| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-21页 |
| ·溶藻弧菌研究进展 | 第12-20页 |
| ·粘附系统 | 第13-14页 |
| ·胞外产物 | 第14-15页 |
| ·脂多糖 | 第15页 |
| ·摄铁机制 | 第15-16页 |
| ·群体感应系统 | 第16-17页 |
| ·三型分泌系统 | 第17-20页 |
| ·本研究的技术路线 | 第20页 |
| ·本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 2 分子伴侣护航蛋白 VscO 的基因克隆和缺失株构建 | 第21-40页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·生物信息学分析所用软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·溶藻弧菌 HY9901 vscO 基因的克隆 | 第23-26页 |
| ·溶藻弧菌 HY9901 vscO 基因缺失株的构建 | 第26-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·vscO 基因的克隆 | 第33-36页 |
| ·vscO 基因缺失株的构建 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 3 分子伴侣护航蛋白 VscO 的功能研究 | 第40-49页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·突变株的遗传稳定性检验 | 第41页 |
| ·生长曲线测定 | 第41页 |
| ·细菌泳动实验 | 第41页 |
| ·生物膜检测 | 第41-42页 |
| ·胞外蛋白酶活性检测 | 第42页 |
| ·半致死率(LD50)检测 | 第42-43页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·突变株的遗传稳定性检验 | 第43-44页 |
| ·生长曲线 | 第44页 |
| ·泳动能力 | 第44-45页 |
| ·生物膜 | 第45页 |
| ·胞外蛋白酶活性 | 第45-46页 |
| ·LD50 | 第46页 |
| ·mRNA 表达差异 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 4 VscO 蛋白的免疫原性和免疫保护性分析 | 第49-57页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第49页 |
| ·实验动物 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·vscO 基因的原核表达 | 第50-51页 |
| ·VscO 蛋白的免疫原性分析 | 第51页 |
| ·VscO 蛋白对斜带石斑鱼的免疫保护 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·vscO 基因的原核表达 | 第52-54页 |
| ·vscO 基因的免疫原性分析 | 第54-55页 |
| ·血清效价变化分析 | 第55页 |
| ·VscO 蛋白对斜带石斑鱼的免疫保护性分析 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 5 vscO 基因在不同环境条件下的表达差异 | 第57-63页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·菌株 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·溶藻弧菌 vscO 基因在不同生长时期的表达 | 第57页 |
| ·溶藻弧菌 vscO 基因在不同环境因子下的表达 | 第57-58页 |
| ·总 RNA 的提取和引物设计 | 第58页 |
| ·平台期的确定 | 第58页 |
| ·RT-PCR 反应检测 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-61页 |
| ·半定量 RT-PCR 平台期的确定 | 第59页 |
| ·不同生长阶段 vscO 基因的表达 | 第59-60页 |
| ·不同环境因子下 vscO 基因的表达 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 6 结论 | 第63-64页 |
| ·溶藻弧菌分子伴侣护航蛋白 VscO 缺失株的构建 | 第63页 |
| ·溶藻弧菌分子伴侣护航蛋白 VscO 的免疫保护分析 | 第63页 |
| ·不同生长时期、不同环境因子下分子伴侣护航蛋白 VscO 的表达 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72-73页 |
| 导师简介 | 第73页 |