| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| ·羊草的生物学特征 | 第12-14页 |
| ·羊草的生态型分化特征 | 第12-13页 |
| ·两种生态型羊草差异表达蛋白研究 | 第13-14页 |
| ·差异表达蛋白及其编码基因功能分析 | 第14-16页 |
| ·甘油醛-3-磷酸脱氢酶 | 第14-15页 |
| ·NBS-LRR类抗病蛋白及基因 | 第15页 |
| ·3-磷酸甘油酸激酶 | 第15页 |
| ·核酮糖-1，5-二磷酸羧化/加氧酶 | 第15-16页 |
| ·植物GAPDH作用机制进展 | 第16-19页 |
| ·GAPDH的作用 | 第16-17页 |
| ·逆境胁迫下GAPDH的应答及机理 | 第17-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| ·本研究的技术路线及主要实验内容 | 第20-21页 |
| 第2章 两种生态型羊草差异蛋白基因转录分析 | 第21-40页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·酶及生化试剂 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-27页 |
| ·材料处理 | 第22页 |
| ·RNA提取及DNA消化 | 第22-23页 |
| ·RNA浓度的测定 | 第23页 |
| ·逆转录反应cDNA链的合成 | 第23页 |
| ·各目的基因保守序列的PCR扩增 | 第23-25页 |
| ·PCR扩增片段的胶回收与连接反应 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增片段的转化和鉴定 | 第26页 |
| ·菌种的保存及生物信息学分析 | 第26页 |
| ·基因表达分析及数据统计 | 第26-27页 |
| ·结果分析 | 第27-36页 |
| ·羊草总RNA的提取 | 第27页 |
| ·反转录cDNA序列扩增各目的基因保守区及测序分析 | 第27-31页 |
| ·半定量RT-PCR反应条件的优化 | 第31-32页 |
| ·不同生长时期两种生态型羊草目的基因的表达 | 第32-36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| ·两种生态型羊草LcGAPDH的表达 | 第36-37页 |
| ·两种生态型羊草LcPGK的表达 | 第37-38页 |
| ·两种生态型羊草LcNBS-LRR的表达 | 第38页 |
| ·两种生态型羊草LcrbcL的表达 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第3章 盐胁迫下两种生态型羊草差异蛋白基因转录分析 | 第40-52页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·主要试剂及药品配方 | 第40页 |
| ·引物 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-43页 |
| ·羊草的胁迫处理 | 第41页 |
| ·RNA的提取及DNA消化 | 第41页 |
| ·逆转录反应cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
| ·内参基因及差异表达蛋白基因的PCR反应 | 第42-43页 |
| ·数据统计与分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-49页 |
| ·盐胁迫下羊草总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·半定量RT-PCR反应条件的优化 | 第44-45页 |
| ·盐胁迫下羊草差异蛋白表达基因的半定量RT-PCR分析 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第4章 羊草GAPDH基因的克隆 | 第52-62页 |
| ·试验材料 | 第52-53页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·菌株及常用质粒载体 | 第52页 |
| ·酶及生化试剂 | 第52-53页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-56页 |
| ·总RNA的提取及DNA消化 | 第53页 |
| ·LcGAPDH保守序列的PCR扩增 | 第53页 |
| ·LcGAPDH基因3’末端的克隆 | 第53-54页 |
| ·LcGAPDH基因5’末端的克隆 | 第54-56页 |
| ·实验结果 | 第56-58页 |
| ·总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·LcGAPDH保守序列片段的克隆 | 第57页 |
| ·LcGAPDH基因3’末端片段的克隆 | 第57页 |
| ·LcGAPDH基因5’末端片段的克隆 | 第57-58页 |
| ·LcGAPDH基因全长核苷酸序列 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·SMARTerTMRACE克隆原理 | 第58-60页 |
| ·RNA提取 | 第60页 |
| ·引物设计 | 第60页 |
| ·5’RACEcDNA序列的克隆 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第5章 羊草GAPDH蛋白的生物信息学分析 | 第62-72页 |
| ·材料及方法 | 第62-63页 |
| ·LcGAPDH蛋白的性质与结构预测 | 第62-63页 |
| ·LcGAPDH的蛋白结构域、亚细胞定位及功能预测 | 第63页 |
| ·LcGAPDH蛋白同源序列分析及系统进化分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-69页 |
| ·LcGAPDH蛋白的性质与结构预测 | 第63-66页 |
| ·LcGAPDH蛋白同源序列、亚细胞定位及系统进化分析 | 第66-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
