32页 |
| ·RT-PCR检测内源目标基因表达 | 第32-33页 |
| ·晚疫病抗性鉴定实验 | 第33-35页 |
| ·重要候选基因信息分析 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| ·影响目标基因沉默的VIGS实验因素 | 第37-38页 |
| ·目标片段大小与载体片段插入方向对VIGS实验的影响 | 第37页 |
| ·环境与苗龄对VIGS实验的影响 | 第37-38页 |
| ·利用VIGS技术在本氏烟草进行高通量基因功能鉴定 | 第38页 |
| ·马铃薯晚疫病水平抗性重要侯选基因 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录1 引物信息 | 第48-51页 |
| 附录2 TRV重组载体测序 | 第51-54页 |
| 附录3 2010年5月马铃薯基因病毒诱导沉默接种P.INFESTANS混合生理小种3天后病斑面积MM~2 | 第54-56页 |
| 附录4 2010年8月马铃薯基因病毒诱导沉默接种P.INFESTANS混合生理小种3天后病斑面积MM~2 | 第56-58页 |
| 附录5 2010年10月马铃薯基因病毒诱导沉默接种P.INFESTANS混合生理小种3天后病斑面积MM~2 | 第58-59页 |
