| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-43页 |
| 1 Exosome与细胞外小泡体(EVs) | 第13-31页 |
| ·EVs的研究进展 | 第14-16页 |
| ·人类体液中的EVs | 第16-17页 |
| ·EVs的形成和分泌 | 第17-18页 |
| ·EVs的分离与鉴定 | 第18-19页 |
| ·细胞释放的小泡体的分类与特性 | 第19-25页 |
| ·EVs的功能 | 第25-29页 |
| ·人类医学中EVs的应用 | 第29-31页 |
| ·关于EVs研究存在的问题及未来发展方向 | 第31页 |
| 2 miRNA与免疫调控 | 第31-40页 |
| ·miRNA概况 | 第31-33页 |
| ·细胞外miRNA的发现 | 第33页 |
| ·细胞外miRNA的存在形式 | 第33-34页 |
| ·细胞释放miRNA的选择性 | 第34-36页 |
| ·细胞外miRNA的生物学功能 | 第36-38页 |
| ·乳汁中的miRNA与免疫调节 | 第38-40页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第40-43页 |
| 第二章 材料与方法 | 第43-58页 |
| 1 实验猪只和乳汁收集 | 第43页 |
| ·实验猪只的选择 | 第43页 |
| ·乳汁采样时间的确定 | 第43页 |
| ·乳汁的收集 | 第43页 |
| 2 乳汁exosome的AFM检测 | 第43-44页 |
| ·乳汁exosome的制备 | 第43-44页 |
| ·乳汁exosome的AFM检测 | 第44页 |
| 3 乳汁exosome中RNA的抽提和分析 | 第44-45页 |
| ·乳汁exosome中RNA的抽提 | 第44-45页 |
| ·乳汁exosome中RNA的质量分析 | 第45页 |
| 4 Small RNA测序及其功能与表达谱分析 | 第45-51页 |
| ·乳汁样品的分组和small RNA文库的构建 | 第45-46页 |
| ·Small RNA测序 | 第46页 |
| ·测序数据处理 | 第46-48页 |
| ·miRNA的预测和挖掘 | 第48-50页 |
| ·miRNA的表达特性和表达谱分析 | 第50-51页 |
| 5 各泌乳阶段特异性高丰度miRNAs表达水平的q-PCR定量检测 | 第51-53页 |
| ·q-PCR的检测方法 | 第51页 |
| ·miRNA的表达水平分析 | 第51-53页 |
| ·高丰度miRNAs在不同泌乳期乳汁中的表达量差异分析 | 第53页 |
| 6 猪乳汁exosome中miRNAs的稳定性分析 | 第53-55页 |
| ·极端环境条件处理 | 第53-54页 |
| ·miRNA表达水平的q-PCR定量检测 | 第54-55页 |
| ·统计分析和显著性检验 | 第55页 |
| 7 饲喂初乳和常乳对仔猪的影响 | 第55-58页 |
| ·实验仔猪的选择 | 第55页 |
| ·饲养实验 | 第55-56页 |
| ·血液代谢指标和miRNA表达量分析 | 第56-57页 |
| ·统计分析和显著性检验 | 第57-58页 |
| 第三章 结果与分析 | 第58-92页 |
| 1 猪乳汁中exosome的分离和检测 | 第58-59页 |
| ·乳汁exosome的制备 | 第58页 |
| ·乳汁exosome的AFM检测 | 第58-59页 |
| ·乳汁exosome的形态测定 | 第59页 |
| 2 猪乳汁exosome中RNA的抽提和分析 | 第59-60页 |
| ·猪乳汁exosome中RNA的抽提 | 第59-60页 |
| ·猪乳汁exosome中的RNA分析 | 第60页 |
| 3 猪乳汁exosome中miRNAs的分析鉴定 | 第60-83页 |
| ·猪乳汁exosome中small RNA文库的构建 | 第60-61页 |
| ·猪乳汁exosome中small RNA测序原始读数读取 | 第61-62页 |
| ·猪乳汁exosome small RNA文库的可定位读数的获取 | 第62-63页 |
| ·猪乳汁exosome中miRNA的鉴定和预测 | 第63-64页 |
| ·猪乳汁exosome中miRNA的同源性分析 | 第64-66页 |
| ·猪乳汁exosome中泌乳相关miRNA的表达谱和功能分析 | 第66-83页 |
| 4 Exosome中免疫相关miRNA在初乳和常乳间的表达差异 | 第83-87页 |
| 5 乳汁exosome来源miRNAs的抗降解能力和稳定性分析 | 第87-89页 |
| 6 免疫相关miRNAs在仅喂初乳和仅喂常乳仔猪血液中的表达差异 | 第89-92页 |
| ·饲喂初乳对仔猪血液代谢指标的影响 | 第89页 |
| ·饲喂初乳对仔猪血液中免疫相关miRNAs表达量的影响 | 第89-92页 |
| 第四章 讨论 | 第92-100页 |
| 1 关于猪乳汁exosome | 第92页 |
| 2 关于miRNA和猪乳汁exosome miRNAs | 第92-93页 |
| 3 相对基因芯片和q-PCR技术,高通量测序技术在mi RNAs挖掘研究中的前景与局限性 | 第93-95页 |
| 4 关于exosome miRNA直接通过乳汁经消化道由母体传递给仔猪 | 第95-96页 |
| 5 猪具有作为理想动物模型的优势 | 第96页 |
| 6 关于miR-148a功能的相关研究 | 第96-98页 |
| 7 乳汁中miRNA的筛选及其功能研究 | 第98-100页 |
| 第五章 结论 | 第100-102页 |
| 论文创新点 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 附录 | 第119-133页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第133页 |
