| 提要 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-32页 |
| ·真菌免疫调节蛋白国内外研究进展 | 第16-23页 |
| ·国内外对真菌免疫调节蛋白概述 | 第16-17页 |
| ·四种真菌免疫调节蛋白国内外研究现状 | 第17-20页 |
| ·国内外对真菌免疫调节蛋白药理学研究现状 | 第20-23页 |
| ·蛋白类药物的聚乙二醇修饰的研究进展 | 第23-32页 |
| ·聚乙二醇(PEG)简介 | 第24-25页 |
| ·蛋白质 PEG 修饰原理 | 第25-26页 |
| ·蛋白质 PEG 修饰位点 | 第26页 |
| ·随机修饰与定点修饰 | 第26-27页 |
| ·液相修饰和固相修饰 | 第27页 |
| ·PEG 修饰反应影响因素 | 第27页 |
| ·蛋白质 PEG 修饰的临床应用 | 第27-29页 |
| ·蛋白质 PEG 修饰中存在的问题 | 第29页 |
| ·PEG 修饰技术的展望 | 第29-32页 |
| 第2章 mPEG-SPA 和 rLZ-8 的理化性质及结构分析 | 第32-38页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验试剂 | 第33页 |
| ·试剂配制 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·mPEG-SPA 理化性质分析 | 第33-34页 |
| ·rLZ-8 纯度分析 | 第34页 |
| ·rLZ-8 结构分析 | 第34页 |
| ·实验结果 | 第34-37页 |
| ·mPEG-SPA 理化性质分析结果 | 第34-35页 |
| ·rLZ-8 纯度分析结果 | 第35页 |
| ·rLZ-8 结构分析结果 | 第35-37页 |
| ·实验小结 | 第37-38页 |
| 第3章 mPEG 化 rLZ-8 修饰工艺研究 | 第38-50页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第39-42页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·试剂配制 | 第39-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·修饰反应条件优化实验 | 第42-43页 |
| ·检测实验方法 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-49页 |
| ·修饰反应 pH 对反应产物组成的影响结果 | 第44-45页 |
| ·蛋白与修饰剂摩尔比对反应产物组成的影响结果 | 第45-46页 |
| ·反应缓冲液离子强度对修饰反应的影响结果 | 第46页 |
| ·反应时间对修饰反应的影响结果 | 第46-49页 |
| ·实验小结 | 第49-50页 |
| 第4章 mPEG 修饰 rLZ-8 反应产物的纯化工艺研究 | 第50-58页 |
| ·实验设备和试剂 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·试剂配制 | 第51页 |
| ·色谱条件 | 第51页 |
| ·SDS-PAGE 条件 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·四种修饰反应混合物的纯化 | 第52页 |
| ·四种修饰反应混合物的电泳检测 | 第52页 |
| ·修饰率的计算 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-56页 |
| ·PEG 化 rLZ-8 的纯化结果 | 第52-54页 |
| ·rLZ-8 与 mPEG-SPA 以不同摩尔比反应液碘化钡染色的电泳结果 | 第54-55页 |
| ·各配料比反应时目的产物占修饰总产物的比例 | 第55-56页 |
| ·实验小结 | 第56-58页 |
| 第5章 mPEG 修饰 rLZ-8 反应产物活性检测 | 第58-68页 |
| ·实验仪器和材料 | 第58-60页 |
| ·实验仪器 | 第58页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·实验试剂 | 第58-59页 |
| ·试剂配制 | 第59-60页 |
| ·细胞株 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·细胞复苏,冻存和传代 | 第60页 |
| ·Lowry 法测蛋白浓度(参照中国药典 2010 年版附录ⅥB 的方法) | 第60-61页 |
| ·修饰前后蛋白促进 HL60 细胞凝集作用实验 | 第61-62页 |
| ·BrdU 法检测修饰前后蛋白活性 | 第62-63页 |
| ·实验结果 | 第63-66页 |
| ·Lowry 法测蛋白含量直线回归方程 | 第63-64页 |
| ·Lowry 法对修饰前后蛋白浓度进行测定的结果 | 第64页 |
| ·修饰前后蛋白促进 HL60 细胞凝集作用实验结果 | 第64-66页 |
| ·BrdU 方法测定结果 | 第66页 |
| ·实验小结 | 第66-68页 |
| 第6章 mPEG 化 rLZ-8 修饰产物的分子量及位点确证 | 第68-74页 |
| ·实验方法 | 第68-69页 |
| ·分子量的测定 | 第68-69页 |
| ·修饰位点鉴定 | 第69页 |
| ·实验结果 | 第69-74页 |
| ·分子量的测定 | 第69-70页 |
| ·修饰产物修饰位点分析 | 第70-74页 |
| 第7章 讨论 | 第74-79页 |
| 第8章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88页 |