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重组灵芝免疫调节蛋白的聚乙二醇修饰及产物纯化

提要第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-14页
引言第14-16页
第1章 绪论第16-32页
   ·真菌免疫调节蛋白国内外研究进展第16-23页
     ·国内外对真菌免疫调节蛋白概述第16-17页
     ·四种真菌免疫调节蛋白国内外研究现状第17-20页
     ·国内外对真菌免疫调节蛋白药理学研究现状第20-23页
   ·蛋白类药物的聚乙二醇修饰的研究进展第23-32页
     ·聚乙二醇(PEG)简介第24-25页
     ·蛋白质 PEG 修饰原理第25-26页
     ·蛋白质 PEG 修饰位点第26页
     ·随机修饰与定点修饰第26-27页
     ·液相修饰和固相修饰第27页
     ·PEG 修饰反应影响因素第27页
     ·蛋白质 PEG 修饰的临床应用第27-29页
     ·蛋白质 PEG 修饰中存在的问题第29页
     ·PEG 修饰技术的展望第29-32页
第2章 mPEG-SPA 和 rLZ-8 的理化性质及结构分析第32-38页
   ·实验仪器及试剂第33页
     ·实验仪器第33页
     ·实验试剂第33页
     ·试剂配制第33页
   ·实验方法第33-34页
     ·mPEG-SPA 理化性质分析第33-34页
     ·rLZ-8 纯度分析第34页
     ·rLZ-8 结构分析第34页
   ·实验结果第34-37页
     ·mPEG-SPA 理化性质分析结果第34-35页
     ·rLZ-8 纯度分析结果第35页
     ·rLZ-8 结构分析结果第35-37页
   ·实验小结第37-38页
第3章 mPEG 化 rLZ-8 修饰工艺研究第38-50页
   ·实验仪器及试剂第39-42页
     ·实验仪器第39页
     ·试剂配制第39-42页
   ·实验方法第42-44页
     ·修饰反应条件优化实验第42-43页
     ·检测实验方法第43-44页
   ·实验结果第44-49页
     ·修饰反应 pH 对反应产物组成的影响结果第44-45页
     ·蛋白与修饰剂摩尔比对反应产物组成的影响结果第45-46页
     ·反应缓冲液离子强度对修饰反应的影响结果第46页
     ·反应时间对修饰反应的影响结果第46-49页
   ·实验小结第49-50页
第4章 mPEG 修饰 rLZ-8 反应产物的纯化工艺研究第50-58页
   ·实验设备和试剂第51页
     ·实验仪器第51页
     ·试剂配制第51页
     ·色谱条件第51页
     ·SDS-PAGE 条件第51页
   ·实验方法第51-52页
     ·四种修饰反应混合物的纯化第52页
     ·四种修饰反应混合物的电泳检测第52页
     ·修饰率的计算第52页
   ·实验结果第52-56页
     ·PEG 化 rLZ-8 的纯化结果第52-54页
     ·rLZ-8 与 mPEG-SPA 以不同摩尔比反应液碘化钡染色的电泳结果第54-55页
     ·各配料比反应时目的产物占修饰总产物的比例第55-56页
   ·实验小结第56-58页
第5章 mPEG 修饰 rLZ-8 反应产物活性检测第58-68页
   ·实验仪器和材料第58-60页
     ·实验仪器第58页
     ·实验动物第58页
     ·实验试剂第58-59页
     ·试剂配制第59-60页
     ·细胞株第60页
   ·实验方法第60-63页
     ·细胞复苏,冻存和传代第60页
     ·Lowry 法测蛋白浓度(参照中国药典 2010 年版附录ⅥB 的方法)第60-61页
     ·修饰前后蛋白促进 HL60 细胞凝集作用实验第61-62页
     ·BrdU 法检测修饰前后蛋白活性第62-63页
   ·实验结果第63-66页
     ·Lowry 法测蛋白含量直线回归方程第63-64页
     ·Lowry 法对修饰前后蛋白浓度进行测定的结果第64页
     ·修饰前后蛋白促进 HL60 细胞凝集作用实验结果第64-66页
     ·BrdU 方法测定结果第66页
   ·实验小结第66-68页
第6章 mPEG 化 rLZ-8 修饰产物的分子量及位点确证第68-74页
   ·实验方法第68-69页
     ·分子量的测定第68-69页
     ·修饰位点鉴定第69页
   ·实验结果第69-74页
     ·分子量的测定第69-70页
     ·修饰产物修饰位点分析第70-74页
第7章 讨论第74-79页
第8章 结论第79-80页
参考文献第80-88页
致谢第88页

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