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转基因油菜W-4高油酸性状遗传及T-DNA整合位点分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-31页
 1 前言第11-20页
   ·油菜主要脂肪酸组成遗传改良研究第11-18页
     ·油菜主要脂肪酸组成改良第11-12页
     ·油菜脂肪酸生物合成第12-14页
     ·脂肪酸合成过程中的关键酶第14-15页
     ·脂肪酸改良主要途径第15-17页
     ·油菜油酸育种方法及成果第17-18页
   ·油料作物主要脂肪酸遗传第18-20页
     ·芥酸含量的遗传第18页
     ·油酸含量的遗传第18-19页
     ·油酸含量的遗传第19页
     ·麻酸含量的遗传第19-20页
     ·廿碳烯酸含量的遗传第20页
 2 基因表达研究第20-25页
   ·Northern杂交第20页
   ·半定量RT-PCR第20-21页
   ·实时荧光定量PCR第21-23页
     ·荧光定量PCR反应原理第21-22页
     ·实时荧光定量PCR的几个概念第22页
     ·荧光定量PCR方法第22-23页
   ·实时荧光定量PCR的应用第23-25页
     ·目标基因的检测或诊断第23-24页
     ·基因表达差异分析第24页
     ·转基因成分检测第24-25页
 3 T-DNA旁侧序列的分离方法及应用第25-30页
   ·T-DNA旁侧序列的分离方法第25-29页
     ·热不对称交错PCR(TAIL-PCR)第25-26页
     ·反向PCR(I-PCR)第26-27页
     ·锚定PCR(anchored PCR)第27-29页
   ·T-DNA旁侧序列的应用第29-30页
 4 本研究目的与意义第30-31页
第二章 甘蓝型油菜转fad2基因W-4高油酸性状遗传分析第31-39页
 1 材料与方法第31-32页
   ·材料第31页
   ·方法第31-32页
     ·种子脂肪酸组成测定第31-32页
     ·适合度测定第32页
     ·油菜幼苗kan抗性检测第32页
 2 结果与分析第32-36页
   ·转基因品系W-4高油酸性状稳定性分析第32-33页
   ·转基因品系W-4高油酸性状的遗传第33-35页
     ·亲本脂肪酸组成比较第33页
     ·W-4高油酸性状的遗传第33-35页
   ·六个世代群体卡那霉素抗性检测第35-36页
 3 讨论第36-39页
第三章 RNAi干扰转基因油菜fad2基因表达种子特异性分析第39-47页
 1 材料与方法第39-40页
   ·试验材料第39页
   ·实验方法第39-40页
     ·RNA提取与纯化第39页
     ·基因表达量分析第39-40页
     ·脂肪酸组成分析方法第40页
 2 结果与分析第40-43页
   ·发育种子中fad2基因相对表达量第40-41页
   ·发育种子中napin蛋白基因相对表达量第41页
   ·根、茎、叶fad2基因相对表达量第41-42页
   ·成熟种子及越冬期植株根、茎、叶脂肪酸组成第42-43页
 3 讨论第43-47页
第四章 转基因油菜W-4T-DNA旁侧序列的扩增与分析第47-55页
 1 材料与方法第47-48页
   ·材料第47页
   ·DNA提取第47页
   ·Tai-PCR第47-48页
 2 结果分析第48-53页
   ·T-DNA插入位点旁侧序列的分离及分析第48-51页
     ·旁侧序列的分离第48页
     ·右边界扩增产物序列分析第48-49页
     ·左边界扩增产物序列分析第49-50页
     ·旁侧序列的验证第50-51页
     ·左、右边界碱基组成第51页
   ·W-4转化事件特异性检测及灵敏度检测第51-53页
     ·PCR特异性检测第51-52页
     ·PCR扩增灵敏度验证第52-53页
 3 讨论第53-55页
第五章 全文结论与创新点第55-57页
 全文结论第55页
 本文创新点第55-57页
参考文献第57-67页
附录第67-71页
致谢第71页

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