| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-18页 |
| ·人抗癌基因P53 的研究进展 | 第9-10页 |
| ·人抗癌基因P53 的结构 | 第9页 |
| ·P53 蛋白的结构及生物学功能 | 第9-10页 |
| ·标记基因——增强型绿色荧光蛋白 | 第10-11页 |
| ·转基因动物的研究进展 | 第11-12页 |
| ·转基因技术的研究及应用 | 第12-13页 |
| ·生产器官移植的器官 | 第12页 |
| ·改良动物品种及其生产性能 | 第12页 |
| ·增强动物的抗病的能力 | 第12页 |
| ·提供人类研究遗传病的动物模型 | 第12-13页 |
| ·作为乳腺生物反应器生产药用蛋白 | 第13页 |
| ·转基因鸡的研究进展 | 第13-14页 |
| ·转基因鸡的常用制备方法 | 第14-16页 |
| ·胚胎干细胞-嵌合体法 | 第14页 |
| ·胚盘显微注射法 | 第14-15页 |
| ·原始生殖细胞介导法 | 第15页 |
| ·精子载体法 | 第15-16页 |
| ·慢病毒介导法 | 第16页 |
| ·逆转录病毒载体法 | 第16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第2章 RT-PCR 克隆人抗癌基因 P53 | 第18-22页 |
| ·试验材料 | 第18页 |
| ·试验仪器 | 第18页 |
| ·试验相关试剂 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-20页 |
| ·PCR 引物设计 | 第18页 |
| ·人外周血总RNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·人抗癌基因P53 的克隆 | 第19页 |
| ·人抗癌基因p53 的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第19-20页 |
| ·人抗癌基因P53 的回收纯化 | 第20页 |
| ·试验结果 | 第20-22页 |
| 第3章 pMD18-T-P53 扩增载体的构建 | 第22-28页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·试验仪器 | 第22页 |
| ·试验酶类及其他相关试剂 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-26页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第23页 |
| ·pMD18-T-P53 扩增载体的构建的构建流程（图3-2） | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备（CaC1_2 法） | 第23-24页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P53 的构建 | 第24-25页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P53 的鉴定 | 第25-26页 |
| ·试验结果 | 第26-28页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P53 的PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P53 的酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P53 的测序鉴定 | 第27-28页 |
| 第4章 pEGFP-N1-P53 表达载体的构建 | 第28-36页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·试验仪器 | 第28-29页 |
| ·试验酶类及其他相关试剂 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-33页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的构建流程 | 第29页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的构建 | 第29-32页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的鉴定 | 第32-33页 |
| ·试验结果 | 第33-35页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的PCR 鉴定 | 第33页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的酶切鉴 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的测序鉴定 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第5章 pEGFP-N1-P53 转染鸡胚成纤维细胞 | 第36-40页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·试验主要试剂 | 第36页 |
| ·试验主要仪器 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-38页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-P53 的单酶切消化 | 第36-38页 |
| ·鸡胚成纤维细胞培养 | 第38页 |
| ·转染液的配制 | 第38页 |
| ·鸡胚成纤维细胞转染 | 第38页 |
| ·试验结果 | 第38-39页 |
| ·结果分析 | 第39-40页 |
| 第6章 pEGFP-N1-P53 在鸡胚盘内的转染及检测 | 第40-50页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·试验主要试剂 | 第41页 |
| ·试验主要仪器 | 第41-42页 |
| ·不同封口方式对孵化率的影响 | 第42-44页 |
| ·蛋壳膜的制备 | 第42页 |
| ·种蛋的预孵化处理 | 第42页 |
| ·种蛋的开口 | 第42页 |
| ·种蛋的封口 | 第42页 |
| ·孵化条件 | 第42页 |
| ·孵化结果 | 第42-44页 |
| ·鸡胚盘内的转染及检测 | 第44-46页 |
| ·重组质粒 pEGFP-N1-P53 的单酶切消化 | 第44-45页 |
| ·转染液的配置 | 第45页 |
| ·胚盘显微注射 | 第45页 |
| ·转染效果的检测 | 第45-46页 |
| ·试验结果 | 第46-47页 |
| ·孵化结果 | 第46页 |
| ·荧光检测结果 | 第46-47页 |
| ·PCR 检测结果 | 第47页 |
| ·存活鸡的检测 | 第47页 |
| ·结果分析 | 第47-50页 |
| 第7章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附表A 缩略语词汇表 | 第56-57页 |
| 附表B 主要溶液及配制方法 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第60页 |
