| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 1 绪论 | 第16-26页 |
| ·引言 | 第16-17页 |
| ·研究背景 | 第17-22页 |
| ·昆虫病原真菌的致病机制及研究进展 | 第17-20页 |
| ·丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 Snf1 的相关研究进展 | 第20-21页 |
| ·丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 Hog1 的相关研究进展 | 第21-22页 |
| ·立题依据及研究目的 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| ·本研究创新之处 | 第24-26页 |
| 2 绿僵菌 MaSnf1 的功能研究 | 第26-54页 |
| ·主要材料 | 第26-29页 |
| ·供试菌株和昆虫 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第27-28页 |
| ·主要设备 | 第28-29页 |
| ·主要方法 | 第29-39页 |
| ·真菌 RNA 的提取及反转录 | 第29-30页 |
| ·定量 PCR | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第30页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的转化 | 第30-31页 |
| ·真菌基因组的提取方法 | 第31页 |
| ·MaSnf1 基因 DNA 的序列比对及全长 cDNA 序列的获得 | 第31-32页 |
| ·MaSnf1 基因的生物信息学分析 | 第32页 |
| ·MaSnf1 基因敲除载体的构建 | 第32-34页 |
| ·农杆菌介导的绿僵菌的遗传转化 | 第34-35页 |
| ·MaSnf1 基因敲除突变菌株的筛选 | 第35-36页 |
| ·产孢量和萌发率的测定 | 第36-37页 |
| ·耐压力测定 | 第37页 |
| ·碳源利用 | 第37页 |
| ·毒力测试 | 第37-38页 |
| ·血淋巴中虫菌体的观察 | 第38页 |
| ·蝗虫后翅上孢子萌发率和附着胞形成率的测定 | 第38-39页 |
| ·绿僵菌中某些水解酶基因表达量的测定 | 第39页 |
| ·数据分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-50页 |
| ·MaSnf1 基因 cDNA 序列的克隆及序列分析 | 第39-40页 |
| ·MaSnf1 基因的生物信息学分析 | 第40-42页 |
| ·MaSnf1 敲除菌株和回复菌株的的载体构建及分子验证 | 第42-43页 |
| ·MaSnf1 与绿僵菌的产孢量和萌发有关 | 第43-44页 |
| ·MaSnf1 与绿僵菌的抗逆性有关 | 第44-45页 |
| ·MaSnf1 与绿僵菌碳源利用有关 | 第45-46页 |
| ·MaSnf1 缺失后降低了绿僵菌的毒力 | 第46-47页 |
| ·MaSnf1 影响绿僵菌在寄主血淋巴中的生长 | 第47-49页 |
| ·MaSnf1 影响绿僵菌在蝗虫后翅上的孢子萌发和附着胞形成 | 第49-50页 |
| ·MaSnf1 影响绿僵菌细胞壁水解酶基因的表达 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-54页 |
| ·MaSnf1 与绿僵菌的生长有关 | 第50-51页 |
| ·MaSnf1 影响绿僵菌的抗逆性 | 第51页 |
| ·MaSnf1 影响绿僵菌的碳源利用 | 第51页 |
| ·MaSnf1 影响绿僵菌毒力 | 第51-54页 |
| 3 绿僵菌 MaHog1 的功能研究 | 第54-66页 |
| ·主要材料 | 第54页 |
| ·供试菌株和昆虫 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第54页 |
| ·主要设备 | 第54页 |
| ·主要方法 | 第54-56页 |
| ·真菌 RNA 及反转录 | 第54页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第54页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的转化 | 第54页 |
| ·真菌基因组的提取方法 | 第54页 |
| ·MaHog1 基因 cDNA 的序列比对及全长 cDNA 序列的获得 | 第54页 |
| ·MaHog1 基因的生物信息学分析 | 第54-55页 |
| ·MaHog1 基因敲除载体的构建 | 第55页 |
| ·MaHog1 基因敲除突变菌株的筛选 | 第55页 |
| ·耐压力测定 | 第55页 |
| ·孢子萌发率、附着胞形成率和孢子疏水性的测定 | 第55-56页 |
| ·毒力测试 | 第56页 |
| ·血淋巴中虫菌体的观察 | 第56页 |
| ·数据分析 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-63页 |
| ·MaHog1 基因的 cDNA 序列的克隆及序列分析 | 第56页 |
| ·MaHog1 基因的生物信息学分析 | 第56-58页 |
| ·MaHog1 敲除菌株和回复菌株的的载体构建及分子验证 | 第58-59页 |
| ·MaHog1 与绿僵菌对于高渗、氧化应激和高温耐受性及细胞壁抑制剂敏感性有关 | 第59-61页 |
| ·MaHog1 缺失后降低了绿僵菌的毒力 | 第61页 |
| ·MaHog1 影响绿僵菌在寄主昆虫血淋巴中的生长 | 第61-62页 |
| ·MaHog1 影响绿僵菌在蝗虫后翅上的孢子萌发和附着胞形成 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| 4 主要结论及后续工作展望 | 第66-68页 |
| ·主要研究结论 | 第66页 |
| ·后续试验建议 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-84页 |
| 附录 | 第84-90页 |
| A.序列 | 第84-86页 |
| B.缩略词 | 第86-88页 |
| C.引物序列 | 第88-90页 |
| D.作者硕士学习期间发表论文目录 | 第90页 |
