| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·扁桃酸的概述 | 第8-11页 |
| ·扁桃酸的理化性质 | 第8页 |
| ·扁桃酸的应用 | 第8-9页 |
| ·扁桃酸的生产方法 | 第9-10页 |
| ·扁桃酸国内外研究进展 | 第10-11页 |
| ·扁桃酸的生物全合成途径 | 第11-12页 |
| ·对羟基扁桃酸合酶的概述 | 第12-14页 |
| ·对羟基扁桃酸合酶的简介 | 第12-13页 |
| ·对羟基扁桃酸合酶的催化特征 | 第13页 |
| ·对羟基扁桃酸合酶的分离纯化 | 第13-14页 |
| ·本课题的研究意义和主要内容 | 第14-16页 |
| ·研究意义 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-23页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·菌株和质粒 | 第16-17页 |
| ·引物 | 第17页 |
| ·工具酶与试剂 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-23页 |
| ·放线菌染色体基因组的提取 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌 JM109 感受态细胞的制备及转化 | 第19页 |
| ·常见分子克隆实验操作 | 第19页 |
| ·不同来源的 hmas 的克隆 | 第19-20页 |
| ·重组菌的诱导表达及功能验证 | 第20页 |
| ·酶活力的测定 | 第20页 |
| ·蛋白浓度测定及 SDS-PAGE 鉴定 | 第20-21页 |
| ·重组对羟基扁桃酸合酶的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·重组对羟基扁桃酸合酶的催化性质分析 | 第22页 |
| ·重组菌的发酵试验 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-46页 |
| ·不同来源的 hmas 的克隆 | 第23页 |
| ·重组菌大肠杆菌表达质粒的构建 | 第23-27页 |
| ·重组质粒 pETHmaS 的构建 | 第23-25页 |
| ·重组质粒 pETHmaS1 的构建 | 第25-26页 |
| ·重组质粒 pETHmaS2 的构建 | 第26-27页 |
| ·重组菌的诱导表达及功能验证 | 第27-28页 |
| ·重组对羟基扁桃酸合酶的分离纯化 | 第28-35页 |
| ·HmaSAO的分离纯化 | 第28-31页 |
| ·HmaSSC1 的分离纯化 | 第31-33页 |
| ·HmaSSC2 的分离纯化 | 第33-35页 |
| ·不同来源的重组对羟基扁桃酸合酶的比酶活比较 | 第35页 |
| ·重组对羟基扁桃酸合酶的催化性质分析 | 第35-41页 |
| ·HmaSAO的催化特性分析 | 第35-37页 |
| ·HmaSSC1 的催化特性分析 | 第37-39页 |
| ·HmaSSC2 的催化特性分析 | 第39-41页 |
| ·不同来源的对羟基扁桃酸合酶催化特性分析比较 | 第41页 |
| ·重组质粒pR15ABKHmaS2的构建 | 第41-43页 |
| ·hmaS2 的克隆 | 第41-42页 |
| ·重组质粒 pR15ABKHmaS2 的构建 | 第42-43页 |
| ·重组菌E. coli W3110/pR15ABKHmaS2的发酵试验 | 第43-46页 |
| ·重组菌的摇瓶发酵试验 | 第43-44页 |
| ·重组菌的上罐发酵试验 | 第44-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52-53页 |
| 附录 A：多序列比对结果 | 第53页 |