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溶藻弧菌Ⅲ型分泌系统分子伴侣护航蛋白VscO的功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 文献综述第12-21页
   ·溶藻弧菌研究进展第12-20页
     ·粘附系统第13-14页
     ·胞外产物第14-15页
     ·脂多糖第15页
     ·摄铁机制第15-16页
     ·群体感应系统第16-17页
     ·三型分泌系统第17-20页
   ·本研究的技术路线第20页
   ·本研究的目的意义第20-21页
2 分子伴侣护航蛋白 VscO 的基因克隆和缺失株构建第21-40页
   ·实验材料第21-23页
     ·菌株第21页
     ·质粒第21页
     ·实验仪器第21-22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要溶液和试剂的配制第22-23页
     ·生物信息学分析所用软件第23页
   ·实验方法第23-33页
     ·溶藻弧菌 HY9901 vscO 基因的克隆第23-26页
     ·溶藻弧菌 HY9901 vscO 基因缺失株的构建第26-33页
   ·结果与分析第33-38页
     ·vscO 基因的克隆第33-36页
     ·vscO 基因缺失株的构建第36-38页
   ·讨论第38-40页
3 分子伴侣护航蛋白 VscO 的功能研究第40-49页
   ·实验材料第40-41页
     ·菌株第40页
     ·实验动物第40页
     ·实验仪器第40页
     ·主要试剂第40-41页
   ·实验方法第41-43页
     ·突变株的遗传稳定性检验第41页
     ·生长曲线测定第41页
     ·细菌泳动实验第41页
     ·生物膜检测第41-42页
     ·胞外蛋白酶活性检测第42页
     ·半致死率(LD50)检测第42-43页
     ·实时荧光定量 PCR第43页
   ·结果与分析第43-47页
     ·突变株的遗传稳定性检验第43-44页
     ·生长曲线第44页
     ·泳动能力第44-45页
     ·生物膜第45页
     ·胞外蛋白酶活性第45-46页
     ·LD50第46页
     ·mRNA 表达差异第46-47页
   ·讨论第47-49页
4 VscO 蛋白的免疫原性和免疫保护性分析第49-57页
   ·实验材料第49-50页
     ·菌株和质粒第49页
     ·实验仪器第49页
     ·主要试剂和溶液第49页
     ·实验动物第49-50页
   ·实验方法第50-52页
     ·vscO 基因的原核表达第50-51页
     ·VscO 蛋白的免疫原性分析第51页
     ·VscO 蛋白对斜带石斑鱼的免疫保护第51-52页
   ·结果与分析第52-56页
     ·vscO 基因的原核表达第52-54页
     ·vscO 基因的免疫原性分析第54-55页
     ·血清效价变化分析第55页
     ·VscO 蛋白对斜带石斑鱼的免疫保护性分析第55-56页
   ·讨论第56-57页
5 vscO 基因在不同环境条件下的表达差异第57-63页
   ·实验材料第57页
     ·菌株第57页
     ·实验仪器第57页
     ·主要试剂第57页
   ·实验方法第57-59页
     ·溶藻弧菌 vscO 基因在不同生长时期的表达第57页
     ·溶藻弧菌 vscO 基因在不同环境因子下的表达第57-58页
     ·总 RNA 的提取和引物设计第58页
     ·平台期的确定第58页
     ·RT-PCR 反应检测第58-59页
   ·结果与分析第59-61页
     ·半定量 RT-PCR 平台期的确定第59页
     ·不同生长阶段 vscO 基因的表达第59-60页
     ·不同环境因子下 vscO 基因的表达第60-61页
   ·讨论第61-63页
6 结论第63-64页
   ·溶藻弧菌分子伴侣护航蛋白 VscO 缺失株的构建第63页
   ·溶藻弧菌分子伴侣护航蛋白 VscO 的免疫保护分析第63页
   ·不同生长时期、不同环境因子下分子伴侣护航蛋白 VscO 的表达第63-64页
参考文献第64-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-73页
导师简介第73页

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