中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
英文缩略词 | 第15-16页 |
文献综述 | 第16-24页 |
1、Eph/ ephrin的结构和分类 | 第16-17页 |
2、EphB4/印hrinB2及相关研究概述 | 第17-19页 |
3、EphB4/ephrinB2双向信号与血管生成的关系 | 第19页 |
4、中医药在血管新生方面的应用 | 第19-20页 |
5、展望 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-24页 |
前言 | 第24-27页 |
实验内容 | 第27-38页 |
1 实验材料 | 第27-30页 |
·细胞株来源 | 第27页 |
·实验药物 | 第27页 |
·细胞培养耗材 | 第27页 |
·主要实验设备、仪器 | 第27-28页 |
·主要试剂 | 第28-30页 |
·细胞培养试剂 | 第28页 |
·体外成血管实验主要试剂 | 第28-29页 |
·实时荧光定量PCR主要试剂 | 第29页 |
·Western Blot主要试剂 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-38页 |
·含药血清的制备 | 第30页 |
·细胞培养 | 第30-31页 |
·培养基的配制 | 第30页 |
·细胞的常规培养 | 第30-31页 |
·体外成血管实验 | 第31-32页 |
·细胞接种和同步化 | 第31页 |
·细胞分组和给药 | 第31-32页 |
·细胞给药后处理 | 第32页 |
·实时定量PCR | 第32-35页 |
·细胞接种和同步化处理 | 第32-33页 |
·Trizol法提取RNA | 第33页 |
·逆转录反应 | 第33页 |
·引物设计与合成 | 第33-34页 |
·Real Time PCR反应(总体系20ul) | 第34-35页 |
·应用2-~(△△CT)相对定量法评价基因表达情况 | 第35页 |
·Western Blot蛋白印迹 | 第35-37页 |
·细胞接种和同步化处理 | 第35页 |
·蛋白样品的制备 | 第35页 |
·BCA法蛋白定量 | 第35-36页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第36页 |
·转膜(湿转) | 第36页 |
·免疫反应 | 第36-37页 |
·化学发光显影 | 第37页 |
·加入信号刺激剂后的体外成血管实验 | 第37页 |
·反向信号激活剂作用下体外成血管实验 | 第37页 |
·反向信号抑制剂作用下体外成血管实验 | 第37页 |
·数据分析 | 第37-38页 |
实验结果 | 第38-44页 |
1、体外成血管实验结果(最佳药物作用条件的确定) | 第38-39页 |
2 血府逐瘀汤对EphB4/eprhrinB2的影响 | 第39-41页 |
·血府逐瘀汤对eprhrinB2/EphB4基因转录的影响 | 第39-40页 |
·血府逐瘀汤对eprhrinB2蛋白水平的影响 | 第40页 |
·血府逐瘀汤对eprhrinB2蛋白磷酸化状态的影响 | 第40-41页 |
3 反向信号对体外成血管能力的影响结果 | 第41-44页 |
·反向信号激活剂对血管生长的影响 | 第41-42页 |
·反向信号抑制剂对血管生长的影响 | 第42-44页 |
讨论与分析 | 第44-48页 |
1、EphB4/ephrinB2及反向信号与血管生成 | 第44-45页 |
2、血府逐瘀汤与血管新生 | 第45-46页 |
3、血府逐瘀汤与EphB4/ephrinB2 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
附图 | 第49-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
致谢 | 第58页 |